摘要 | 第1-5页 |
Summary | 第5-11页 |
第一章绪论 | 第11-20页 |
1.禽流感病毒概述 | 第12-17页 |
·流感病毒分子生物学研究进展 | 第12-13页 |
·H5N1亚型禽流感 | 第13-14页 |
·HA蛋白 | 第14-15页 |
·HA蛋白的信号肽与跨膜区 | 第15-16页 |
·禽流感病毒疫苗研究进展 | 第16-17页 |
2.鸭病毒性肠炎病毒概述 | 第17-20页 |
·鸭病毒性肠炎病毒研究进展 | 第17-18页 |
·鸭病毒性肠炎病毒载体研究进展 | 第18-20页 |
第二章表达H5亚型禽流感病毒不同形式HA基因重组鸭病毒性肠炎病毒的构建与鉴定 | 第20-38页 |
1.材料与方法 | 第20-30页 |
·病毒株、重组质粒及细胞 | 第20页 |
·试剂与耗材 | 第20-21页 |
·主要仪器 | 第21-22页 |
·试验动物 | 第22页 |
·引物的设计合成 | 第22页 |
·表达缺失信号肽或跨膜区AIV HA基因重组质粒的构建 | 第22-25页 |
·重组粘粒T-us78HApk和T-us78HApsm的构建 | 第25页 |
·重组病毒的拯救 | 第25-28页 |
·重组病毒的鉴定 | 第28-29页 |
·重组病毒一步生长曲线的测定 | 第29页 |
·重组病毒的攻毒保护效力评估 | 第29-30页 |
2.结果 | 第30-36页 |
·不同区域HA基因的扩增及重组质粒的鉴定 | 第30-31页 |
·重组病毒的成功拯救 | 第31-32页 |
·重组病毒的PCR鉴定 | 第32页 |
·重组病毒的IFA鉴定 | 第32-33页 |
·重组病毒的Western blot鉴定 | 第33-34页 |
·重组病毒的生长动力学曲线 | 第34页 |
·重组病毒的攻毒保护效力评估 | 第34-36页 |
3.讨论 | 第36-38页 |
第三章禽流感重组鸭病毒性肠炎病毒载体活疫苗在鸭体内诱导天然免疫情况研究 | 第38-51页 |
1.材料与方法 | 第38-44页 |
·疫苗 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
·主要仪器设备 | 第38-39页 |
·试验动物 | 第39页 |
·试验设计 | 第39页 |
·引物设计 | 第39页 |
·组织总RNA提取 | 第39-41页 |
·反转录 | 第41-42页 |
·质粒标准品的制备 | 第42-43页 |
·质粒标准品浓度的测定及拷贝数的计算 | 第43页 |
·荧光定量PCR | 第43-44页 |
·标准品标准曲线的绘制 | 第44页 |
·方法性能评估 | 第44页 |
·细胞因子的表达定量 | 第44页 |
2.结果 | 第44-48页 |
·标准曲线的绘制 | 第44-46页 |
·性能评估 | 第46-47页 |
·细胞因子mRNA表达定量 | 第47-48页 |
3.讨论 | 第48-51页 |
第四章禽流感重组鸭病毒性肠炎病毒载体活疫苗在鸭体内诱导获得性免疫情况研究 | 第51-56页 |
1.材料与方法 | 第51-52页 |
·疫苗及动物 | 第51页 |
·主要试剂 | 第51-52页 |
·主要仪器设备 | 第52页 |
·方法 | 第52页 |
2 结果 | 第52-55页 |
·淋巴细胞刺激增殖指数(SI)测定结果 | 第52-53页 |
·CD~(4+)淋巴细胞测定结果 | 第53-54页 |
·间接ELISA检测HA特异性抗体结果 | 第54-55页 |
3.讨论 | 第55-56页 |
第五章全文结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
作者简介 | 第66-67页 |
导师简介 | 第67-68页 |