| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 引言 | 第11-16页 |
| 一、研究背景和立题依据 | 第11-13页 |
| 二、亟待解决的问题 | 第13页 |
| 三、本文的研究内容和意义 | 第13-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-47页 |
| 一、真核生物染色质结构与基因转录活性 | 第16-32页 |
| （一） 真核生物的染色质结构 | 第16页 |
| （二） 核小体重塑复合物 | 第16-18页 |
| 1. 依赖于ATP的核小体重塑复合物 | 第17页 |
| 2. 组蛋白酶类修饰复合物 | 第17-18页 |
| （三） 组蛋白乙酰基转移酶的功能及其分类 | 第18-25页 |
| 1. 组蛋白乙酰基转移酶及其复合物的种类 | 第18-20页 |
| 2. 组蛋白乙酰基转移酶及其复合物的功能 | 第20-25页 |
| （四） 组蛋白去乙酰化酶及其抑制剂 | 第25-32页 |
| 1. 组蛋白去乙酰化酶的分类 | 第25-28页 |
| 2. 组蛋白去乙酰化酶的功能 | 第28-30页 |
| 3. 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 | 第30-32页 |
| 二、热休克蛋白的生物学功能及其表达调控 | 第32-38页 |
| （一） 热休克蛋白的生物学功能 | 第32-35页 |
| 1. 热休克蛋白的分子伴侣活性 | 第32-33页 |
| 2. 热休克蛋白与细胞凋亡 | 第33页 |
| 3. 热休克蛋白与免疫调控 | 第33-34页 |
| 4. 热休克蛋白在衰老中的作用 | 第34-35页 |
| （二） 热休克蛋白的表达调控 | 第35-38页 |
| 1. 热休克基因的顺式作用元件 | 第35页 |
| 2. 热休克基因的反式作用因子 | 第35-36页 |
| 3. 热休克基因的表达调控 | 第36-37页 |
| 4. 组蛋白乙酰化修饰与热休克基因表达调控的关系 | 第37-38页 |
| 三、生物衰老与寿命调控 | 第38-47页 |
| （一） 机体代谢速率与寿命 | 第38-39页 |
| （二） 氧化损伤与衰老 | 第39-41页 |
| 1. 活性氧及其来源 | 第39-40页 |
| 2. 活性氧代谢 | 第40页 |
| 3. 不饱和脂肪酸 | 第40-41页 |
| （三） 类固醇激素对寿命的调控 | 第41-42页 |
| 1. 类固醇对寿命的调控 | 第41-42页 |
| 2. 胰岛素/IGF 信号通路在寿命调控中的作用 | 第42页 |
| （四） 果蝇中影响寿命的基因 | 第42-47页 |
| 1. 基因功能降低可延长寿命的基因 | 第43-44页 |
| 2. 过表达延长寿命的基因 | 第44-47页 |
| 第二章 组蛋白乙酰化修饰、热休克蛋白表达和果蝇寿命的关系研究 | 第47-77页 |
| 一、实验材料与方法 | 第47-56页 |
| （一） 实验材料 | 第47页 |
| 1. 果蝇 | 第47页 |
| 2. 主要试剂 | 第47页 |
| （二） 实验方法 | 第47-56页 |
| 1. 果蝇的培养 | 第47-48页 |
| 2. 果蝇寿命统计 | 第48页 |
| 3. 筛选长寿和短寿的果蝇品系 | 第48页 |
| 4. 果蝇的去乙酰化酶抑制剂处理和热激诱导 | 第48-49页 |
| 5. 果蝇总RNA 的提取 | 第49-51页 |
| 6. 逆转录PCR | 第51-52页 |
| 7. 定量Real Time PCR | 第52-53页 |
| 8. 果蝇全蛋白及核蛋白的提取 | 第53-54页 |
| 9. SDS-PAGE 电泳和Western Blotting 分析 | 第54-56页 |
| 二、结果与分析 | 第56-72页 |
| （一） 实验条件的确定 | 第56-58页 |
| 1. RT-PCR 反应中模板浓度的确定 | 第56页 |
| 2. RT-PCR 反应循环数的确定 | 第56-57页 |
| 3. 果蝇温和热激诱导温度的确定 | 第57-58页 |
| （二） 果蝇长寿品系和短寿品系的筛选 | 第58-59页 |
| （三） 热休克蛋白的表达与果蝇寿命的关系 | 第59-65页 |
| 1. 不同寿命的果蝇衰老过程中hsp 基因基础表达的差异 | 第59-61页 |
| 2. 不同寿命的果蝇hsp 基因热诱导反应灵敏度和诱导强度的差异 | 第61-64页 |
| 3. 不同寿命的果蝇耐热能力的差异 | 第64-65页 |
