| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-15页 |
| ·普鲁兰酶的概述 | 第8-9页 |
| ·普鲁兰酶的研究进展 | 第9-11页 |
| ·普鲁兰酶的结构和催化机理 | 第9-10页 |
| ·普鲁兰酶的表达和改造 | 第10-11页 |
| ·酶蛋白性质改造的研究进展 | 第11-13页 |
| ·影响酶热稳定性的因素及提高热稳定的策略 | 第11-12页 |
| ·影响酶耐酸性的因素及提高耐酸性的策略 | 第12-13页 |
| ·本研究的意义及来源 | 第13-14页 |
| ·本研究的意义 | 第13-14页 |
| ·课题来源 | 第14页 |
| ·本研究的主要内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-22页 |
| ·菌种与质粒 | 第15页 |
| ·试剂与仪器 | 第15-16页 |
| ·培养基与溶液 | 第16-17页 |
| ·突变株构建 | 第17-19页 |
| ·质粒的提取 | 第17页 |
| ·突变质粒构建 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌E. coli JM109感受态的制备及突变质粒转化 | 第18-19页 |
| ·突变酶及野生型酶酶学性质分析 | 第19-22页 |
| ·普鲁兰酶粗酶液制备 | 第19页 |
| ·SDS-PAGE分析表达产物 | 第19页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第19页 |
| ·普鲁兰酶酶活的测定 | 第19-20页 |
| ·普鲁兰酶最适作用温度及热稳定性性的检测 | 第20页 |
| ·普鲁兰酶最适作用pH及耐酸性的检测 | 第20页 |
| ·野生型酶及突变酶的反应动力学参数测定 | 第20-21页 |
| ·高效液相色谱分析的条件的建立 | 第21页 |
| ·葡萄糖标准曲线的建立 | 第21页 |
| ·普鲁兰酶在淀粉糖化中的应用 | 第21-22页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第22-37页 |
| ·普鲁兰酶突变位点的分析 | 第22-26页 |
| ·普鲁兰酶的同源建模 | 第22页 |
| ·定点饱和突变改造普鲁兰酶热稳定性位点的选择 | 第22-23页 |
| ·定点突变改造普鲁兰酶耐酸性位点的选择 | 第23-26页 |
| ·定点饱和突变改造普鲁兰酶的耐热性 | 第26-32页 |
| ·突变质粒的构建 | 第26-27页 |
| ·野生型酶及突变酶的表达 | 第27页 |
| ·定点突变提高普鲁兰酶的耐热性 | 第27-30页 |
| ·突变酶的结构模拟分析 | 第30-32页 |
| ·热稳定性提高的突变酶在糖化中的应用 | 第32页 |
| ·定点突变改造普鲁兰酶的耐酸性 | 第32-37页 |
| ·突变质粒的构建 | 第32-33页 |
| ·野生型酶和突变酶的表达 | 第33页 |
| ·定点突变提高普鲁兰酶的耐酸性 | 第33-35页 |
| ·突变酶的结构模拟分析 | 第35-36页 |
| ·突变酶在淀粉糖化中的应用 | 第36-37页 |
| 主要结论与展望 | 第37-38页 |
| 主要结论 | 第37页 |
| 展望 | 第37-38页 |
| 致谢 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第43页 |