摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
缩略词 | 第5-8页 |
1 绪论 | 第8-14页 |
·AsA 在植物体内的功能 | 第8-9页 |
·抗氧化作用 | 第8页 |
·调控细胞生长 | 第8-9页 |
·酶的辅因子 | 第9页 |
·光防护和光合成作用 | 第9页 |
·抗坏血酸的生物合成 | 第9-11页 |
·抗坏血酸-谷胱甘肽循环(AsA-GSH) | 第11-12页 |
·单脱氢抗坏血酸还原酶的研究近况 | 第12-13页 |
·本研究的目的、内容和意义 | 第13-14页 |
2 紫花苜蓿 MsMDAR 基因的克隆和序列分析 | 第14-20页 |
·材料 | 第14页 |
·植物材料 | 第14页 |
·实验试剂 | 第14页 |
·方法 | 第14-17页 |
·苜蓿总 RNA 提取 | 第14页 |
·cDNA 的合成 | 第14-15页 |
·PCR 扩增目的片段 | 第15页 |
·切胶回收目的片段产物 | 第15-16页 |
·回收产物的克隆测序 | 第16-17页 |
·结果和分析 | 第17-19页 |
·紫花苜蓿总 RNA 的提取 | 第17页 |
·MsMDAR 基因的克隆和序列分析 | 第17-19页 |
·讨论 | 第19-20页 |
3 MsMDAR 基因的原核表达 | 第20-26页 |
·材料 | 第20-21页 |
·试剂 | 第20页 |
·溶液的配制 | 第20-21页 |
·引物 | 第21页 |
·方法 | 第21-22页 |
·融合表达载体 pET-MDAR 的构建及转化 BL21(DE3) | 第21-22页 |
·重组质粒 pET-MDAR 在 BL21(DE3)中的诱导表达和电泳鉴定 | 第22页 |
·结果和分析 | 第22-24页 |
·重组质粒 pET-MDAR 的酶切鉴定 | 第22-23页 |
·MsMDAR 基因融合蛋白诱导表达 SDS-PAGE 鉴定 | 第23-24页 |
·讨论 | 第24-26页 |
4 MsMDAR 基因的亚细胞定位 | 第26-29页 |
·材料 | 第26页 |
·方法 | 第26-27页 |
·重组质粒 MDAR-GFP 的构建 | 第26页 |
·重组质粒 MDAR-GFP 在洋葱表皮细胞的瞬时表达 | 第26-27页 |
·结果和分析 | 第27页 |
·重组表达载体 MDAR-GFP 的酶切鉴定 | 第27页 |
·MsMDAR 基因在洋葱表皮细胞的瞬时定位 | 第27页 |
·讨论 | 第27-29页 |
5 MsMDAR 基因超表达载体的构建及烟草转化 | 第29-36页 |
·材料 | 第29页 |
·植物材料和试剂 | 第29页 |
·培养基的配制 | 第29页 |
·方法 | 第29-32页 |
·表达载体的构建 | 第29-31页 |
·重组质粒 pBI-MDAR 转化农杆菌 | 第31页 |
·农杆菌转化烟草 | 第31页 |
·转基因植株的鉴定 | 第31-32页 |
·结果和分析 | 第32-35页 |
·重组表达载体的酶切鉴定 | 第32-33页 |
·转基因烟草苗的获得 | 第33-34页 |
·转基因烟草苗的鉴定 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35-36页 |
6 MsMDAR 基因 RNA 干扰载体的构建及苜蓿转化 | 第36-41页 |
·材料 | 第36页 |
·方法 | 第36-37页 |
·MsMDAR 基因 RNA 干扰载体的构建 | 第36-37页 |
·MsMDAR 基因 RNA 干扰载体 pART-S-A 转化农杆菌 | 第37页 |
·农杆菌转化苜蓿 | 第37页 |
·转基因植株的 RT-PCR 检测 | 第37页 |
·结果和分析 | 第37-40页 |
·MsMDAR 基因 RNA 干扰载体的酶切鉴定 | 第37-39页 |
·苜蓿再生苗的获得 | 第39-40页 |
·转基因苜蓿苗的 RT-PCR 鉴定 | 第40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
7 结论与展望 | 第41-42页 |
·结论 | 第41页 |
·后续研究工作展望 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
附录 | 第47页 |
作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第47页 |