| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-20页 |
| 一. 概述 | 第12-16页 |
| 1. 自噬的概念及过程 | 第12-14页 |
| 2. 自噬的分类 | 第14-15页 |
| 3. 自噬的研究方法 | 第15-16页 |
| 二. 自噬在昆虫蜕皮变态中所起的作用及中肠的重建与调控 | 第16-18页 |
| 1 自噬在昆虫发育中的作用 | 第16-17页 |
| 2. 中肠的重建与调控 | 第17-18页 |
| 三. 自噬与凋亡的关系 | 第18-19页 |
| 四. 本论文研究的科学问题及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 ATG12在棉铃虫中肠PCD中的功能研究 | 第20-48页 |
| 一. 引言 | 第20页 |
| 二. 实验材料与方法 | 第20-31页 |
| 1. 实验材料 | 第20-22页 |
| ·实验动物及细胞 | 第20页 |
| ·实验仪器 | 第20-21页 |
| ·实验试剂 | 第21-22页 |
| 2. 实验方法 | 第22-31页 |
| ·虫体总RNA的提取 | 第22页 |
| ·cDNA的合成 | 第22-23页 |
| ·基因克隆与序列分析 | 第23-24页 |
| ·重组表达、蛋白纯化及抗体的制备 | 第24-27页 |
| ·蛋白提取及western blot | 第27页 |
| ·石蜡切片、HE染色及免疫组织化学 | 第27-29页 |
| ·半定量PCR及荧光实时定量PCR(qRT-PCR) | 第29页 |
| ·干扰实验 | 第29-30页 |
| ·免疫共沉淀(Co-IP) | 第30页 |
| ·Caspase3的活性检测 | 第30-31页 |
| ·构建RFP-TAT-LC3穿膜蛋白 | 第31页 |
| 三.实验结果 | 第31-43页 |
| 1. ATG12序列基因克隆及生物学信息分析 | 第31-34页 |
| 2. ATG12的原核重组表达及抗体制备 | 第34-35页 |
| 3. 蜕皮激素20E上调ATG12的表达及与ATG5的结合 | 第35-37页 |
| 4. 20 E诱导ATG12在棉铃虫蜕皮期和变态期高表达 | 第37-39页 |
| 5. ATG12定位在旧中肠 | 第39页 |
| 4. 干扰AT12导致棉铃虫的化蛹异常及时间延迟 | 第39-41页 |
| 6. 干扰ATG12中肠化蛹延迟及自噬、凋亡相关基因表达下降 | 第41-42页 |
| 7. 干扰ATG12抑制自噬小泡的出现及凋亡的发生 | 第42-43页 |
| 四.讨论 | 第43-46页 |
| ·自噬是棉铃虫中肠发生PCD所必须的 | 第43-44页 |
| ·20E上调ATG12的表达及与ATG5的结合 | 第44页 |
| ·在中肠PCD过程中20E促进自噬及凋亡的发生 | 第44-46页 |
| 五.结论 | 第46-48页 |
| 论文创新点总结及意义 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第55页 |
