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表达禽流感病毒HA基因重组鸭病毒性肠炎病毒诱导特异性快速免疫保护机制的研究

摘要第1-5页
Summary第5-11页
第一章绪论第11-20页
 1.禽流感病毒概述第12-17页
   ·流感病毒分子生物学研究进展第12-13页
   ·H5N1亚型禽流感第13-14页
   ·HA蛋白第14-15页
   ·HA蛋白的信号肽与跨膜区第15-16页
   ·禽流感病毒疫苗研究进展第16-17页
 2.鸭病毒性肠炎病毒概述第17-20页
   ·鸭病毒性肠炎病毒研究进展第17-18页
   ·鸭病毒性肠炎病毒载体研究进展第18-20页
第二章表达H5亚型禽流感病毒不同形式HA基因重组鸭病毒性肠炎病毒的构建与鉴定第20-38页
 1.材料与方法第20-30页
   ·病毒株、重组质粒及细胞第20页
   ·试剂与耗材第20-21页
   ·主要仪器第21-22页
   ·试验动物第22页
   ·引物的设计合成第22页
   ·表达缺失信号肽或跨膜区AIV HA基因重组质粒的构建第22-25页
   ·重组粘粒T-us78HApk和T-us78HApsm的构建第25页
   ·重组病毒的拯救第25-28页
   ·重组病毒的鉴定第28-29页
   ·重组病毒一步生长曲线的测定第29页
   ·重组病毒的攻毒保护效力评估第29-30页
 2.结果第30-36页
   ·不同区域HA基因的扩增及重组质粒的鉴定第30-31页
   ·重组病毒的成功拯救第31-32页
   ·重组病毒的PCR鉴定第32页
   ·重组病毒的IFA鉴定第32-33页
   ·重组病毒的Western blot鉴定第33-34页
   ·重组病毒的生长动力学曲线第34页
   ·重组病毒的攻毒保护效力评估第34-36页
 3.讨论第36-38页
第三章禽流感重组鸭病毒性肠炎病毒载体活疫苗在鸭体内诱导天然免疫情况研究第38-51页
 1.材料与方法第38-44页
   ·疫苗第38页
   ·主要试剂第38页
   ·主要仪器设备第38-39页
   ·试验动物第39页
   ·试验设计第39页
   ·引物设计第39页
   ·组织总RNA提取第39-41页
   ·反转录第41-42页
   ·质粒标准品的制备第42-43页
   ·质粒标准品浓度的测定及拷贝数的计算第43页
   ·荧光定量PCR第43-44页
   ·标准品标准曲线的绘制第44页
   ·方法性能评估第44页
   ·细胞因子的表达定量第44页
 2.结果第44-48页
   ·标准曲线的绘制第44-46页
   ·性能评估第46-47页
   ·细胞因子mRNA表达定量第47-48页
 3.讨论第48-51页
第四章禽流感重组鸭病毒性肠炎病毒载体活疫苗在鸭体内诱导获得性免疫情况研究第51-56页
 1.材料与方法第51-52页
   ·疫苗及动物第51页
   ·主要试剂第51-52页
   ·主要仪器设备第52页
   ·方法第52页
 2 结果第52-55页
   ·淋巴细胞刺激增殖指数(SI)测定结果第52-53页
   ·CD~(4+)淋巴细胞测定结果第53-54页
   ·间接ELISA检测HA特异性抗体结果第54-55页
 3.讨论第55-56页
第五章全文结论第56-57页
参考文献第57-65页
致谢第65-66页
作者简介第66-67页
导师简介第67-68页

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