| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-13页 |
| 1 前言 | 第13-31页 |
| ·杆状病毒 | 第13-18页 |
| ·杆状病毒的分类 | 第13-16页 |
| ·杆状病毒生活史 | 第16-17页 |
| ·杆状病毒表达载体系统 | 第17-18页 |
| ·ODV-E25和PP31 | 第18-22页 |
| ·杆状病毒核心基因 | 第18-19页 |
| ·杆状病毒包膜蛋白 | 第19-20页 |
| ·ODV-E25研究现状 | 第20-22页 |
| ·PP31研究现状 | 第22页 |
| ·蛋白质相互作用研究 | 第22-27页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第23-25页 |
| ·蛋白质芯片 | 第25页 |
| ·免疫共沉淀 | 第25页 |
| ·Pull-down技术 | 第25-26页 |
| ·荧光共振能量转移技术 | 第26页 |
| ·双分子荧光互补技术 | 第26-27页 |
| ·cDNA文库构建 | 第27-29页 |
| ·三种常用的cDNA文库种类 | 第27页 |
| ·构建cDNA文库的方法 | 第27-28页 |
| ·利用SMART技术构建cDNA文库 | 第28-29页 |
| ·研究目的及意义 | 第29-31页 |
| 2 实验材料和方法 | 第31-52页 |
| ·实验材料 | 第31-37页 |
| ·病毒株及细胞 | 第31页 |
| ·大肠杆菌及酵母菌菌株 | 第31页 |
| ·培养基及抗生素 | 第31-33页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第33-34页 |
| ·常用溶液配方 | 第34-35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35页 |
| ·载体、引物及测序 | 第35-37页 |
| ·cDNA文库构建 | 第37-43页 |
| ·野生型AcMNPV感染Sf9细胞 | 第37页 |
| ·总RNA提取 | 第37-38页 |
| ·反转录合成第一链cDNA | 第38-39页 |
| ·cDNA第二链合成及LD-PCR扩增 | 第39-40页 |
| ·双链cDNA纯化 | 第40页 |
| ·AH109感受态细胞制备 | 第40-41页 |
| ·cDNA与文库载体共转化AH109菌株 | 第41-42页 |
| ·PCR检测文库多态性 | 第42-43页 |
| ·收获转化子 | 第43页 |
| ·重组质粒构建 | 第43页 |
| ·pp31原核表达质粒 | 第43页 |
| ·rack原核表达质粒 | 第43页 |
| ·酵母双杂交实验 | 第43-49页 |
| ·诱饵蛋白筛选cDNA文库 | 第43-45页 |
| ·划线筛选阳性克隆 | 第45页 |
| ·酵母菌落PCR鉴定 | 第45页 |
| ·X-gal显色 | 第45页 |
| ·酵母质粒提取及PCR鉴定 | 第45-47页 |
| ·DH5α感受态细胞制备 | 第47-48页 |
| ·酵母质粒转化DH5α菌株 | 第48页 |
| ·大肠杆菌质粒提取及RCR鉴定 | 第48-49页 |
| ·测序及序列分析 | 第49页 |
| ·蛋白质原核表达及纯化 | 第49-51页 |
| ·GST-PP31、GST以及RACK-His蛋白的原核表达 | 第49页 |
| ·GST-PP31及GST蛋白的纯化 | 第49-50页 |
| ·RACK-His蛋白的变性纯化及复性 | 第50-51页 |
| ·GST PULL-DOWN | 第51-52页 |
| 3 实验结果 | 第52-69页 |
| ·ACMNPV感染SF9细胞酵母双杂交cDNA文库的构建 | 第52-55页 |
| ·与ACMNPV ODV-E25蛋白相互作用的受感染SF9细胞蛋白因子 | 第55-63页 |
| ·可能与ACMNPV ODV-E25蛋白相互作用的蛋白质的序列分析 | 第63-65页 |
| ·PLXYGV PP31和小菜蛾RACK的原核表达及纯化 | 第65-67页 |
| ·GST PULL-DOWN验证PLXYGV PP31与RACK蛋白的相互作用 | 第67-69页 |
| 4 讨论及展望 | 第69-73页 |
| ·cDNA文库构建的一些问题 | 第69-70页 |
| ·酵母双杂交实验的一些问题 | 第70页 |
| ·可能与ODV-E25蛋白相互作用的蛋白质 | 第70-71页 |
| ·PP31与RACK的相互作用 | 第71-72页 |
| ·展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
