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洋甘菊FPS基因的克隆表达及盐胁迫研究

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
文献综述第9-15页
 1 洋甘菊简介第9-10页
   ·洋甘菊植物学性状第9页
   ·洋甘菊栽培及繁殖研究第9-10页
     ·栽培研究第9页
     ·繁殖研究第9-10页
 2 洋甘菊抗逆性研究第10-11页
 3 洋甘菊成分研究第11-13页
   ·化学成分研究第11页
   ·挥发油提取及成分研究第11-13页
 4 洋甘菊药理作用研究第13页
 5 法呢基焦磷酸合酶(FPS)研究进展第13-15页
引言第15-16页
材料与方法第16-31页
 1 实验材料第16页
 2 实验试剂第16-17页
 3 实验仪器第17-18页
 4 实验方法第18-31页
   ·洋甘菊FPS基因的克隆及表达研究第18-24页
     ·洋甘菊花RNA提取预准备第18页
     ·洋甘菊总RNA提取及检测第18页
     ·洋甘菊FPScDNA获得第18-19页
     ·目的基因的PCR扩增第19页
     ·洋甘菊FPS基因克隆载体的构建及测序第19-20页
       ·DNA凝胶回收试剂盒回收FPS基因PCR产物第19-20页
       ·连接与转化第20页
     ·对获得的目的基因的生物信息学分析第20页
     ·洋甘菊原核表达载体pET-30a(+)-FPS的构建第20-22页
       ·质粒提取第20-21页
       ·双酶切目的片段与表达载体第21页
       ·连接产物转化及测序第21-22页
     ·重组质粒pET-30a(+)-FPS在大肠杆菌中的诱导表达第22-23页
       ·试剂配制第22页
       ·重组质粒转化到表达菌株BL21(DE3)第22-23页
     ·pET-30a(+)-FPS在BL21(DE3)中诱导表达第23-24页
       ·不同诱导时间对FPS表达的影响第23页
       ·不同IPTG浓度对FPS表达的影响第23页
       ·不同温度及提取方式对FPS表达的影响第23页
       ·SDS-PAGE电泳及蛋白检测第23-24页
     ·Westernblotting检测第24页
   ·洋甘菊盐胁迫研究第24-31页
     ·洋甘菊种子萌发、根长、茎长及幼苗鲜重和干重的测量第24页
     ·生理指标测定第24-28页
       ·游离脯氨酸的测定第25-26页
       ·可溶性糖含量测定第26-27页
       ·叶绿素含量测定第27页
       ·过氧化物酶(POD)含量的测定第27-28页
     ·外部形态及显微结构的变化第28-31页
实验结果与分析第31-46页
 1 洋甘菊FPS基因的克隆及表达研究第31-41页
   ·洋甘菊RNA的鉴定第31页
   ·RT-PCR扩增第31-32页
   ·洋甘菊FPS基因的生物信息学分析第32-37页
     ·洋甘菊FPS基因序列特征第32页
     ·洋甘菊FPS基因Blastx分析第32-33页
     ·洋甘菊FPS基因同源分析第33-34页
     ·洋甘菊FPS二级结构预测第34-35页
     ·洋甘菊FPS疏水性分析第35-36页
     ·洋甘菊FPS蛋白跨膜分析第36页
     ·洋甘菊FPS信号肽分析第36-37页
   ·pET-30a(+)-FPS原核表达载体的构建和鉴定第37-38页
   ·pET-30a(+)-FPS基因在BL21(DE3)中诱导表达第38-41页
 2 洋甘菊盐胁迫研究第41-46页
   ·盐胁迫对洋甘菊种子萌发的影响第41-42页
   ·盐胁迫对洋甘菊幼苗生理指标的影响第42-44页
     ·不同浓度盐胁迫对洋甘菊叶绿素含量的影响第43页
     ·盐胁迫对洋甘菊可溶性糖和脯氨酸的影响第43-44页
     ·不同浓度盐胁迫对洋甘菊过氧化物酶(POD)的影响第44页
   ·盐胁迫对洋甘菊外部形态和显微结构的影响第44-46页
讨论第46-48页
结论第48-49页
附录第49-55页
致谢第55-56页
参考文献第56-61页
作者简介第61页
硕士期间获得成果第61页

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