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蚯蚓纤溶酶基因番茄表达载体的构建

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
第1章 文献综述第8-18页
   ·血栓疾病第8-9页
     ·血栓疾病的危害第8页
     ·血栓疾病的成因第8页
     ·溶血栓药物的发展状况第8-9页
   ·蚯蚓纤溶酶基因(Earthworm Fibrinolytic Enzymes EFE)研究进展第9-11页
     ·蚯蚓的药用价值第9页
     ·EFE的生化性质第9-10页
     ·EFE的分子生物学研究进展第10-11页
   ·植物基因工程研究进展第11-14页
     ·转基因植物研究进展第11-12页
     ·转基因植物存在问题及增强外源基因表达活性的方法第12-13页
     ·植物基因工程药用蛋白研究进展第13-14页
   ·转基因番茄研究进展第14-17页
     ·番茄遗传转化研究进展第14页
     ·E8启动子研究进展第14-17页
   ·本研究的目的和意义第17-18页
第2章 材料与方法第18-27页
   ·实验材料第18-20页
     ·植物材料第18页
     ·PCR引物第18页
     ·大肠杆菌菌株及载体质粒第18-19页
     ·培养基及试剂第19-20页
   ·实验方法第20-27页
     ·番茄基因组DNA的提取方法第20页
     ·EFE和E8基因的PCR扩增第20-21页
     ·碱裂解法制备质粒DNA:小量提取第21-22页
     ·碱裂解制备质粒DNA:中量提取第22-23页
     ·目的片段的电泳分离及回收第23页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第23-24页
     ·质粒DNA转化大肠杆菌第24页
     ·构建重组质粒标准连接体系第24页
     ·质粒酶切鉴定体系第24-25页
     ·表达载体pF和pEF构建流程第25-27页
第3章 结果与分析第27-35页
   ·E8与EFE基因的PCR扩增结果第27-31页
     ·番茄基因组DNA提取结果第27页
     ·E8启动子基因PCR扩增结果第27页
     ·pUCm-T-E8重组子的蓝白斑筛选第27-29页
     ·E8基因启动子的测序结果及序列分析第29-31页
     ·EFE基因PCR扩增结果第31页
     ·pUCm-EFE基因兰白斑筛选第31页
   ·pF载体的构建及鉴定第31-33页
   ·pEF载体的构建及鉴定第33-35页
第4章 讨论与结论第35-37页
附图第37-39页
参考文献第39-44页
致谢第44页

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