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茶树中与氨基酸合成相关的三个基因的克隆与分析

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
1 文献综述第9-19页
   ·植物氮代谢的相关研究第9-11页
     ·氮素在植物中的功能第9页
     ·植物对氮素的吸收和同化第9-10页
     ·植物氮代谢过程中的相关酶第10页
     ·茶树体内的氮代谢第10-11页
   ·茶氨酸及其代谢相关酶的研究第11-14页
     ·茶氨酸的理化性质第11-12页
     ·茶氨酸在茶树体内的分布规律第12页
     ·茶氨酸的生理功能第12页
     ·茶树体内茶氨酸的代谢第12-14页
     ·谷氨酰胺合成酶研究现状第14-16页
     ·植物谷氨酰胺合成酶的种类与分布第14-15页
     ·植物谷氨酰胺合成酶的分子生物学研究第15-16页
     ·植物谷氨酰胺合成酶的表达与调控第16页
     ·精氨酸脱羧酶基因研究现状第16-19页
     ·精氨酸脱羧酶基因所编码蛋白质的基本特性第17页
     ·精氨酸脱羧酶基因基因的表达特性第17-18页
     ·精氨酸脱羧酶基因基因的定位与编码蛋白的分布第18-19页
2 引言第19-20页
   ·研究目的及意义第19页
   ·研究内容第19-20页
3 材料与方法第20-28页
   ·材料、试剂与仪器第20-21页
     ·材料第20页
     ·试剂第20页
     ·主要仪器第20-21页
   ·实验方法第21-28页
     ·引物设计第21页
     ·茶叶中总RNA的提取第21页
     ·GS1-1、GS1-2 和 ADC的 3’和 5’端PCR扩增及验证第21-25页
     ·原核表达载体pET-32(a)-GS的构建、诱导表达及蛋白检测第25-28页
4. 结果与分析第28-48页
   ·GS1-1 目的基因 3′RACE 和 5′RACE 扩增产物的电泳检测及测序第28页
   ·GS1-1 拼接全长序列的获得第28页
   ·GS1-1 的核苷酸序列分析第28-29页
   ·GS1-1 的蛋白质特征分析第29-33页
     ·GS1-1 的ORF及其编码的氨基酸序列预测第29页
     ·GS1-1 基因的氨基酸序列及理化性质分析第29页
     ·GS1-1 蛋白质序列的多重比较第29-30页
     ·GS1-1 蛋白质的亲水/疏水性分析第30页
     ·GS1-1 蛋白质的跨膜结构预测第30-31页
     ·GS1-1 蛋白质的信号肽预测第31页
     ·GS1-1 蛋白质的磷酸化位点预测第31-32页
     ·GS1-1 蛋白质二级结构预测第32页
     ·GS1-1 蛋白质亚细胞定位预测第32-33页
     ·茶树GS1-1 蛋白的分子进化分析第33页
   ·GS1-2 目的基因 3′RACE 和 5′RACE 扩增产物的电泳检测及测序第33-34页
   ·GS1-2 目的基因的PCR扩增第34-35页
   ·GS1-2 的核苷酸序列分析第35页
   ·GS1-2 的蛋白质特征分析第35-39页
     ·GS1-2 的ORF及其编码的氨基酸序列预测第35-36页
     ·GS1-2 基因的氨基酸序列及理化性质分析第36页
     ·GS1-2 蛋白质序列的多重比较第36页
     ·GS1-2 蛋白质的亲水/疏水性分析第36页
     ·GS1-2 蛋白质的跨膜结构预测第36-37页
     ·GS1-2 蛋白质的信号肽预测第37页
     ·GS1-2 蛋白质的磷酸化位点预测第37-38页
     ·GS1-2 蛋白质二级结构预测第38页
     ·GS1-2 蛋白质亚细胞定位预测第38页
     ·茶树GS1-2 蛋白的分子进化分析第38-39页
   ·ADC基因的 3′和 5′RACE扩增产物的电泳检测及测序第39-40页
   ·ADC基因的PCR扩增第40页
   ·ADC的核苷酸序列分析第40-41页
   ·ADC基因的蛋白质特征分析第41-45页
     ·ADC基因ORF及其编码的氨基酸序列预测第41页
     ·ADC基因的氨基酸序列及理化性质分析第41页
     ·ADC蛋白质序列的多重比较第41页
     ·ADC蛋白的亲水/疏水性分析第41-42页
     ·ADC蛋白的跨膜结构预测第42页
     ·ADC蛋白的信号肽预测第42-43页
     ·ADC蛋白磷酸化位点预测第43-44页
     ·ADC蛋白卷曲螺旋结构预测与分析第44页
     ·ADC蛋白亚细胞定位预测第44页
     ·茶树ADC蛋白的分子进化分析第44-45页
   ·GS1-2 基因的原核表达第45-48页
     ·GS1-2 基因完整阅读框扩增产物的电泳检测第45-46页
     ·重组子的鉴定第46页
     ·pET-32(a)-GS表达蛋白的检测第46-48页
5 讨论第48-51页
   ·GS1-1、GS1-2 及A DC的cDNA全长克隆第48页
   ·原核表达载体的构建及诱导表达第48-49页
   ·GS1-1、GS1-2 与茶氨酸合成酶及茶树的氮代谢第49页
   ·ADC与茶氨酸的生物合成及茶树的氮代谢第49-51页
6 结论第51-52页
   ·GS1-13’序列的获得及cDNA序列的生物信息学分析第51页
   ·GS1-2 的cDNA全长序列的获得及生物信息学分析第51页
   ·ADC的cDNA全长序列的获得及生物信息学分析第51页
   ·GS1-2 的原核表达载体的构建与诱导表达及蛋白检测第51-52页
参考文献第52-57页
附录第57-70页
致谢第70-71页
作者简介第71页

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