| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 缩略词表 | 第9-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-21页 |
| ·鸭疫里默氏菌的研究概况 | 第13-16页 |
| ·鸭疫里默氏菌病原 | 第13-14页 |
| ·鸭疫里默氏菌血清型 | 第14-15页 |
| ·鸭疫里默氏菌全基因组序列的测定 | 第15页 |
| ·鸭疫里默氏菌毒力因子研究 | 第15-16页 |
| ·脂多糖的研究 | 第16-20页 |
| ·LPS的结构特点 | 第17-18页 |
| ·LPS的生物合成及遗传调控 | 第18-19页 |
| ·LPS的生物学作用 | 第19页 |
| ·LPS的提取及其鉴定方法 | 第19-20页 |
| ·研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 生物信息学分析 | 第21-27页 |
| ·序列BLASTN比对 | 第21-22页 |
| ·基因的核苷酸序列分析 | 第22页 |
| ·开放阅读框架(Open Reading Frame,ORF)预测 | 第22-23页 |
| ·蛋白质生物信息学分析 | 第23-27页 |
| ·LpsA基因编码氨基酸翻译和蛋白质组分分析 | 第23-24页 |
| ·氨基酸序列比对 | 第24-26页 |
| ·功能预测与分析 | 第26-27页 |
| 3 实验内容 | 第27-46页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·菌株及培养条件 | 第27页 |
| ·主要酶、生化试剂 | 第27页 |
| ·主要培养基配制 | 第27-28页 |
| ·抗生素配制及DAP的配制 | 第28页 |
| ·主要缓冲液及试剂配制 | 第28页 |
| ·主要仪器及软件 | 第28-29页 |
| ·PCR引物设计 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-46页 |
| ·细菌的复苏培养 | 第29-30页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第30页 |
| ·RA CH-1的B739-0835(lpsA)基因扩增 | 第30页 |
| ·目的基因lpsA的克隆与测序 | 第30-32页 |
| ·突变株的构建 | 第32-35页 |
| ·重叠片段的扩增 | 第32-33页 |
| ·重叠片段的融合 | 第33-34页 |
| ·自杀性质粒pYA4278-LSR的构建 | 第34-35页 |
| ·E.coli X7213λpir(pYA4278-LSR) | 第35页 |
| ·突变株RACH-1ΔlpsA的构建 | 第35-37页 |
| ·突变株RA CH-1ΔlpsA的生物学特性 | 第37-41页 |
| ·突变株RA CH-1ΔlpsA生长曲线的测定 | 第37页 |
| ·突变株RA CH-1ΔlpsA的生化特性 | 第37-38页 |
| ·突变株RA CH-1ΔlpsA的遗传稳定性 | 第38页 |
| ·突变株RA CH-1ΔlpsA及亲本株药敏实验 | 第38页 |
| ·突变株RA CH-1ΔlpsA LD_(50)的测定 | 第38-40页 |
| ·突变株RA CH-1ΔlpsA黏附力及侵袭力 | 第40-41页 |
| ·突变株RA CH-1ΔlpsA脂多糖特性研究 | 第41-45页 |
| ·细菌脂多糖的提取 | 第41-43页 |
| ·脂多糖SDS-PAGE鉴定 | 第43-44页 |
| ·脂多糖银染显色 | 第44-45页 |
| ·鸭疫里默氏菌脂多糖多克隆抗体的制备 | 第45-46页 |
| ·凝集试验 | 第46页 |
| 4 实验结果 | 第46-56页 |
| ·LpsA目的基因的扩增 | 第46页 |
| ·目的基因lpsA的克隆及测序 | 第46-47页 |
| ·重叠片段(L、S、R)的扩增 | 第47页 |
| ·重叠PCR(SOE-PCR)融合3片段 | 第47-48页 |
| ·重组质粒pYA4278-LSR的构建 | 第48-49页 |
| ·鸭疫里默氏菌RACH-1ΔlpsA基因缺失株的筛选鉴定 | 第49-50页 |
| ·鸭疫里默氏菌CH-1 ΔlpsA基因缺失株的生物学特性 | 第50-55页 |
| ·鸭疫里默氏菌CH-1△lpsA基因缺失株生长曲线的测定 | 第50-51页 |
| ·API 20NE测定结果 | 第51-52页 |
| ·Biolog微生物鉴定系统检测结果 | 第52页 |
| ·RA CH-1△lpsA基因缺失株遗传稳定性 | 第52页 |
| ·药敏实验结果 | 第52-53页 |
| ·鸭疫里默氏菌CH-1、CH-1 ΔlpsA基因缺失株黏附与入侵实验 | 第53-54页 |
| ·鸭疫里默氏菌CH-1ΔlpsA基因缺失株LD_(50)的测定 | 第54-55页 |
| ·鸭疫里默氏菌CH-1ΔlpsA基因缺失株脂多糖 | 第55-56页 |
| ·SDS-PAGE电泳、银染检测脂多糖 | 第55-56页 |
| ·鸭疫里默氏菌脂多糖多克隆抗体制备 | 第56页 |
| ·凝集试验结果 | 第56页 |
| 5 讨论 | 第56-59页 |
| ·突变株RA CH-1ΔlpsA的构建 | 第57页 |
| ·LpsA对菌体生物学特性的影响 | 第57-58页 |
| ·LpsA对脂多糖合成的影响 | 第58-59页 |
| ·LpsA对毒力及免疫原性的影响 | 第59页 |
| 6 结论 | 第59-60页 |
| 7 参考文献 | 第60-68页 |
| 8 致谢 | 第68-69页 |
| 9 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第69页 |
