| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 1 绪论 | 第12-18页 |
| ·引言 | 第12-13页 |
| ·昆虫病原真菌致病机制研究背景及进展 | 第13-15页 |
| ·腺苷酸环化酶基因研究背景及进展 | 第15-16页 |
| ·研究目标及意义 | 第16页 |
| ·研究内容 | 第16-17页 |
| ·技术路线 | 第17页 |
| ·本研究创新之处 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-33页 |
| ·材料 | 第18-20页 |
| ·实验所用的菌株及昆虫 | 第18页 |
| ·主要的实验器材 | 第18-19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要培养基及溶液 | 第19-20页 |
| ·绿僵菌 MaAC 基因全长的克隆 | 第20页 |
| ·绿僵菌 MaAC 基因 cDNA 全长的克隆 | 第20-22页 |
| ·全长引物的设计 | 第20-21页 |
| ·绿僵菌 MaAC 基因 cDNA 序列的克隆 | 第21-22页 |
| ·绿僵菌 MaAC 基因序列生物信息学分析 | 第22-23页 |
| ·MaAC 基因的干扰分析 | 第23-32页 |
| ·扩增干扰目的片段并测序 | 第23-24页 |
| ·酶切目标干扰片段及双酶切干扰中间载体（pDPB） | 第24页 |
| ·构建 pDPB-MaAC 干扰中间载体 | 第24-25页 |
| ·构建 pPK2-pB-MaAC-RNAi 干扰载体 | 第25-26页 |
| ·农杆菌制备和转化 | 第26页 |
| ·筛选农杆菌阳性克隆 | 第26页 |
| ·转化绿僵菌 | 第26-28页 |
| ·荧光定量 PCR 检测干扰突变菌株的 RNA 干扰效率 | 第28-29页 |
| ·干扰突变株性状分析 | 第29-32页 |
| ·数据分析 | 第32-33页 |
| 3 结果和分析 | 第33-43页 |
| ·MaAC 基因的 cDNA 序列和 DNA 全长的获得 | 第33-35页 |
| ·MaAC 基因 cDNA 序列的扩增 | 第33页 |
| ·MaAC 基因 DNA 序列的获得 | 第33页 |
| ·生物信息学分析 | 第33-35页 |
| ·MaAC 基因 RNA 干扰分析 | 第35-43页 |
| ·干扰载体的构建和转化菌株的验证 | 第35页 |
| ·RNA 干扰效率的检测 | 第35-36页 |
| ·MaAC 基因影响绿僵菌营养生长 | 第36-37页 |
| ·MaAC 基因干扰突变菌株和野生菌株 cAMP 含量测定 | 第37-38页 |
| ·干扰突变菌株和野生菌株的生物学毒力测试 | 第38-40页 |
| ·MaAC 基因干扰突变菌株和野生菌株孢子抗氧化性和渗透压敏感性的比较分析 | 第40页 |
| ·MaAC 基因干扰突变菌株和野生菌株孢子耐热性和抗紫外能力的比较分析 | 第40-43页 |
| 4 讨论 | 第43-47页 |
| ·MaAC 基因影响真菌营养生长，对氧化性、渗透压、热及紫外的耐受性和真菌的毒力 | 第43-44页 |
| ·丝状真菌基因功能研究的方法 | 第44-47页 |
| ·基因敲除（gene knockout）及回复突变(reverse mutation) | 第44页 |
| ·超表达（over-expression） | 第44-45页 |
| ·RNA 干扰（RNA interference, RNAi） | 第45-47页 |
| 5 结论和后续工作 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附录 | 第55页 |
