| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-16页 |
| ·共轭亚油酸及其生物合成 | 第9-10页 |
| ·亚油酸异构酶基因的克隆及原核表达 | 第10-11页 |
| ·原核表达系统 | 第11-14页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第12页 |
| ·链霉菌表达系统 | 第12页 |
| ·枯草杆菌表达系统 | 第12-14页 |
| ·亚油酸异构酶外源分泌表达中出现的问题 | 第14页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| ·研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第16-32页 |
| ·实验材料 | 第16-19页 |
| ·实验菌株和载体 | 第16页 |
| ·培养基成分 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16-17页 |
| ·工具酶 | 第17页 |
| ·实验所用溶液 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·分析工具 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-32页 |
| ·菌种培养与活化 | 第19-20页 |
| ·亚油酸异构酶基因的克隆 | 第20-23页 |
| ·亚油酸异构酶基因 PCR 产物胶回收纯化 | 第23-24页 |
| ·克隆载体的构建 | 第24-25页 |
| ·DH5 感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·重组质粒的转化 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的检测 | 第26页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的菌液 PCR 鉴定 | 第27页 |
| ·重组质粒的测序 | 第27页 |
| ·嗜酸乳杆菌中亚油酸异构酶基因的生物信息学分析 | 第27页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·重组质粒向枯草杆菌的转化 | 第28-30页 |
| ·重组表达质粒载体的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·亚油酸异构酶的 SDS-PAGE 及酶活活性检测 | 第31-32页 |
| 第三章 结果与分析 | 第32-46页 |
| ·亚油酸异构酶基因序列的克隆 | 第32-33页 |
| ·植物乳杆菌基因组的提取 | 第32页 |
| ·嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶基因的质粒载体的提取 | 第32-33页 |
| ·亚油酸异构酶基因的克隆 | 第33页 |
| ·亚油酸异构酶基因克隆载体构建及生物信息学分析 | 第33-41页 |
| ·基因 PCR 产物切胶纯化 | 第33-34页 |
| ·目的基因序列克隆载体的构建 | 第34-36页 |
| ·目的基因重组克隆载体的鉴定 | 第36-38页 |
| ·亚油酸异构酶基因的生物信息学分析 | 第38-41页 |
| ·亚油酸异构酶基因原核表达载体构建 | 第41-44页 |
| ·亚油酸异构酶基因 LA 与表达载体 pSBPTQ 的构建 | 第41-43页 |
| ·LA-pSBPTQ 重组质粒向宿主菌 DB1342 的转化 | 第43-44页 |
| ·重组质粒 LA-pSBPTQ 在 DB1342 中的诱导表达 | 第44-45页 |
| ·重组质粒 LA-pSBPTQ 亚油酸异构酶活性检测 | 第45-46页 |
| 第四章 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 附录 | 第53-58页 |
| 个人简历 | 第58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58页 |
