| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-20页 |
| ·干扰素的研究概述 | 第11-12页 |
| ·γ干扰素的发现 | 第11页 |
| ·干扰素的理化性质 | 第11-12页 |
| ·γ干扰素受体及其介导的信号传导机制 | 第12-14页 |
| ·γ干扰素受体 | 第12页 |
| ·γ干扰素的信号传导机制 | 第12-13页 |
| ·不依赖 STAT 的γ干扰素信号传导途径 | 第13页 |
| ·干扰素信号传导的抑制调节 | 第13-14页 |
| ·干扰素的生物学特性及作用机理： | 第14-16页 |
| ·干扰素抗病毒活性及其机理 | 第14页 |
| ·干扰素的免疫调节活性 | 第14-15页 |
| ·干扰素的抗肿瘤活性 | 第15-16页 |
| ·γ干扰素的应用及发展前景 | 第16页 |
| ·乳酸乳球菌作为宿主菌表达外源抗原的研究进展 | 第16-18页 |
| ·乳酸乳球菌的益生作用 | 第16-17页 |
| ·乳酸乳球菌作为活载体疫苗传递载体的优越性 | 第17页 |
| ·乳酸乳球菌作为表达载体的应用 | 第17-18页 |
| ·研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 2 材料及方法 | 第20-34页 |
| ·实验材料 | 第20-22页 |
| ·菌株和载体 | 第20页 |
| ·病毒和细胞 | 第20页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·引物设计与基因合成 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·实验仪器 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-34页 |
| ·表达 CaIFN-γ重组大肠杆菌的构建 | 第22-25页 |
| ·CaIFN-γ在重组大肠杆菌中的诱导表达 | 第25-26页 |
| ·多克隆抗血清的制备 | 第26-27页 |
| ·表达犬γ干扰素重组乳酸乳球菌的构建 | 第27-30页 |
| ·CaIFN-γ重组乳酸乳球菌的诱导表达及鉴定 | 第30页 |
| ·重组乳酸乳球菌发酵罐条件优化 | 第30-31页 |
| ·犬γ干扰素抗病毒活性检测 | 第31-34页 |
| 3 实验结果 | 第34-51页 |
| ·重组表达质粒 pET30a-caIFN-γ的鉴定结果 | 第34-35页 |
| ·重组大肠杆菌蛋白的诱导及表达鉴定 | 第35-37页 |
| ·重组大肠杆菌不同时间蛋白表达 | 第35页 |
| ·重组蛋白 CaIFN-γ的表达形式分析 | 第35-36页 |
| ·重组大肠杆菌表达产物 westen blot 的鉴定结果 | 第36-37页 |
| ·疫兔血清抗体效价间接 ELISA 结果 | 第37页 |
| ·重组乳酸乳球菌表达系统的构建 | 第37-39页 |
| ·重组大肠杆菌阳性重组质粒的鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组乳酸乳球菌 PAMJ399-CaIFN-γ/ PSM565 的鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组乳酸乳球菌表达 CaIFN-γ蛋白的鉴定 | 第39-41页 |
| ·重组乳酸乳球菌 SDS-PAGE 结果 | 第39-40页 |
| ·重组乳酸乳球菌 Western-blot 结果 | 第40-41页 |
| ·发酵罐条件的优化 | 第41-45页 |
| ·不同重组菌随诱导时间变化的生长情况 | 第41-42页 |
| ·β甘油磷酸二钠对重组菌生长情况的影响 | 第42-43页 |
| ·发酵罐条件的优化 | 第43-45页 |
| ·犬γ干扰素抗病毒活性的检测 | 第45-51页 |
| ·干扰素细胞毒性实验 | 第45-46页 |
| ·干扰素抗病毒活性 | 第46-47页 |
| ·MTT 法检测干扰素抗病毒活性结果 | 第47-48页 |
| ·MDCK 细胞攻毒后病毒载量的检测结果 | 第48-51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| ·构建重组乳酸乳球菌表达系统的立足点 | 第51-52页 |
| ·重组乳酸乳球菌表达蛋白效果分析 | 第52-53页 |
| ·重组犬γ干扰素抗病毒活性及检测方法分析 | 第53-54页 |
| ·重组乳酸乳球菌发酵与发酵技术分析 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 附录 | 第64-68页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第68页 |
