| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-35页 |
| ·生物催化剂的固定化技术 | 第15-21页 |
| ·生物催化剂的发展 | 第15-17页 |
| ·固定化技术 | 第17-20页 |
| ·固定化载体的类型 | 第20-21页 |
| ·生物催化剂的理性固定化技术 | 第21页 |
| ·仿生粘附材料 | 第21-33页 |
| ·仿生粘附材料的发现和研究 | 第21-25页 |
| ·多巴胺化学 | 第25-27页 |
| ·粘附机理的研究 | 第27-29页 |
| ·仿生粘附材料的应用 | 第29-33页 |
| ·本课题的研究目的及意义 | 第33页 |
| ·本课题的主要研究内容 | 第33-35页 |
| 第2章 磁性壳聚糖纳米材料对ω-转氨酶J2315的固定化 | 第35-54页 |
| ·引言 | 第35-37页 |
| ·实验材料 | 第37-39页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| ·菌株和质粒 | 第38页 |
| ·培养基和缓冲液 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-42页 |
| ·ω-转氨酶J2315的重组表达和纯化 | 第39-40页 |
| ·ω-转氨酶J2315的催化性质的鉴定 | 第40-41页 |
| ·CCS-IONPs的合成与表征 | 第41-42页 |
| ·ω-转氨酶J2315的固定化及固定化酶的活性评价 | 第42页 |
| ·结果与讨论 | 第42-52页 |
| ·ω-转氨酶J2315的基因序列分析 | 第42-43页 |
| ·ω-转氨酶J2315在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第43页 |
| ·ω-转氨酶J2315催化性质的研究 | 第43-46页 |
| ·CCS-IONPs对ω-转氨酶J2315的固定化研究 | 第46-52页 |
| ·本章小结 | 第52-54页 |
| 第3章 产腈水解酶BCJ2315重组大肠杆菌的固定化及其应用 | 第54-69页 |
| ·引言 | 第54-55页 |
| ·实验材料 | 第55-57页 |
| ·主要试剂 | 第55-56页 |
| ·主要仪器 | 第56页 |
| ·菌株 | 第56页 |
| ·培养基和缓冲液 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-59页 |
| ·重组大肠杆菌M15/BCJ2315的发酵 | 第57页 |
| ·重组大肠杆菌M15/BCJ2315的固定化 | 第57页 |
| ·固定化细胞的表征 | 第57页 |
| ·腈水解酶酶活检测 | 第57-58页 |
| ·产物的检测方法 | 第58页 |
| ·固定化细胞的稳定性和重复使用性评价 | 第58-59页 |
| ·有机溶剂/水两相催化体系 | 第59页 |
| ·乙酸乙酯/水两相反应体系连续生产(R)-(-)-扁桃酸 | 第59页 |
| ·结果与讨论 | 第59-67页 |
| ·邻苯二酚壳聚糖添加量对固定化的影响 | 第59-60页 |
| ·固定化细胞的表征 | 第60-61页 |
| ·固定化细胞的稳定性 | 第61-62页 |
| ·固定化细胞的重复使用性 | 第62-63页 |
| ·两相催化体系的建立和优化 | 第63-66页 |
| ·乙酸乙酯/水两相体系连续生产(R)-(-)-扁桃酸 | 第66-67页 |
| ·本章小结 | 第67-69页 |
| 第4章 PD-IONPs固定化氧化葡萄糖酸杆菌的研究 | 第69-84页 |
| ·引言 | 第69-70页 |
| ·实验材料 | 第70-71页 |
| ·主要试剂 | 第70页 |
| ·主要仪器 | 第70-71页 |
| ·菌株 | 第71页 |
| ·培养基和缓冲液 | 第71页 |
| ·实验方法 | 第71-74页 |
| ·PD-IONPs的合成与表征 | 第71页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌的培养 | 第71-72页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌的固定化 | 第72页 |
| ·固定化细胞的表征 | 第72页 |
| ·固定化细胞的活性评价 | 第72页 |
