| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 第一章 引言 | 第9-18页 |
| ·蛋白质中保守序列的作用 | 第9-12页 |
| ·维持蛋白的结构 | 第9-10页 |
| ·保持蛋白的功能 | 第10-11页 |
| ·保守序列的应用 | 第11-12页 |
| ·PepT2 的结构与功能及质粒载体 | 第12-14页 |
| ·PepT2 的结构与功能 | 第12-13页 |
| ·PepT2 中保守序列 | 第13-14页 |
| ·基因克隆的质粒载体 | 第14-17页 |
| ·质粒 DNA 的分离与纯化 | 第15页 |
| ·质粒载体的构建及类型 | 第15-17页 |
| ·本课题的选题意义及主要内容 | 第17-18页 |
| 第二章 寡肽转运蛋白 PepT2(1~174)及 PepT2(281~362)的原核表达 | 第18-31页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·主要仪器设备 | 第18-19页 |
| ·实验试剂 | 第19页 |
| ·实验菌种 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-26页 |
| ·PepT2(281~362)基因的扩增 | 第19-21页 |
| ·PepT2(281~362)基因序列引物的设计 | 第19-20页 |
| ·PepT2(281~362)基因的 PCR 扩增 | 第20-21页 |
| ·重组质粒的制备 | 第21-23页 |
| ·载体质粒 pET30a (+)的制备 | 第21页 |
| ·PCR 产物和 pET30a(+)质粒的双酶切 | 第21-22页 |
| ·PepT2(281~362)基因与 pET30a(+)载体的连接 | 第22-23页 |
| ·重组质粒 pET30a(+)/PepT2(281~362)重组表达质粒的转化 | 第23页 |
| ·CaCl2法制备感受态细胞 | 第23页 |
| ·pET30a(+)/PepT2(281~362)重组质粒的转化 | 第23页 |
| ·重组质粒 pET30a(+)/PepT2(281~362)的检测与鉴定 | 第23-25页 |
| ·pET30a(+)/PepT2(281~362)的电泳检测 | 第23-24页 |
| ·pET30a(+)/PepT2(281~362)的酶切鉴定 | 第24页 |
| ·pET30a(+)/PepT2(281~362)质粒的 PCR 鉴定 | 第24-25页 |
| ·pET30a(+)/PepT2(1~174)质粒的测序 | 第25页 |
| ·重组表达质粒 pET30a(+)/PepT2 (1~174)的诱导表达 | 第25-26页 |
| ·实验结果与讨论 | 第26-30页 |
| ·目的基因的 PCR | 第26-27页 |
| ·pET30a(+)/PepT2(281~362)表达质粒的构建 | 第27-28页 |
| ·pET30a(+)/PepT2(281~362)表达质粒鉴定 | 第28页 |
| ·pET30a(+)-PepT2(281~362)和 pET30a(+)-PepT2(1~174)重组质粒的测序 | 第28-29页 |
| ·PepT2(1~174)蛋白的诱导表达 | 第29-30页 |
| ·本章小结 | 第30-31页 |
| 第三章 功能肽段及模拟肽的合成及表征 | 第31-41页 |
| ·材料与方法 | 第31-36页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·实验试剂 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-36页 |
| ·功能肽段 FYLSINAGS 的合成 | 第32-35页 |
| ·肽的 RP-HPLC 色谱分析条件 | 第35页 |
| ·肽的质谱分析条件 | 第35-36页 |
| ·肽的 RP-HPLC 色谱分离纯化 | 第36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-40页 |
| ·FYLSINAGS 的 RP-HPLC 分析及质谱表征 | 第36-37页 |
| ·FYGLINSGG 的 RP-HPLC 分析及质谱表征 | 第37-38页 |
| ·FYGLINKGG 的 RP-HPLC 分析及质谱表征 | 第38页 |
| ·FYGLINAGG 的 RP-HPLC 分析及质谱表征 | 第38-39页 |
| ·FYLSINAGG 的 RP-HPLC 分析及质谱表征 | 第39-40页 |
| ·本章小结 | 第40-41页 |
| 第四章 功能肽段及模拟肽的性质研究 | 第41-65页 |
| ·实验材料与方法 | 第41-44页 |
| ·仪器与试剂 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-44页 |
| ·溶液的配置 | 第41-42页 |
| ·功能肽段及模拟肽与二肽的相互作用 | 第42-43页 |
| ·功能肽段及模拟肽与小牛胸腺肽 DNA 的相互作用 | 第43-44页 |
| ·结果与讨论 | 第44-64页 |
| ·功能肽段及模拟肽与 YY 的相互作用 | 第44-54页 |
| ·紫外光谱法研究功能肽段及模拟肽与 YY 的相互作用 | 第44-48页 |
| ·荧光光谱法研究功能肽段及模拟肽与 YY 的相互作用 | 第48-54页 |
| ·小牛胸腺肽 DNA 浓度及纯度的确定 | 第54页 |
| ·功能肽段及模拟肽与小牛胸腺肽 DNA 的相互作用 | 第54-64页 |
| ·紫外光谱法研究功能肽段及模拟肽与 DNA 的相互作用 | 第54-59页 |
| ·荧光光谱法研究功能肽段及模拟肽与 DNA 的相互作用 | 第59-64页 |
| ·本章小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 个人简历 | 第76页 |
