摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略语表 | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-21页 |
·肌肉发育 | 第12-13页 |
·肌卫星细胞 | 第13-14页 |
·肌卫星细胞起源与功能 | 第13页 |
·C2C12细胞与肌肉发育的关系 | 第13-14页 |
·成肌分化的分子调控机制 | 第14-18页 |
·成肌分化相关转录因子 | 第14-15页 |
·成肌分化相关激酶 | 第15-16页 |
·成肌细胞增殖阶段的周期调控 | 第16-17页 |
·成肌分化阶段的调控机制 | 第17-18页 |
·肌管融合 | 第18页 |
·Fad24基因发现及特性 | 第18-20页 |
·Fad24基因的发现 | 第18页 |
·Fad24基因的序列及蛋白质结构 | 第18-19页 |
·Fad24基因功能研究 | 第19-20页 |
·Fad24在肌肉中组织表达谱分析 | 第20页 |
·研究目的和意义 | 第20-21页 |
2 实验材料与方法 | 第21-33页 |
·材料 | 第21-24页 |
·细胞系 | 第21页 |
·主要载体 | 第21页 |
·干扰RNA | 第21页 |
·主要仪器及耗材 | 第21-22页 |
·主要试剂 | 第22-23页 |
·分子克隆相关试剂 | 第22页 |
·细胞相关试剂 | 第22页 |
·流式细胞试剂 | 第22页 |
·蛋白质相关试剂 | 第22-23页 |
·定量相关试剂 | 第23页 |
·主要溶液配制 | 第23-24页 |
·细菌培养基 | 第23页 |
·质粒抽提相关溶液配制(碱裂解法) | 第23页 |
·流式细胞技术 | 第23页 |
·SDS-PAGE相关溶液的配制 | 第23-24页 |
·细胞消化液 | 第24页 |
·分子生物学相关软件 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-33页 |
·载体的构建 | 第24-26页 |
·质粒提取 | 第26页 |
·小量提取质粒 | 第26页 |
·大量提取质粒 | 第26页 |
·siRNA oligo制取 | 第26页 |
·细胞培养 | 第26-27页 |
·细胞饥饿处理 | 第27页 |
·细胞转染 | 第27页 |
·细胞计数 | 第27页 |
·流式细胞技术 | 第27-28页 |
·细胞总RNA的提取 | 第28页 |
·RNA的纯化、纯度鉴定cDNA第一链的合成 | 第28-29页 |
·实时定量PCR | 第29-31页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第31页 |
·Western Blot | 第31-32页 |
·数据统计分析 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-43页 |
·Fad24在C2C12细胞分化前后的表达模式 | 第33页 |
·小鼠fad24基因对C2C12细胞增殖的调控机制探索 | 第33-39页 |
·Fad24小干扰RNA的干扰效果检测 | 第33-34页 |
·Fad24基因对C2C12细胞增殖的影响 | 第34-35页 |
·Fad24基因对细胞周期蛋白的影响 | 第35-36页 |
·Fad24基因对细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶及抑制因子的影响 | 第36-37页 |
·Fad24对细胞周期进程的影响 | 第37-39页 |
·Fad24基因对C2C12细胞成肌分化的调控机制研究 | 第39-43页 |
·C2C12细胞中myoD的表达谱 | 第39页 |
·小鼠fad24基因干扰载体的构建 | 第39-40页 |
·Fad24基因对成肌分化基因myoD和myf5的调控作用 | 第40-41页 |
·Fad24基因对C2C12细胞肌管形成的影响 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
·Fad24对成肌细胞增殖的影响 | 第43-44页 |
·Fad24对成肌细胞分化的影响 | 第44-45页 |
5 结论与创新点 | 第45-46页 |
·结论 | 第45页 |
·创新点 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
致谢 | 第51页 |