| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-34页 |
| ·木质纤维素原材料的特征 | 第14-20页 |
| ·半纤维素及木素等成分 | 第15-17页 |
| ·纤维素 | 第17-20页 |
| ·降解纤维素的微生物 | 第20-23页 |
| ·细菌域微生物 | 第20-22页 |
| ·真菌域微生物 | 第22-23页 |
| ·古菌域微生物 | 第23页 |
| ·纤维素高效降解菌株——丝状真菌 | 第23-27页 |
| ·状真菌的高效分泌特性 | 第24-25页 |
| ·状真菌分泌的游离胞外酶系 | 第25-27页 |
| ·碳水化合物活性酶类数据库(CAZy) | 第27-32页 |
| ·CAZy数据库的概述 | 第27-28页 |
| ·糖苷水解酶家族 | 第28页 |
| ·主要糖苷水解酶家族 | 第28-32页 |
| ·立项依据 | 第32-34页 |
| 第二章 内切纤维素酶和底物糖环的结构生物信息学分析 | 第34-48页 |
| ·材料与方法 | 第34-36页 |
| ·生物信息学网站及数据库 | 第34页 |
| ·生物信息学软件 | 第34页 |
| ·数据的获取与处理 | 第34-35页 |
| ·序列与结构比对 | 第35页 |
| ·糖苷水解酶家族活性架构区域氨基酸频率分析 | 第35-36页 |
| ·糖苷水解酶家族活性架构序列谱的制作 | 第36页 |
| ·结构与分析 | 第36-45页 |
| ·底物扭曲的多样性与内切纤维素酶的分型 | 第36-39页 |
| ·主要糖苷水解酶家族信息分析 | 第39-40页 |
| ·糖苷水解酶活性架构区域 | 第40-41页 |
| ·糖苷水解酶家族活性架构部位氨基酸使用频率 | 第41-43页 |
| ·糖苷水解酶家族的活性架构序列谱 | 第43-44页 |
| ·糖苷水解酶家族关键亚位点氨基酸分析 | 第44-45页 |
| ·小结与讨论 | 第45-48页 |
| 第三章 异源表达系统及重组酶性质分析 | 第48-60页 |
| ·材料与方法 | 第48-56页 |
| ·菌株及质粒 | 第48页 |
| ·试剂及培养基 | 第48-49页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第49-50页 |
| ·以大肠杆菌为宿主的原核表达系统 | 第50-53页 |
| ·以毕赤酵母为宿主的真核表达体系 | 第53-55页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第55页 |
| ·酶活性测定 | 第55页 |
| ·酶分子最适反应条件的测定 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-58页 |
| ·基因克隆与重组质粒的构建 | 第56页 |
| ·外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第56-57页 |
| ·外源基因在毕赤酵母GS115中的诱导表达 | 第57-58页 |
| ·两种表达体系的比较 | 第58页 |
| ·小结与讨论 | 第58-60页 |
| 第四章 TrCe15A酶分子活性架构关键亚位点功能研究 | 第60-72页 |
| ·材料与方法 | 第60-64页 |
| ·菌株与质粒 | 第60页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第60-61页 |
| ·定点突变引物 | 第61页 |
| ·定点突变 | 第61-62页 |
| ·突变体蛋白在大肠杆菌Origami(DE3)菌株中的表达和纯化 | 第62页 |
| ·突变体蛋白的酶活性质测定 | 第62页 |
| ·荧光辅助糖电泳(FACE)技术展示蛋白降解产物谱 | 第62-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-70页 |
| ·TrCe15A关键位点-2位点的选择 | 第64页 |
| ·基因egl2关键氨基酸的定点突变 | 第64-65页 |
| ·突变体蛋白的纯化 | 第65-66页 |
| ·突变体蛋白的酶活性质测定 | 第66-69页 |
| ·突变体蛋白的产物谱变化 | 第69-70页 |
| ·小结与讨论 | 第70-72页 |
| 第五章 TrCe17B酶分子活性架构关键亚位点功能研究 | 第72-82页 |
| ·材料与方法 | 第72-74页 |
| ·菌株与质粒 | 第72页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第72页 |
| ·基因克隆与重组质粒的构建 | 第72-73页 |
| ·定点突变引物 | 第73页 |
| ·定点突变 | 第73页 |
| ·重组质粒的转化及异源蛋白的诱导表达 | 第73-74页 |
| ·突变体蛋白的性质测定 | 第74页 |
| ·突变体蛋白降解RAC分析 | 第74页 |
| ·结果与分析 | 第74-81页 |
| ·TrCe17B(EGI)的基因克隆与异源表达 | 第74-75页 |
| ·TrCe17B关键位点-2位点的选择 | 第75-76页 |
| ·基因egl1关键氨基酸的定点突变 | 第76-77页 |
| ·突变体蛋白的纯化 | 第77页 |
| ·突变体蛋白的酶活性质测定 | 第77-80页 |
| ·突变体蛋白的产物谱变化 | 第80-81页 |
| ·小结与讨论 | 第81-82页 |
| 全文总结与展望 | 第82-86页 |
| 参考文献 | 第86-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第98-99页 |
| 附件 | 第99页 |
