| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩略词表 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-38页 |
| 第一节 禾谷类糊粉层细胞α-淀粉酶的研究进展 | 第16-19页 |
| 1 糊粉层细胞对ABA和GA的响应 | 第16页 |
| 2 糊粉层细胞α-淀粉酶的信号转导 | 第16-19页 |
| ·Ca~(2+)/CAM依赖和不依赖的信号转导 | 第16-17页 |
| ·cGMP参与诱导的α-淀粉酶 | 第17页 |
| ·异源三聚体G蛋白参与诱导的α-淀粉酶 | 第17-18页 |
| ·蛋白激酶级联反应 | 第18页 |
| ·基因转录水平的调控 | 第18-19页 |
| 第二节 禾谷类糊粉层细胞PCD的研究进展 | 第19-22页 |
| 1 糊粉层细胞PCD发生过程的形态变化 | 第19-20页 |
| 2 糊粉层细胞中ROS的来源 | 第20-21页 |
| 3 ROS对糊粉层细胞PCD的影响 | 第21-22页 |
| 第三节 血红素加氧酶/一氧化碳信号系统的研究进展 | 第22-28页 |
| 1 动物中HO的功能及其信号转导 | 第22-23页 |
| 2 植物中HO的研究进展 | 第23-24页 |
| 3 植物中HO/CO信号系统的功能及其信号转导 | 第24-28页 |
| ·HO/CO对植物生长发育的调控 | 第24-26页 |
| ·HO调节植物对逆境的响应 | 第26-27页 |
| ·植物HO的信号转导 | 第27-28页 |
| 第四节 一氧化氮的研究进展 | 第28-32页 |
| 1 植物中NO合成的途径 | 第28-29页 |
| 2 NO的生理功能 | 第29-30页 |
| 3 NO在植物中的信号转导 | 第30-32页 |
| 第五节 氢气的研究进展 | 第32-35页 |
| 1 H_2在动物中的研究进展 | 第32-33页 |
| 2 H_2在植物中的研究进展 | 第33-35页 |
| 第六节 本研究的目的和意义 | 第35-36页 |
| 第七节 研究思路 | 第36-38页 |
| 第二章 血红素加氧酶-1介导NO/cGMP在GA诱导的小麦糊粉层中对α-Amy2/54基因的诱导表达 | 第38-58页 |
| 摘要 | 第38-39页 |
| 引言 | 第39-41页 |
| 第一节 材料与方法 | 第41-44页 |
| 1 试剂 | 第41页 |
| 2 CO溶液的制备 | 第41页 |
| 3 小麦糊粉层的制备 | 第41-42页 |
| 4 血红素加氧酶的活性测定 | 第42页 |
| 5 α-淀粉酶的活性测定 | 第42页 |
| 6 琼脂平板测定淀粉酶活性 | 第42页 |
| 7 小麦HO-1的Western blot | 第42-43页 |
| 8 Greiss试剂法测定NO的含量 | 第43页 |
| 9 定量RT-PCR检测 | 第43页 |
| 10 统计分析 | 第43-44页 |
| 第二节 结果与分析 | 第44-56页 |
| 1 SNP和NONOate以GA依赖的方式上调α-淀粉酶活性 | 第44-45页 |
| 2 SNP诱导的α-Amy2/54的上调表达,α-淀粉酶活性以及NO的含量上升被cPTIO抑制 | 第45-47页 |
| 3 8-Br-cGMP具有和SNP相类似的作用 | 第47-48页 |
| 4 SNP和8-Br-cGMP的诱导效应被ZnPPIX抑制,CO逆转ZnPPIX的抑制效应 | 第48-49页 |
| 5 HO-1/CO具有和SNP以及8-Br-cGMP相类似的作用 | 第49-50页 |
| 6 cPTIO和LY83583抑制SNP诱导的HO-1的基因表达以及HO的活性 | 第50-51页 |
| 7 cGMP诱导HO-1的表达 | 第51-52页 |
| 8 GAMYB和PKABA1表达 | 第52-56页 |
| 第三节 讨论 | 第56-58页 |
| 第三章 血红素加氧酶-1通过调控H_2O_2代谢延缓GA诱导的小麦糊粉层细胞PCD | 第58-80页 |
| 摘要 | 第58-59页 |
| 引言 | 第59-61页 |
| 第一节 材料与方法 | 第61-64页 |
| 1 试剂 | 第61页 |
| 2 材料培养 | 第61页 |
| 3 耗氧量测定 | 第61页 |
| 4 细胞存活率 | 第61-62页 |
| 5 CO饱和水溶液的制备 | 第62页 |
| 6 HO和抗氧化酶活性测定 | 第62页 |
| 7 α-淀粉酶的活性测定 | 第62页 |
| 8 H_2O_2含量测定 | 第62-63页 |
| 9 HO-1的Western印迹 | 第63页 |
| 10 总RNA的提取和半定量RT-PCR | 第63页 |
| 11 统计分析 | 第63-64页 |
| 第二节 结果与分析 | 第64-76页 |
