| 致谢 | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-12页 |
| 中文摘要 | 第12-16页 |
| Abstract | 第16-19页 |
| 论文创新点 | 第20-21页 |
| 缩略词表 | 第21-28页 |
| 1.Junctophilin 3,4连接吞噬参与神经极化作用研究 | 第28-65页 |
| 引言 | 第28-30页 |
| 1.1 仪器和试剂 | 第30-32页 |
| 1.1.1 细胞株及动物 | 第30页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第30页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
| 1.1.4 常用溶液及主要试剂配制 | 第31-32页 |
| 1.2 实验方法 | 第32-38页 |
| 1.2.1 小鼠胚胎干(Embryonic stem,ES)细胞培养 | 第32-33页 |
| 1.2.2 小鼠ES细胞体外定向分化神经细胞 | 第33页 |
| 1.2.3 免疫蛋白印迹 | 第33-34页 |
| 1.2.3.1 总蛋白提取 | 第33-34页 |
| 1.2.3.2 免疫蛋白质印迹 | 第34页 |
| 1.2.4 免疫荧光染色 | 第34页 |
| 1.2.5 siRNA干扰 | 第34-35页 |
| 1.2.6 cAMP及cGMP含量测定 | 第35页 |
| 1.2.7 吞噬百分数统计 | 第35页 |
| 1.2.8 透射电镜检测吞噬 | 第35-36页 |
| 1.2.9 质粒构建 | 第36页 |
| 1.2.10 凋亡细胞的制备及孵育 | 第36-37页 |
| 1.2.11 钙瞬变检测 | 第37页 |
| 1.2.12 免疫共沉淀 | 第37页 |
| 1.2.13 数据分析 | 第37-38页 |
| 1.3 实验结果 | 第38-61页 |
| 1.3.1 JP3,4在胚胎干细胞分化神经细胞过程的表达 | 第38-39页 |
| 1.3.2 siRNA沉默Jp3,4表达对ES细胞衍生神经生长锥的影响 | 第39-40页 |
| 1.3.3 si-Jp3,4对ES细胞衍生神经前体细胞胞浆Ca~(2+)分布及瞬变的影响 | 第40-42页 |
| 1.3.4 siRNA沉默Jp3,4表达对ES细胞衍生的神经前体细胞cAMP及cGMP水平的影响 | 第42-43页 |
| 1.3.5 si-Jp3,4对神经轴突形成cAMP-LKB1-SAD/MARK2通路的影响 | 第43-44页 |
| 1.3.6 ES细胞衍生神经细胞早期表达JP3,4参与吞噬 | 第44-45页 |
| 1.3.7 ES细胞分化神经细胞早期伴随凋亡及吞噬通路的激活 | 第45-46页 |
| 1.3.8 小鼠脑部发育过程JP3,4、Megfl0及caspase-3的表达 | 第46-47页 |
| 1.3.9 siRNA沉默JP3,4表达对吞噬的影响 | 第47-49页 |
| 1.3.10 si-Jp3,4对ES细胞衍生神经前体细胞SOCE相关蛋白表达的影响 | 第49-50页 |
| 1.3.11 凋亡细胞刺激ES细胞衍生EBs对JP3,4表达的影响 | 第50-51页 |
| 1.3.12 凋亡细胞上清刺激ES细胞衍生EBs对JP3,4表达的影响 | 第51-53页 |
| 1.3.13 Caspase抑制剂z-VAD-fmk对ES细胞分化神经早期JP3,4表达的影响 | 第53页 |
| 1.3.14 凋亡细胞刺激ES细胞衍生EBs对JP3,4与RyRs结合的影响 | 第53-54页 |
| 1.3.15 凋亡细胞刺激ES细胞衍生EBs对JP3,4与Megf10结合的影响 | 第54-55页 |
| 1.3.16 凋亡细胞刺激ES细胞衍生EBs对分化早期cAMP及cGMP水平的影响 | 第55-56页 |
| 1.3.17 凋亡信号刺激ES细胞衍生EBs对未成熟神经突极化的影响 | 第56-57页 |
| 1.3.18 凋亡细胞刺激ES细胞衍生EBs对cAMP-LKB1-SAD/MARK2通路的影响 | 第57-58页 |
| 1.3.19 凋亡细胞刺激ES细胞衍生EBs对神经前体细胞Ca~(2+)瞬变能力的影响 | 第58-60页 |
| 1.3.20 凋亡细胞刺激ES细胞衍生EBs对分化终点神经相关蛋白表达的影响 | 第60-61页 |
| 1.3.21 ES细胞过表达JP3对神经分化终端轴突和树突相关蛋白表达的影响 | 第61页 |
| 1.4 讨论 | 第61-64页 |
| 1.5 结论 | 第64-65页 |
| 附：JP3,4参与ES细胞神经分化过程轴突修剪研究 | 第65-81页 |
| 引言 | 第65-66页 |
| 2.1 仪器和试剂 | 第66-68页 |
| 2.1.1 细胞株和实验动物 | 第66页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第66页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第66-67页 |
| 2.1.4 常用溶液及主要试剂配制 | 第67-68页 |
| 2.2 实验方法 | 第68-72页 |
| 2.2.1 小鼠胚胎干(Embryonic stem,ES)细胞培养 | 第68-69页 |
| 2.2.1.1 制备原代小鼠胚胎成纤维(Mouse embryonic fibroblast,MEF)细胞 | 第68页 |
| 2.2.1.2 制备饲养层细胞 | 第68页 |
| 2.2.1.3 小鼠ES细胞支持培养 | 第68-69页 |
| 2.2.2 小鼠ES细胞体外定向分化神经细胞 | 第69页 |
| 2.2.3 免疫蛋白印迹 | 第69-70页 |
| 2.2.4 免疫荧光染色 | 第70页 |
| 2.2.5 siRNA干扰及慢病毒构建 | 第70-71页 |
| 2.2.6 透射电镜检测吞噬 | 第71页 |
| 2.2.7 数据分析 | 第71-72页 |
| 2.3 实验结果 | 第72-79页 |
| 2.3.1 沉默Megf10检测JP3,4的表达 | 第72页 |
| 2.3.2 沉默JP3,4检测Megf10的表达 | 第72-73页 |
| 2.3.3 免疫荧光染色检测神经分化d 8+5吞噬情况 | 第73-74页 |
| 2.3.4 电镜检测神经分化d 8+5吞噬情况 | 第74-75页 |
| 2.3.5 JP3,4在神经分化d 8+5的表达 | 第75-76页 |
| 2.3.6 表达Megf10细胞吞噬轴突碎片 | 第76-77页 |
| 2.3.7 表达JP4细胞吞噬轴突碎片 | 第77-79页 |
| 2.4 讨论 | 第79-80页 |
| 2.5 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 综述 | 第87-107页 |
| 参考文献 | 第99-107页 |
| 作者简历及在读期间取得的科研成果 | 第107-110页 |
