| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-32页 |
| 第一章 扬子鳄研究进展 | 第12-18页 |
| 1 扬子鳄简介与起源 | 第12-13页 |
| 2 扬子鳄分布与保护 | 第13页 |
| 3 扬子鳄的经济价值 | 第13-14页 |
| 4 扬子鳄的研究现状 | 第14页 |
| 5 扬子鳄的疾病发生 | 第14-16页 |
| 参考文献 | 第16-18页 |
| 第二章 爬行动物免疫学研究进展 | 第18-24页 |
| 1 爬行动物的免疫器官 | 第18页 |
| 2 爬行动物的天然免疫 | 第18-19页 |
| 3 爬行动物的获得性免疫 | 第19-20页 |
| 4 研究爬行动物免疫的意义 | 第20-21页 |
| 参考文献 | 第21-24页 |
| 第三章 Toll样受体研究进展 | 第24-32页 |
| 1 Toll样受体概述 | 第24-25页 |
| 2 Toll样受体2研究进展 | 第25-26页 |
| 2.1 分布与结构 | 第25页 |
| 2.2 生物学功能 | 第25-26页 |
| 2.3 与疾病关系 | 第26页 |
| 3 Toll样受体7研究进展 | 第26-28页 |
| 3.1 分布与结构 | 第26页 |
| 3.2 生物学功能 | 第26-27页 |
| 3.3 与疾病关系 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-32页 |
| 第二篇 试验研究 | 第32-68页 |
| 第四章 扬子鳄TLR2、TLR7基因克隆及其序列分析 | 第32-46页 |
| 摘要 | 第32页 |
| 1 实验材料 | 第32-33页 |
| 1.1 动物组织 | 第32-33页 |
| 1.2 主要试剂 | 第33页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第33页 |
| 2 实验方法 | 第33-37页 |
| 2.1 总RNA提取与反转录 | 第33-35页 |
| 2.2 引物的设计与合成 | 第35页 |
| 2.3 PCR反应体系和反应条件 | 第35-36页 |
| 2.4 PCR产物回收与纯化 | 第36页 |
| 2.5 PCR产物的连接 | 第36页 |
| 2.6 感受态的制备 | 第36页 |
| 2.7 转化 | 第36-37页 |
| 2.8 菌落的PCR鉴定 | 第37页 |
| 2.9 测序分析 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-41页 |
| 3.1 TLR2、TLR7扩增结果 | 第37-38页 |
| 3.2 质粒的鉴定与测序 | 第38页 |
| 3.3 同源性分析与进化树构建 | 第38-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-44页 |
| ABSTRACT | 第44-46页 |
| 第五章 TLR7重组蛋白的原核表达及多抗制备 | 第46-58页 |
| 摘要 | 第46页 |
| 1 实验材料 | 第46-47页 |
| 1.1 实验动物 | 第46页 |
| 1.2 菌种和质粒 | 第46-47页 |
| 1.3 主要试剂 | 第47页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第47页 |
| 2 实验方法 | 第47-51页 |
| 2.1 引物的设计与合成 | 第47-48页 |
| 2.2 重组质粒的构建 | 第48页 |
| 2.3 重组蛋白的原核表达 | 第48-49页 |
| 2.4 重组蛋白的切胶纯化 | 第49页 |
| 2.5 多克隆抗体的制备 | 第49-50页 |
| 2.6 多抗效价的测定 | 第50-51页 |
| 2.6.1 间接ELISA法 | 第50页 |
| 2.6.2 方阵滴定法 | 第50页 |
| 2.6.3 抗体效价测定 | 第50-51页 |
| 2.7 Western-blot鉴定 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-54页 |
| 3.1 酶切鉴定结果 | 第51-52页 |
| 3.2 重组蛋白的诱导表达与纯化 | 第52页 |
| 3.3 兔多抗血清的效价测定 | 第52-53页 |
| 3.4 Western-blot验证结果 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-56页 |
| ABSTRACT | 第56-58页 |
| 第六章 TLR7蛋白及mRNA组织表达差异分析 | 第58-68页 |
| 摘要 | 第58页 |
| 1 实验材料 | 第58-59页 |
| 1.1 动物组织 | 第58-59页 |
| 1.2 主要试剂 | 第59页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第59页 |
| 2 实验方法 | 第59-61页 |
| 2.1 Western-blot测定TLR7蛋白的表达 | 第59-60页 |
| 2.1.1 各组织总蛋白提取 | 第59页 |
| 2.1.2 Western-blot检测 | 第59-60页 |
| 2.2 荧光定量PCR测定TLR7 mRNA的表达 | 第60-61页 |
| 2.2.1 荧光定量引物设计 | 第60页 |
| 2.2.2 各组织RNA提取与反转录 | 第60页 |
| 2.2.3 实时定量PCR反应 | 第60-61页 |
| 3 结果 | 第61-64页 |
| 3.1 Western-blot检测结果 | 第61-62页 |
| 3.2 荧光定量PCR结果 | 第62-64页 |
| 3.2.1 PCR产物特异性分析 | 第62-63页 |
| 3.2.2 不同组织TLR7 mRNA的表达差异分析 | 第63-64页 |
| 4 讨论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-67页 |
| ABSTRACT | 第67-68页 |
| 全文总结 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 发表论文 | 第72页 |
