| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-25页 |
| ·研究背景 | 第10-11页 |
| ·国内外在该方向的研究现状及分析 | 第11-23页 |
| ·石油污染的现状 | 第11-12页 |
| ·微生物降解石油污染物的研究进展 | 第12-13页 |
| ·微生物降解石油污染物的遗传学研究进展 | 第13-14页 |
| ·石油降解性质粒研究进展 | 第14-16页 |
| ·石油降解性基因研究进展 | 第16-18页 |
| ·邻苯二酚2,3-双加氧酶基因及编码酶的研究进展 | 第18-21页 |
| ·基因工程菌的构建研究进展 | 第21-23页 |
| ·研究的目的和内容 | 第23-25页 |
| ·研究目的 | 第23页 |
| ·研究内容 | 第23-25页 |
| 第2章 材料和方法 | 第25-40页 |
| ·实验材料 | 第25-29页 |
| ·菌株和载体 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·实验药品 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| ·缓冲液和常用试剂的配制 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-40页 |
| ·石油降解性质粒的提取和降解功能研究 | 第29-32页 |
| ·邻苯二酚2,3-双加氧酶基因的克隆及序列分析 | 第32-37页 |
| ·邻苯二酚2,3-双加氧酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第37-40页 |
| 第3章 石油降解性质粒的提取和降解功能研究 | 第40-49页 |
| ·质粒DNA的检测 | 第40-41页 |
| ·石油降解性质粒DNA的提取 | 第41-45页 |
| ·菌株LY-5 质粒的提取和提取方法的讨论 | 第41-44页 |
| ·质粒DNA的酶切鉴定 | 第44-45页 |
| ·质粒DNA降解功能鉴定 | 第45-48页 |
| ·邻苯二酚2,3-双加氧酶活性检测 | 第45-46页 |
| ·质粒消除 | 第46-47页 |
| ·质粒DNA转化大肠杆菌感受态 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 第4章 邻苯二酚2,3-双加氧酶基因的克隆及序列分析 | 第49-64页 |
| ·克隆策略 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-63页 |
| ·c23O基因PCR扩增结果 | 第49-50页 |
| ·阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第50-53页 |
| ·c23O基因的序列测定与分析 | 第53-59页 |
| ·c23O基因所编码的氨基酸序列分析 | 第59-63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| 第5章 邻苯二酚2,3-双加氧酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第64-71页 |
| ·表达策略 | 第64页 |
| ·结果与分析 | 第64-70页 |
| ·c23O基因与pGEX-4T-2 质粒连接 | 第64-66页 |
| ·重组表达载体的筛选与鉴定 | 第66-68页 |
| ·重组菌株的全细胞蛋白电泳检测 | 第68-69页 |
| ·重组菌株邻苯二酚2,3-双加氧酶酶活检测 | 第69-70页 |
| ·本章小结 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 附图 | 第78-81页 |
| 致谢 | 第81页 |