| 摘要 | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1 植物油脂的生物合成 | 第10-15页 |
| 1.1 植物油脂 | 第10-11页 |
| 1.2 植物油脂合成过程中的相关基因 | 第11-13页 |
| 1.3 DGAT基因的研究进展 | 第13-15页 |
| 2 大豆的遗传转化体系研究进展 | 第15-16页 |
| 3 本研究的目的意义和主要研究内容 | 第16-17页 |
| 4 技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 GmDGAT1A基因时空表达和种子油脂积累动态变化的分析 | 第18-27页 |
| 1 材料 | 第18-19页 |
| 1.1 试验材料及取样 | 第18页 |
| 1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
| 1.3 主要仪器 | 第19页 |
| 2 试验方法 | 第19-22页 |
| 2.1 大豆总RNA提取及质量测定 | 第19页 |
| 2.2 cDNA反转录 | 第19-20页 |
| 2.3 荧光定量PCR | 第20-21页 |
| 2.4 不同发育阶段种子含油量及各脂肪酸成分含量的测定 | 第21-22页 |
| 3 结果分析 | 第22-25页 |
| 3.1 大豆各样品提取总RNA质量的检测 | 第22-23页 |
| 3.2 大豆GmDGAT1A基因的组织特异表达特性分析 | 第23页 |
| 3.3 大豆发育种子中GmDGAT1A时序表达特性分析 | 第23-24页 |
| 3.4 大豆发育中总油脂及主要脂肪酸成分动态变化检测 | 第24-25页 |
| 4 讨论 | 第25-26页 |
| 4.1 不同器官和发育种子中大豆GmDGAT1A的表达分析 | 第25-26页 |
| 4.2 大豆种子不同发育阶段GmDGAT1A表达特性与含油量变化的相关性 | 第26页 |
| 5 小结 | 第26-27页 |
| 第三章 种子特异表达GmDGAT1A载体构建与大豆遗传转化 | 第27-38页 |
| 1 材料 | 第27页 |
| 1.1 供试大豆及质粒载体材料 | 第27页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第27页 |
| 2 试验方法 | 第27-32页 |
| 2.1 大豆GmDGAT1A基因编码序列 | 第27-28页 |
| 2.2 PCR产物回收纯化 | 第28页 |
| 2.3 目的片段与pBluescript载体连接 | 第28-29页 |
| 2.4 大肠杆菌转化 | 第29-30页 |
| 2.5 菌液PCR鉴定 | 第30页 |
| 2.6 质粒提取 | 第30页 |
| 2.7 目的片段与表达载体连接 | 第30-31页 |
| 2.8 大豆遗传转化 | 第31-32页 |
| 2.9 大豆GmDGAT1A基因整合与表达的PCR检测 | 第32页 |
| 3 结果分析 | 第32-36页 |
| 3.1 大豆GmDGAT1A种子特异性表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 3.2 大豆遗传转化体系的优化 | 第33-34页 |
| 3.3 转基因大豆体细胞胚的分子鉴定 | 第34-36页 |
| 4 讨论 | 第36-37页 |
| 4.1 大豆GmDGAT1A种子特异性表达载体构建 | 第36页 |
| 4.2 大豆遗传转化体系 | 第36-37页 |
| 5 小结 | 第37-38页 |
| 第四章 种子特异表达GmDGAT1A对油脂和蛋白积累等种子特性的影响 | 第38-44页 |
| 1 材料 | 第38页 |
| 1.1 供试材料 | 第38页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第38页 |
| 2 试验方法 | 第38-39页 |
| 2.1 测定种子总油脂及各脂肪酸组分 | 第38-39页 |
| 2.2 种子蛋白含量的测定 | 第39页 |
| 2.3 转基因大豆百粒重的测定 | 第39页 |
| 2.4 转基因大豆萌发性状的测定 | 第39页 |
| 2.5 数据分析 | 第39页 |
| 3 结果分析 | 第39-42页 |
| 3.1 转基因大豆种子油脂及各脂肪酸含量的测定 | 第39-40页 |
| 3.2 转GmDGAT1A基因对种子蛋白含量、百粒重以及萌发性状的影响 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42页 |
| 4.1 种子特异表达GmDGAT1A基因对种子油脂和蛋白含量的影响 | 第42页 |
| 4.2 种子特异表达GmDGAT1A基因对种子其它农艺性状的影响 | 第42页 |
| 5 小结 | 第42-44页 |
| 全文总结 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| Abstract | 第50-51页 |
| 附录1 | 第52-53页 |
| 附录2 | 第53-54页 |
| 附录3 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
