摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
引言 | 第10-11页 |
上篇 文献综述 | 第11-40页 |
第一章 启动子研究进展 | 第12-22页 |
1 启动子概述 | 第12-14页 |
1.1 原核生物的启动子 | 第12-13页 |
1.2 真核生物的启动子 | 第13-14页 |
2 诱导型启动子研究进展 | 第14-22页 |
2.1 天然诱导型启动子 | 第15-17页 |
2.2 人工构建的诱导型启动子 | 第17-18页 |
2.3 诱导型启动子的研究方法 | 第18-22页 |
第二章 实时定量PCR技术的研究进展 | 第22-34页 |
1 实时定量PCR的研究进展 | 第22-30页 |
1.1 实时定量PCR的原理 | 第22-24页 |
1.2 实时定量PCR的方法 | 第24-26页 |
1.3 实时定量PCR常见问题 | 第26-28页 |
1.4 实时定量PCR应用 | 第28-30页 |
2 内参基因的研究进展 | 第30-34页 |
2.1 内参基因简介 | 第30页 |
2.2 选择内参基因的标准 | 第30-31页 |
2.3 常用的内参基因 | 第31-33页 |
2.4 选择内参基因的方法 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-40页 |
下篇 研究内容 | 第40-86页 |
第一章 大豆中疫霉诱菌特异诱导性启动子的人工合成和功能研究 | 第42-64页 |
1 材料与方法 | 第43-47页 |
1.1 实验材料 | 第43页 |
1.2 疫霉特异诱导性基因的获得 | 第43-44页 |
1.3 疫霉特异诱导性基因启动子结构元件特征的分析 | 第44页 |
1.4 疫霉特异诱导性启动子的设计与人工合成 | 第44页 |
1.5 相关载体的构建 | 第44-45页 |
1.6 烟草的瞬时转化与接种 | 第45-46页 |
1.7 化学组织GUS染色 | 第46页 |
1.8 GUS蛋白酶活性的测定 | 第46-47页 |
2 结果与分析 | 第47-61页 |
2.1 疫霉诱导性基因启动子中已知结构元件的分析 | 第47-49页 |
2.2 疫霉诱导性基因启动子中新结构元件的分析 | 第49-53页 |
2.3 人工合成启动子载体的构建 | 第53-54页 |
2.4 人工合成启动子受诱导情况的检测 | 第54-60页 |
2.5 部分人工合成启动子与启动子全长的比较 | 第60-61页 |
3 讨论 | 第61-64页 |
第二章 实时定量PCR分析中大豆内参基因的筛选和验证 | 第64-82页 |
1 材料与方法 | 第66-69页 |
1.1 材料 | 第66页 |
1.2 大豆植株预处理 | 第66页 |
1.3 总RNA的提取与cDNA合成 | 第66-68页 |
1.4 内参基因的选择和引物设计 | 第68-69页 |
1.5 实时荧光定量PCR | 第69页 |
1.6 标准曲线的绘制及基因扩增效率 | 第69页 |
1.7 数据分析 | 第69页 |
2 结果与分析 | 第69-79页 |
2.1 RNA的分离与纯化 | 第69-70页 |
2.2 扩增效率和扩增特异性 | 第70-71页 |
2.3 内参基因转录水平分析 | 第71-73页 |
2.4 内参基因的稳定性分析 | 第73-77页 |
2.5 内参基因病原诱导稳定性验证 | 第77-79页 |
3 讨论 | 第79-82页 |
参考文献 | 第82-86页 |
全文结论与创新点 | 第86-88页 |
攻读硕士学位期间发表的研究论文 | 第88-90页 |
致谢 | 第90页 |