| 1 ABA抑制,GA促进小麦糊粉层细胞的PCD | 第64-65页 |
| 2 HO-1诱导剂Hematin和CO延缓GA诱导的PCD | 第65-68页 |
| 3 下调HO活性加速小麦糊粉层细胞PCD的发生 | 第68-70页 |
| 4 三种抗氧化剂能模拟Ht和CO的作用上调HO的活性和基因表达 | 第70页 |
| 5 内源H_2O_2的含量调控小麦糊粉层细胞的PCD | 第70-72页 |
| 6 胆红素(BR)、二价铁离子(Fe~(2+))对两种抗氧化酶、细胞存活率以及内源H_2O_2含量的影响 | 第72-75页 |
| 7 α-淀粉酶活性的变化 | 第75-76页 |
| 第三节 讨论 | 第76-80页 |
| 第四章 钴通过调控HO-1延缓GA诱导的小麦糊粉层细胞的PCD | 第80-98页 |
| 摘要 | 第80-81页 |
| 引言 | 第81-82页 |
| 第一节 材料与方法 | 第82-85页 |
| 1 试剂 | 第82页 |
| 2 糊粉层制备 | 第82页 |
| 3 细胞死亡率统计 | 第82页 |
| 4 耗氧量测定 | 第82页 |
| 5 HO活性测定和HO-1的western blot | 第82-83页 |
| 6 α-淀粉酶活性测定 | 第83页 |
| 7 CAT、APX和SOD酶活性测定 | 第83页 |
| 8 H_2O_2含量和O_2~(·-)产生速率测定 | 第83页 |
| 9 组织化学染色分析H_2O_2和O_2~(·-) | 第83-84页 |
| 10 定量RT-PCR检测 | 第84页 |
| 11 统计分析 | 第84-85页 |
| 第二节 结果与分析 | 第85-96页 |
| 1 CoCl_2和CoPPIX预处理延缓GA诱导的小麦糊粉层细胞的PCD | 第85页 |
| 2 CoCl_2和CoPPIX预处理对耗氧量和α-淀粉酶的活性的影响 | 第85-87页 |
| 3 COCl_2和CoPPIX预处理上调HO-1的基因表达 | 第87-88页 |
| 4 下调HO表达加速小麦糊粉层细胞的PCD | 第88-90页 |
| 5 HO的下调导致O_2~(·-)产生和累积增加 | 第90-91页 |
| 6 HO上调降低内源H_2O_2的水平 | 第91-94页 |
| 7 DPI和DMTU延缓GA诱导的糊粉层细胞PCD | 第94-96页 |
| 第三节 讨论 | 第96-98页 |
| 第五章 氢气延缓活性氧/活性氮诱导的小麦糊粉层细胞的PCD | 第98-116页 |
| 摘要 | 第98-99页 |
| 引言 | 第99-100页 |
| 第一节 材料与方法 | 第100-103页 |
| 1 试剂 | 第100页 |
| 2 糊粉层和原生质体的制备 | 第100页 |
| 3 细胞死亡率统计 | 第100页 |
| 4 耗氧量 | 第100页 |
| 5 HO活性测定和HO-1western blot | 第100页 |
| 6 TBARS含量测定 | 第100-101页 |
| 7 利用LSCM分析ROS的含量 | 第101页 |
| 8 CAT、APX和SOD酶活性测定 | 第101页 |
| 9 H_2O_2含量和O_2~(·-)产生速率测定 | 第101页 |
| 10 组织化学染色分析H_2O_2和O_2~(·-) | 第101页 |
| 11 电子顺磁共振测定·OH含量 | 第101-102页 |
| 12 氢气饱和溶液制备 | 第102页 |
| 13 氢气含量测定 | 第102页 |
| 14 α-淀粉酶的活性测定 | 第102页 |
| 15 定量RT-PCR检测 | 第102页 |
| 16 统计分析 | 第102-103页 |
| 第二节 结果与分析 | 第103-114页 |
| 1 GA处理降低糊粉层中内源H_2的含量 | 第103-104页 |
| 2 H_2延缓GA诱导的小麦糊粉层细胞的PCD | 第104-106页 |
| 3 H_2通过调控O_2~(·-),H_20_2的变化降低ROS造成的氧化伤害 | 第106-107页 |
| 4 H_2降低糊粉层细胞原生质体内的ROS含量 | 第107-110页 |
| 5 H_2提高ABA、GA处理抗氧化酶基因表达和活性 | 第110-111页 |
| 6 H_2减少羟自由基诱导的PCD | 第111-112页 |
| 7 H_2抑制ONOO~-诱导的PCD | 第112-114页 |
| 第三节 讨论 | 第114-116页 |
| 全文结论 | 第116-118页 |
| 创新之处与展望 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-140页 |
| 附表Ⅰ | 第140-141页 |
| 附表Ⅱ | 第141-142页 |
| 攻读学位期间发表或待发表的研究论文 | 第142-144页 |
| 致谢 | 第144页 |
