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sFcγRⅡb蛋白表达及其结合肽筛选

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第1章 前言第11-18页
   ·FcγRIIb研究进展第11-16页
     ·Fc受体(FcR)第11页
     ·FcγRIIb基因与蛋白结构第11-12页
     ·可溶性FcγRIIb第12页
     ·FcγRIIb的生物学功能第12-13页
     ·FcγRIIb与疾病相关第13-15页
     ·FcγRIIb在疾病治疗中的作用第15-16页
   ·噬菌体展示技术研究进展第16-17页
     ·噬菌体展示技术第16-17页
     ·噬菌体筛选多肽药物展望第17页
   ·本研究的研究目的、内容与意义第17-18页
第2章 sFcγIIb蛋白的表达及活性鉴定第18-40页
   ·实验材料第18-21页
     ·细胞系第18页
     ·菌种和质粒第18页
     ·主要试剂第18页
     ·主要仪器设备第18-19页
     ·主要溶液第19-21页
     ·培养基第21页
   ·sFcγIIb原核表达载体的构建第21-25页
     ·总RNA的提取第21页
     ·反转录第21-22页
     ·引物的设计与合成第22页
     ·FcγIIB基因片段的PCR扩增第22-23页
     ·目的基因FcγIIB与T载体的连接第23页
     ·连接产物的转化:第23-24页
     ·sFcγIIB基因片段的扩增第24页
     ·目的基因sFcγIIB与pET17b载体的连接第24-25页
     ·重组质粒pET-17b-sFcγIIB的双酶切鉴定第25页
   ·sFcγIIb蛋白的表达与纯化第25-29页
     ·利用软件在线对重组蛋白sFcγRIIb理化性质进行分析第25页
     ·sFcγIIb蛋白的表达第25-26页
     ·重组蛋白的纯化第26页
     ·重组蛋白的复性第26-27页
     ·Western Blot第27页
     ·ELISA第27-29页
   ·实验结果第29-38页
     ·重组质粒的构建第29-32页
     ·蛋白的诱导表达及纯化第32-38页
   ·讨论第38-40页
第3章 sFcγRIIb蛋白结合肽的筛选第40-50页
   ·实验材料第40-41页
     ·试剂第40页
     ·噬菌体筛选材料第40-41页
   ·实验方法第41-45页
     ·噬菌体滴度的测定第41页
     ·噬菌体肽库淘选第41-42页
     ·第二、三、四轮噬菌体淘选第42-43页
     ·每轮洗脱噬菌体与sFcγRIIb蛋白亲和力的鉴定第43页
     ·噬菌斑的扩增第43页
     ·噬菌体DNA的提取第43-44页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测噬菌体DNA第44页
     ·单链噬菌体DNA序列的测定第44页
     ·氨基酸序列同源性分析第44页
     ·噬菌体与sFcγRIIb亲和力的ELISA鉴定第44-45页
   ·实验结果第45-48页
     ·筛选噬菌体回收率结果第45页
     ·每轮噬菌体筛选后洗脱物与sFcγRIIb蛋白的结合第45-46页
     ·挑取噬菌体单克隆并提取DNA第46-47页
     ·单链噬菌体DNA序列测定结果第47-48页
     ·噬菌体单克隆亲和力鉴定第48页
     ·氨基酸序列同源性分析结果第48页
   ·讨论第48-50页
第4章 结论第50-51页
参考文献第51-56页
致谢第56页

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