| （四） 组蛋白乙酰化修饰以及热激诱导与果蝇寿命的关系 | 第65-68页 |
| 1. HDI处理和热激诱导对果蝇体内组蛋白乙酰化水平的影响 | 第65页 |
| 2. HDI处理和热激诱导对果蝇寿命长短的影响 | 第65-68页 |
| （五） 果蝇衰老过程中组蛋白乙酰化修饰与HSP 表达调控的关系 | 第68-72页 |
| 1. HDI处理对果蝇衰老过程中hsp m RNA表达水平的影响 | 第69-71页 |
| 2. HDI处理对果蝇衰老过程中 Hsp 蛋白表达水平的影响 | 第71-72页 |
| 三、讨论 | 第72-76页 |
| （一） 热休克基因的表达与果蝇寿命 | 第72-73页 |
| （二） 组蛋白乙酰化修饰与果蝇热休克基因表达调控的关系 | 第73页 |
| （三） 组蛋白乙酰化与去乙酰化修饰与果蝇寿命 | 第73-75页 |
| （四） 去乙酰化酶抑制剂延长果蝇寿命的分子模型 | 第75-76页 |
| 四、小结 | 第76-77页 |
| 第三章 组蛋白乙酰化修饰影响果蝇hsp 基因表达调控的分子机制研究 | 第77-118页 |
| 一、实验材料与方法 | 第77-82页 |
| （一） 实验材料 | 第77页 |
| 1. 果蝇三龄幼虫 | 第77页 |
| 2. 主要试剂 | 第77页 |
| （二） 实验方法 | 第77-82页 |
| 1. 果蝇的培养 | 第77-78页 |
| 2. 果蝇的去乙酰化酶抑制剂处理和热激诱导 | 第78页 |
| 3. 染色质免疫沉淀 | 第78-82页 |
| 二、实验结果与分析 | 第82-110页 |
| （一） 果蝇幼虫中CHIP 实验体系的建立 | 第82-85页 |
| 1. ChIP 实验中果蝇幼虫用量的确定 | 第82-83页 |
| 2. ChIP 实验DNA 剪切条件的确定 | 第83-84页 |
| 3. 甲醛交联的浓度和时间的确定 | 第84-85页 |
| 4. 实验体系的确立 | 第85页 |
| （二） 组蛋白乙酰化修饰调控hsp22 基因表达的分子机制 | 第85-93页 |
| 1. HDI 处理提高了果蝇幼虫hsp22 的mRNA 表达水平 | 第86-87页 |
| 2. HDI 处理诱导果蝇幼虫组蛋白H3 的超乙酰化 | 第87-88页 |
| 3. HDI 处理诱导了hsp22 基因位点处组蛋白H3 的超乙酰化 | 第88-89页 |
| 4. 组蛋白H3的超乙酰化有利转录因子与特异序列的结合 | 第89-91页 |
| 5. 组蛋白H3 的超乙酰化增强了RNA polⅡ的转录起始与延伸 | 第91-93页 |
| （三） 组蛋白乙酰化修饰调控hsp70 基因表达的分子机制研究 | 第93-101页 |
| 1. HDI处理对hsp70 基因位置处组蛋白H3 乙酰化水平的影响 | 第93-95页 |
| 2. 热激过程中hsp70 基因启动子处组蛋白H3 乙酰化水平的变化 | 第95-96页 |
| 3. 乙酰化水平的变化对转录因子结合的影响 | 第96-99页 |
| 4. 组蛋白乙酰化水平的变化对hsp70 转录的影响 | 第99-101页 |
| （四） 组蛋白乙酰化修饰调控hsp26 基因表达的分子机制研究 | 第101-110页 |
| 1. HDI 处理对hsp26 基因mRNA 表达水平的影响 | 第102-104页 |
| 2. HDI处理对hsp26基因启动子不同调控元件处组蛋白H3乙酰化水平的影响 | 第104-105页 |
| 3. 组蛋白H3 的超乙酰化对转录因子结合的影响 | 第105-107页 |
| 4. 热激过程中hsp26启动子处组蛋白H3乙酰化水平的变化 | 第107-108页 |
| 5. 组蛋白乙酰化修饰与RNA polⅡ转录的关系 | 第108-110页 |
| 三、讨论 | 第110-116页 |
| （一） 组蛋白乙酰化修饰参与果蝇热休克基因的表达调控 | 第110-111页 |
| （二） 乙酰化修饰与转录因子、转录因子与转录因子之间的关系 | 第111-112页 |
| （三） 乙酰化修饰与RNA polⅡ转录的关系 | 第112-113页 |
| （四） 参与hsp基因表达的组蛋白乙酰化酶和去乙酰化酶 | 第113-114页 |
| （五） 热激过程中hsp基因启动子处染色质的重塑 | 第114-115页 |
| （六） 热休克基因表达调控的分子模型 | 第115-116页 |
| 四、小结 | 第116-118页 |
| 本论文的结论与创新点 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-142页 |
| 英文缩写词 | 第142-143页 |
| 致谢 | 第143-144页 |
| 作者简介 | 第144页 |
