| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-41页 |
| 1．1 动物转基因研究进展 | 第12-20页 |
| 1．1．1 转基因动物技术体系的组成 | 第12页 |
| 1．1．2 转基因动物模型的遗传设计 | 第12-16页 |
| 1．1．3 转基因动物鉴定技术的研究进展 | 第16-17页 |
| 1．1．4 转基因动物研究中存在的问题 | 第17-20页 |
| 1．2 基因打靶的原理及研究进展 | 第20-27页 |
| 1．2．1 同源重组发生的分子机理 | 第21-23页 |
| 1．2．2 基因打靶实验设计策略 | 第23-24页 |
| 1．2．3 基因打靶技术发展的三个阶段 | 第24-26页 |
| 1．2．4 基因打靶技术的应用 | 第26-27页 |
| 1．3 家蚕转基因研究进展 | 第27-34页 |
| 1．3．1 家蚕转基因研究的意义 | 第27-28页 |
| 1．3．2 转基因蚕研究中采用的报告基因 | 第28页 |
| 1．3．3 外源基因导入蚕的方法 | 第28-31页 |
| 1．3．4 外源基因向基因组的整合与表达 | 第31-34页 |
| 1．4 丝素重链基因研究背景 | 第34-37页 |
| 1．4．1 丝心蛋白重链基因的结构特征 | 第34-36页 |
| 1．4．2 丝素重链基因的表达调控 | 第36-37页 |
| 1．5 线粒体基础研究进展 | 第37-41页 |
| 1．5．1 线粒体作为新的转基因载体的设想 | 第37页 |
| 1．5．2 线粒体基因组研究进展 | 第37-39页 |
| 1．5．3 蚕类昆虫线粒体基因组研究进展 | 第39-40页 |
| 1．5．4 转线粒体（基因）动物研究进展 | 第40-41页 |
| 第二章 引言 | 第41-46页 |
| 2．1 论文立题的原由和基本研究思路 | 第41-43页 |
| 2．1．1 同源重组定点改造家蚕丝素重链基因的重要意义 | 第41-43页 |
| 2．1．2 线粒体作转基因载体的重要意义 | 第43页 |
| 2．2 实验技术路线 | 第43-45页 |
| 2．2．1 构建同源臂的技术路线 | 第43-44页 |
| 2．2．2 外源基因导入、定点整合至丝素重链基因的技术路线 | 第44-45页 |
| 2．2．3 线粒体载体研究的技术路线 | 第45页 |
| 2．3 本论文研究的创新点 | 第45-46页 |
| 第三章 同源臂的构建 | 第46-68页 |
| 3．1 材料和方法 | 第48-55页 |
| 3．2 结果与分析 | 第55-61页 |
| 3．2．1 基因组DNA的抽提 | 第55-56页 |
| 3．2．2 基因组DNA双酶切 | 第56页 |
| 3．2．3 酶切片段加接头预扩增 | 第56-57页 |
| 3．2．4 加碱基接头特异引物的扩增 | 第57页 |
| 3．2．5 外套特异引物扩增 | 第57-58页 |
| 3．2．6 内套特异引物扩增 | 第58页 |
| 3．2．7 扩增产物的克隆 | 第58-59页 |
| 3．2．8 两个结晶区片段的测序结果和序列比较 | 第59-61页 |
| 3．2．9 两结晶区片段的克隆鉴定 | 第61页 |
| 3．3 讨论 | 第61-68页 |
| 第四章 利用同源重组将GFP导入、整合至靶位点 | 第68-97页 |
| 4．1 材料和方法 | 第69-75页 |
| 4．2 结果与分析 | 第75-87页 |
| 4．2．1 构建同源重组质粒pGFPLR | 第75-79页 |
| 4．2．1．1 puFbGFP质粒的构建 | 第75-77页 |
| 4．2．1．2 同源序列的获得 | 第77页 |
| 4．2．1．3 同源重组质粒pGFPLR的构建 | 第77-79页 |
| 4．2．2 表达质粒pGFPLR向家蚕中的导入 | 第79-80页 |
| 4．2．3 注射外源基因的GO代各龄蚕PCR检测 | 第80-81页 |
| 4．2．4 Southern杂交检测 | 第81-82页 |
| 4．2．5 同源重组的检测 | 第82-84页 |
| 4．2．6 转基因蚕阳性率统计 | 第84-87页 |
| 4．2．7 Northern杂交检测 | 第87页 |
| 4．2．8 转基因蚕茧丝状况 | 第87页 |
| 4．3 讨论 | 第87-97页 |
| 4．3．1 外源基因导入方法的改进 | 第87-88页 |
| 4．3．2 外源基因在宿主细胞内的滞留与整合 | 第88-89页 |
| 4．3．3 同源重组整合 | 第89-94页 |
| 4．3．4 转基因的表达 | 第94-97页 |
| 第五章 线粒体作转基因载体的探索研究 | 第97-106页 |
| 5．1 材料与方法 | 第97-99页 |
| 5．2 结果与分析 | 第99-104页 |
| 5．2．1 外源线粒体的存在检测 | 第99-100页 |
| 5．2．1．1 线粒体检测 | 第99-100页 |
| 5．2．1．2 线粒体DNA检测 | 第100页 |
| 5．2．2 转线粒体对家蚕生长发育的影响 | 第100-104页 |
| 5．3 讨论 | 第104-106页 |
| 第六章 小结 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-120页 |
| 致谢 | 第120页 |