| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 1 绪论 | 第12-35页 |
| ·叶绿体基因组概况 | 第12-16页 |
| ·叶绿体基因组的发现与起源进化 | 第12-13页 |
| ·叶绿体基因组的特征 | 第13-15页 |
| ·叶绿体基因的表达与调控 | 第15-16页 |
| ·叶绿体遗传转化的研究概况 | 第16-33页 |
| ·叶绿体遗传转化的优势 | 第16-17页 |
| ·叶绿体遗传转化的历史与现状 | 第17-22页 |
| ·叶绿体遗传转化的原理 | 第22-24页 |
| ·叶绿体遗传转化载体 | 第24-29页 |
| ·叶绿体转化载体导入叶绿体的方法 | 第29-30页 |
| ·外源蛋白在叶绿体中的稳定性 | 第30-31页 |
| ·叶绿体遗传转化的应用 | 第31-33页 |
| ·本课题研究的意义与技术路线 | 第33-35页 |
| ·课题研究的目的意义 | 第33-34页 |
| ·本研究的技术路线 | 第34-35页 |
| 2 水稻遗传转化中筛选标记的研究 | 第35-43页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-37页 |
| ·水稻种子诱导愈伤组织 | 第36页 |
| ·筛选培养基的配制 | 第36页 |
| ·测试六种抗生素及除草剂对水稻愈伤组织生长的影响 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-41页 |
| ·氯霉素对水稻愈伤生长的影响 | 第37页 |
| ·潮霉素对愈伤生长的影响 | 第37-38页 |
| ·草丁膦对愈伤生长的影响 | 第38-39页 |
| ·壮观霉素对愈伤生长的影响 | 第39页 |
| ·卡那霉素对愈伤生长的影响 | 第39-40页 |
| ·链霉素对愈伤生长的影响 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·水稻愈伤组织对壮观霉素和链霉素的敏感性 | 第41页 |
| ·水稻愈伤组织对氯霉素、潮霉素B、草丁膦和卡那霉素的敏感性 | 第41-43页 |
| 3 转录调控序列在原核表达系统中的分析 | 第43-71页 |
| ·实验材料 | 第43-45页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·试剂和菌株 | 第43-45页 |
| ·实验方法 | 第45-54页 |
| ·水稻叶绿体DNA的提取 | 第45-46页 |
| ·水稻叶绿体荧光载体的构建 | 第46-53页 |
| ·GFP荧光检测和荧光值的测量 | 第53页 |
| ·基因枪轰击盐藻和洋葱表皮 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-70页 |
| ·水稻叶绿体DNA的提取 | 第54-55页 |
| ·水稻叶绿体同源片段的克隆及分析 | 第55-57页 |
| ·启动子和终止子的扩增及TA克隆 | 第57-59页 |
| ·增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)的扩增及TA克隆 | 第59-61页 |
| ·水稻叶绿体荧光表达载体pUIPEBAs的构建 | 第61-64页 |
| ·Leader序列对EGFP基因在原核中表达的影响 | 第64-67页 |
| ·水稻叶绿体荧光载体在杜氏盐藻和洋葱表皮细胞中的瞬时表达 | 第67-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| 4 水稻叶绿体遗传转化体系的建立 | 第71-106页 |
| ·实验材料 | 第71-72页 |
| ·植物材料 | 第71页 |
| ·试剂和菌株 | 第71-72页 |
| ·实验方法 | 第72-82页 |
| ·水稻叶绿体遗传转化载体的构建 | 第72-73页 |
| ·Western blot检测bar基因在原核中的表达 | 第73-75页 |
| ·基因枪转化 | 第75-76页 |
| ·转化受体的培养及植株再生 | 第76-77页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第77页 |
| ·转化植株的Southern blot检测 | 第77-81页 |
| ·转化植株的RT-PCR鉴定 | 第81-82页 |
| ·转化植株叶片的荧光检测 | 第82页 |
| ·结果与分析 | 第82-103页 |
| ·水稻叶绿体转化载体pCTE04的构建 | 第82-86页 |
| ·水稻叶绿体转化载体pCTE05的构建 | 第86-88页 |
| ·水稻叶绿体转化载体pCTE06的构建 | 第88-91页 |
| ·水稻幼胚的转化 | 第91-92页 |
| ·水稻愈伤的转化 | 第92-97页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第97-103页 |
| ·讨论 | 第103-106页 |
| 5 Co60γ射线对水稻基因枪转化效率的影响 | 第106-119页 |
| ·实验材料 | 第106-107页 |
| ·植物材料 | 第106页 |
| ·质粒和菌株 | 第106页 |
| ·培养基 | 第106-107页 |
| ·实验方法 | 第107-108页 |
| ·水稻愈伤组织的诱导 | 第107页 |
| ·Co~(60)γ射线辐射处理 | 第107页 |
| ·基因枪转化及植株再生 | 第107页 |
| ·水稻总DNA的提取 | 第107页 |
| ·转基因植株的Southern blot检测 | 第107页 |
| ·荧光显微镜观察 | 第107页 |
| ·转基因植株的Western blot检测 | 第107-108页 |
| ·结果与分析 | 第108-117页 |
| ·辐射对愈伤组织生长的影响 | 第108-110页 |
| ·辐射对愈伤分化的影响 | 第110-111页 |
| ·辐射对转化效率的影响 | 第111-113页 |
| ·抗性植株的获得及检测 | 第113-116页 |
| ·Southern blot及遗传分析 | 第116-117页 |
| ·讨论 | 第117-119页 |
| 结论与创新 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-134页 |
| 附录A | 第134-139页 |
| 附录B | 第139-141页 |
| 附录C | 第141-142页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第142-143页 |
| 致谢 | 第143-144页 |
