| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-27页 |
| 第一章 传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)研究进展 | 第11-19页 |
| 1 IHHNV简介 | 第11-13页 |
| 1.1 IHHNV的发现及流行情况 | 第11-12页 |
| 1.2 IHHNV的易感动物、临床症状、病理特征 | 第12-13页 |
| 1.3 IHHNV的传播途径 | 第13页 |
| 2 IHHNV的结构特征及基因组特征 | 第13页 |
| 3 感染的分子机制 | 第13-15页 |
| 参考文献 | 第15-19页 |
| 第二章 病毒覆盖蛋白印迹技术(VOPBA)原理及其应用 | 第19-23页 |
| 1 VOPBA原理 | 第19页 |
| 2 VOPBA的应用 | 第19-21页 |
| 参考文献 | 第21-23页 |
| 第三章 噬菌体肽库展示技术 | 第23-27页 |
| 1 噬菌体肽库展示技术分类 | 第23页 |
| 2 噬菌体肽库展示技术原理 | 第23-24页 |
| 3 噬菌体肽库展示技术应用 | 第24-26页 |
| 3.1 生物信息传递 | 第24页 |
| 3.2 抗体及疫苗制备 | 第24页 |
| 3.3 抗原表位分析 | 第24-25页 |
| 3.4 疾病诊断与治疗 | 第25-26页 |
| 参考文献 | 第26-27页 |
| 第二篇 试验研究 | 第27-65页 |
| 第四章 IHHNV CP原核表达和多克隆抗体的制备 | 第27-37页 |
| 1 材料与方法 | 第27-30页 |
| 1.1 主要材料 | 第27-28页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第28页 |
| 1.3 IHHNV CP蛋白原核表达载体的构建 | 第28页 |
| 1.4 IHHNV CP蛋白诱导表达及纯化 | 第28-29页 |
| 1.5 IHHNV CP蛋白多抗的制备及效价的测定 | 第29-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-33页 |
| 2.1 IHHNV CP原核表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.2 IHHNV CP诱导表达及纯化 | 第31页 |
| 2.3 IHHNV CP多抗效价的测定 | 第31-33页 |
| 2.3.1 兔抗IHHNV CP多抗的间接ELISA方阵滴定结果 | 第31-32页 |
| 2.3.2 兔抗IHHNV CP多抗的三免效价的测定 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-37页 |
| 第五章 IHHNV衣壳蛋白凡纳滨对虾鳃细胞膜受体筛选及验证 | 第37-55页 |
| 1 材料与方法 | 第37-42页 |
| 1.1 主要材料 | 第37-38页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第38页 |
| 1.3 凡纳滨对虾鳃细胞膜蛋白的提取 | 第38页 |
| 1.4 IHHNV CP凡纳滨对虾鳃细胞膜受体一维的筛选 | 第38-40页 |
| 1.4.1 VOPBA | 第38-39页 |
| 1.4.2 HIS Pull Down | 第39-40页 |
| 1.5 IHHNV CP凡纳滨对虾鳃细胞膜受体VOPBA二维的筛选 | 第40-41页 |
| 1.6 疑似受体蛋白NM23的验证 | 第41-42页 |
| 1.6.1 pGEX-4t-1 -NM23原核表达载体的构建及纯化 | 第41-42页 |
| 1.6.2 NM23 VOPBA验证实验 | 第42页 |
| 1.6.3 NM23 GST Pull Down验证实验 | 第42页 |
| 2 结果 | 第42-48页 |
| 2.1 IHHNV CP凡纳滨对虾鳃细胞膜受体的筛选 | 第42-45页 |
| 2.1.1 未感染IHHNV凡纳滨对虾鳃细胞膜蛋白的提取 | 第42-43页 |
| 2.1.2 VOPBA(一维)实验VOPBA和HIS Pull Down | 第43-44页 |
| 2.1.3 VOPBA(二维)实验 | 第44-45页 |
| 2.2 疑似受体蛋白NM23的验证 | 第45-48页 |
| 2.2.1 NM23-pGEX -4t-1原核表达载体的构建及纯化 | 第45-46页 |
| 2.2.2 NM23 VOPBA验证实验 | 第46-47页 |
| 2.2.3 NM23 GST Pull Down | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 第六章 噬菌体随机十二肽库筛选IHHNV衣壳蛋白结合肽 | 第55-65页 |
| 1 材料与方法 | 第55-58页 |
| 1.1 主要材料 | 第55页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第55-56页 |
| 1.3 噬菌体随机十二肽库筛选衣壳蛋白结合肽 | 第56-57页 |
| 1.3.1 噬菌体随机十二肽库容量的测定 | 第56页 |
| 1.3.2 IHHNV CP与噬菌体随机十二肽库的亲和筛选 | 第56-57页 |
| 1.4 第四次洗脱液得到单克隆的克隆特性 | 第57页 |
| 1.5 噬菌体结合特性鉴定 | 第57页 |
| 1.6 阳性单克隆噬菌体DNA的提取 | 第57页 |
| 1.7 序列A氨基酸序列与NM23氨基酸序列比对 | 第57-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-61页 |
| 2.1 E.coli ER2738的生长曲线测定 | 第58页 |
| 2.2 噬菌体随机十二肽库筛选衣壳蛋白结合肽 | 第58-59页 |
| 2.3 洗脱噬菌体和噬菌体单克隆的间接ELISA检测 | 第59页 |
| 2.4 噬菌体单克隆插入序列的PCR鉴定及测序 | 第59-61页 |
| 2.5 序列A与NM23氨基酸序列比对 | 第61页 |
| 3 讨论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 全文总结 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 发表论文 | 第69-71页 |
| 附录 实验主要所需试剂配制 | 第71-75页 |
