摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
文献综述 | 第9-15页 |
1 洋甘菊简介 | 第9-10页 |
·洋甘菊植物学性状 | 第9页 |
·洋甘菊栽培及繁殖研究 | 第9-10页 |
·栽培研究 | 第9页 |
·繁殖研究 | 第9-10页 |
2 洋甘菊抗逆性研究 | 第10-11页 |
3 洋甘菊成分研究 | 第11-13页 |
·化学成分研究 | 第11页 |
·挥发油提取及成分研究 | 第11-13页 |
4 洋甘菊药理作用研究 | 第13页 |
5 法呢基焦磷酸合酶(FPS)研究进展 | 第13-15页 |
引言 | 第15-16页 |
材料与方法 | 第16-31页 |
1 实验材料 | 第16页 |
2 实验试剂 | 第16-17页 |
3 实验仪器 | 第17-18页 |
4 实验方法 | 第18-31页 |
·洋甘菊FPS基因的克隆及表达研究 | 第18-24页 |
·洋甘菊花RNA提取预准备 | 第18页 |
·洋甘菊总RNA提取及检测 | 第18页 |
·洋甘菊FPScDNA获得 | 第18-19页 |
·目的基因的PCR扩增 | 第19页 |
·洋甘菊FPS基因克隆载体的构建及测序 | 第19-20页 |
·DNA凝胶回收试剂盒回收FPS基因PCR产物 | 第19-20页 |
·连接与转化 | 第20页 |
·对获得的目的基因的生物信息学分析 | 第20页 |
·洋甘菊原核表达载体pET-30a(+)-FPS的构建 | 第20-22页 |
·质粒提取 | 第20-21页 |
·双酶切目的片段与表达载体 | 第21页 |
·连接产物转化及测序 | 第21-22页 |
·重组质粒pET-30a(+)-FPS在大肠杆菌中的诱导表达 | 第22-23页 |
·试剂配制 | 第22页 |
·重组质粒转化到表达菌株BL21(DE3) | 第22-23页 |
·pET-30a(+)-FPS在BL21(DE3)中诱导表达 | 第23-24页 |
·不同诱导时间对FPS表达的影响 | 第23页 |
·不同IPTG浓度对FPS表达的影响 | 第23页 |
·不同温度及提取方式对FPS表达的影响 | 第23页 |
·SDS-PAGE电泳及蛋白检测 | 第23-24页 |
·Westernblotting检测 | 第24页 |
·洋甘菊盐胁迫研究 | 第24-31页 |
·洋甘菊种子萌发、根长、茎长及幼苗鲜重和干重的测量 | 第24页 |
·生理指标测定 | 第24-28页 |
·游离脯氨酸的测定 | 第25-26页 |
·可溶性糖含量测定 | 第26-27页 |
·叶绿素含量测定 | 第27页 |
·过氧化物酶(POD)含量的测定 | 第27-28页 |
·外部形态及显微结构的变化 | 第28-31页 |
实验结果与分析 | 第31-46页 |
1 洋甘菊FPS基因的克隆及表达研究 | 第31-41页 |
·洋甘菊RNA的鉴定 | 第31页 |
·RT-PCR扩增 | 第31-32页 |
·洋甘菊FPS基因的生物信息学分析 | 第32-37页 |
·洋甘菊FPS基因序列特征 | 第32页 |
·洋甘菊FPS基因Blastx分析 | 第32-33页 |
·洋甘菊FPS基因同源分析 | 第33-34页 |
·洋甘菊FPS二级结构预测 | 第34-35页 |
·洋甘菊FPS疏水性分析 | 第35-36页 |
·洋甘菊FPS蛋白跨膜分析 | 第36页 |
·洋甘菊FPS信号肽分析 | 第36-37页 |
·pET-30a(+)-FPS原核表达载体的构建和鉴定 | 第37-38页 |
·pET-30a(+)-FPS基因在BL21(DE3)中诱导表达 | 第38-41页 |
2 洋甘菊盐胁迫研究 | 第41-46页 |
·盐胁迫对洋甘菊种子萌发的影响 | 第41-42页 |
·盐胁迫对洋甘菊幼苗生理指标的影响 | 第42-44页 |
·不同浓度盐胁迫对洋甘菊叶绿素含量的影响 | 第43页 |
·盐胁迫对洋甘菊可溶性糖和脯氨酸的影响 | 第43-44页 |
·不同浓度盐胁迫对洋甘菊过氧化物酶(POD)的影响 | 第44页 |
·盐胁迫对洋甘菊外部形态和显微结构的影响 | 第44-46页 |
讨论 | 第46-48页 |
结论 | 第48-49页 |
附录 | 第49-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
作者简介 | 第61页 |
硕士期间获得成果 | 第61页 |