目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-31页 |
第一章 IHHNV的研究进展 | 第11-23页 |
1 引言 | 第11页 |
2 病毒特性 | 第11页 |
3 IHHNV感染宿主及其致病性 | 第11-12页 |
4 IHHNV地理分布和传播途径 | 第12-13页 |
5 IHHNV的诊断方法 | 第13-16页 |
·现场诊断 | 第13页 |
·传统实验室诊断方法 | 第13-14页 |
·病理学组织法 | 第13页 |
·动物实验指示法 | 第13-14页 |
·分子生物学方法 | 第14-16页 |
6 IHHNV基因组的研究概况 | 第16页 |
7 小结 | 第16-18页 |
参考文献 | 第18-23页 |
第二章 WSSV的研究进展 | 第23-31页 |
1 引言 | 第23页 |
2 病原学 | 第23页 |
3 WSSV的流行病学 | 第23-24页 |
·主要宿主范围和传播途径 | 第23-24页 |
·WSSV致病性与潜伏感染 | 第24页 |
4 WSS的临床表现和病理变化 | 第24-25页 |
·临床表现 | 第24页 |
·病理变化 | 第24-25页 |
5 检测预防技术 | 第25-26页 |
·检测技术 | 第25页 |
·预防技术 | 第25-26页 |
6 WSSV基因研究概况 | 第26-28页 |
·WSSV基因结构的研究 | 第26-27页 |
·主要结构蛋白的开放阅读框 | 第27页 |
·基因重复区 | 第27-28页 |
参考文献 | 第28-31页 |
第二篇 试验研究 | 第31-73页 |
第三章 IHHN流行病学调查 | 第31-49页 |
摘要 | 第31页 |
1 材料 | 第31-33页 |
·试验样本 | 第31页 |
·主要酶和试剂 | 第31-32页 |
·主要仪器设备 | 第32页 |
·PCR引物 | 第32页 |
·参考毒株 | 第32-33页 |
2 方法 | 第33-37页 |
·主要溶液的配制 | 第33页 |
·虾样的处理 | 第33页 |
·病毒DNA的提取 | 第33-34页 |
·感受态的制备 | 第34页 |
·IHHNV病毒粒子的检测 | 第34-36页 |
·PCR | 第34-35页 |
·PCR结果判定 | 第35页 |
·PCR产物回收与纯化 | 第35页 |
·PCR产物T/A连接 | 第35页 |
·连接产物的转化 | 第35-36页 |
·阳性克隆的PCR鉴定 | 第36页 |
·测序分析 | 第36页 |
·IHHNV全基因组的测定 | 第36-37页 |
·PCR | 第36页 |
·PCR结果判定 | 第36页 |
·PCR产物回收与纯化 | 第36页 |
·PCR产物T/A连接 | 第36-37页 |
·连接产物的转化 | 第37页 |
·阳性克隆旳PCR鉴定 | 第37页 |
·测序分析 | 第37页 |
·序列拼接比对和系统发生树构建 | 第37页 |
3 结果 | 第37-45页 |
·IHHNV检测结果 | 第37-38页 |
·IHHNV全基因扩增结果 | 第38-39页 |
·IHHNV流行病学调查结果 | 第39-40页 |
·IHHNV系统发生树的构建结果 | 第40-45页 |
4 讨论 | 第45-46页 |
ABSTRACT | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-49页 |
第四章 WSS流行病学调查 | 第49-63页 |
摘要 | 第49页 |
1 材料 | 第49-51页 |
·试验样本 | 第50页 |
·主要酶和试剂 | 第50页 |
·主要仪器设备 | 第50页 |
·PCR引物 | 第50页 |
·参考毒株 | 第50-51页 |
2 方法 | 第51-55页 |
·主要溶液的配制 | 第51页 |
·虾样的处理 | 第51页 |
·病毒DNA的提取 | 第51-52页 |
·感受态的制备 | 第52页 |
·WSSV病毒粒子的检测 | 第52-54页 |
·WSSV变异区的扩增 | 第54-55页 |
3 结果 | 第55-59页 |
·WSSV检测结果 | 第55-57页 |
·WSSV系统发生树构建结果 | 第57-59页 |
4 讨论 | 第59-60页 |
ABSTRACT | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-63页 |
第五章 IHHNV检测方法的建立 | 第63-73页 |
摘要 | 第63页 |
1 材料 | 第63-64页 |
·病毒株 | 第63页 |
·主要酶和试剂 | 第63-64页 |
·主要仪器设备 | 第64页 |
2 方法 | 第64-66页 |
·引物设计 | 第64页 |
·DNA提取 | 第64页 |
·PCR扩增目的基因 | 第64-65页 |
·PCR产物T/A连接 | 第65页 |
·连接产物的转化 | 第65页 |
·测序分析和质粒制备 | 第65页 |
·IHHNV SYBR Gree实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第65-66页 |
3 结果 | 第66-70页 |
·目的片段PCR扩增结果 | 第66-67页 |
·实时荧光定量PCR反应优化条件 | 第67页 |
·标准曲线建立结果 | 第67页 |
·溶解曲线分析 | 第67-68页 |
·荧光定量PCR扩增曲线分析 | 第68-69页 |
·特异性检测 | 第69页 |
·重复性实验 | 第69-70页 |
4 讨论 | 第70-71页 |
ABSTRACT | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-73页 |
全文总结 | 第73-75页 |
致谢 | 第75页 |