| ·溶液的离子强度、pH值及温度对固定化的影响 | 第72页 |
| ·固定化细胞的稳定性和重复使用性 | 第72-73页 |
| ·PD-IONPs与氧化葡萄糖酸杆菌结合位点的研究 | 第73-74页 |
| ·结果与讨论 | 第74-82页 |
| ·PD-IONPs的合成与表征 | 第74-75页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌的固定化 | 第75-76页 |
| ·固定化细胞的表征 | 第76-77页 |
| ·多巴胺浓度和反应时间对载体固定化能力影响 | 第77-79页 |
| ·溶液离子强度、pH以及温度对固定化的影响 | 第79-80页 |
| ·固定化细胞稳定性的评价 | 第80-81页 |
| ·固定化细胞的重复使用性 | 第81页 |
| ·PD-IONPs与氧化葡萄糖酸杆菌结合位点的研究 | 第81-82页 |
| ·本章小结 | 第82-84页 |
| 第5章 邻苯二酚粘附机理的研究 | 第84-98页 |
| ·引言 | 第84页 |
| ·实验材料 | 第84-86页 |
| ·主要试剂 | 第84-85页 |
| ·主要仪器 | 第85页 |
| ·菌株 | 第85页 |
| ·培养基和缓冲液 | 第85-86页 |
| ·实验方法 | 第86-88页 |
| ·邻苯二酚衍生物的合成 | 第86页 |
| ·脂肪酶的定点突变及其表达纯化 | 第86-87页 |
| ·Boc-DA与Fe~3+的结合 | 第87页 |
| ·邻苯二酚基团与对氨基酸残基的选择性 | 第87页 |
| ·pH对邻苯二酚基团反应选择性的影响 | 第87页 |
| ·mPEG-DA结合脂肪酶 | 第87-88页 |
| ·pH对mPEG-DA反应选择性的影响 | 第88页 |
| ·结果与讨论 | 第88-96页 |
| ·邻苯二酚基团与Fe~3+结合机理的研究 | 第88-89页 |
| ·邻苯二酚基团与对氨基酸基团反应的选择性 | 第89-92页 |
| ·pH对邻苯二酚基团反应速率的影响 | 第92-94页 |
| ·mPEG-DA对脂肪酶结合位点的研究 | 第94-95页 |
| ·pH对mPEG-DA反应选择性的影响 | 第95-96页 |
| ·本章小结 | 第96-98页 |
| 第6章 磁性亲和纳米材料的制备及其应用 | 第98-119页 |
| ·引言 | 第98-99页 |
| ·实验材料 | 第99-100页 |
| ·主要试剂 | 第99页 |
| ·主要仪器 | 第99-100页 |
| ·菌株和质粒 | 第100页 |
| ·培养基和缓冲液 | 第100页 |
| ·实验方法 | 第100-104页 |
| ·融合蛋白的构建与表达 | 第100-102页 |
| ·GSH-PD-IONPs的合成与表征 | 第102页 |
| ·GSH-PD-IONPs分离纯化GST-GFP | 第102-103页 |
| ·Ni~2+-PD-MNPs的合成与表征 | 第103页 |
| ·Ni~2+-PD-MNPs分离纯化His-RFP | 第103-104页 |
| ·ω-转氨酶BJ110的选择性固定化及其活性评价 | 第104页 |
| ·固定化酶的稳定性和重复使用性 | 第104页 |
| ·结果与讨论 | 第104-117页 |
| ·GSH-PD-IONPs分离纯化GST标签融合蛋白 | 第104-109页 |
| ·Ni~2+-PD-MNPs的合成及其在His标签融合蛋白纯化中的应用 | 第109-114页 |
| ·Ni~2+-PD-MNPs选择性固定化ω-转氨酶BJ110 | 第114-116页 |
| ·固定化酶的稳定性和重复使用性 | 第116-117页 |
| ·本章小结 | 第117-119页 |
| 第7章 结论与展望 | 第119-123页 |
| ·结论 | 第119-121页 |
| ·磁性壳聚糖纳米材料对ω-转氨酶J2315的固定化 | 第119页 |
| ·产腈水解酶BCJ2315重组大肠杆菌的固定化及其应用 | 第119-120页 |
| ·PD-IONPs固定化氧化葡萄糖酸杆菌的研究 | 第120页 |
| ·邻苯二酚粘附机理的研究 | 第120页 |
| ·磁性亲和纳米材料的制备及其应用 | 第120-121页 |
| ·展望 | 第121-123页 |
| 参考文献 | 第123-139页 |
| 攻读博士学位期间取得的成果 | 第139-141页 |
| 致谢 | 第141页 |
