| 中文摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 引言 | 第15-17页 |
| 参考文献 | 第16-17页 |
| 第一部分 制备适合高通量药物筛选的脑得生样品 | 第17-20页 |
| 前言 | 第17页 |
| (一) 脑得生不同极性成分的分离提取 | 第17页 |
| (二) 石油醚部分分离流程 | 第17-18页 |
| (三) 乙醇部分分离流程 | 第18页 |
| (四) 结果 | 第18页 |
| 讨论 | 第18-19页 |
| 小结 | 第19-20页 |
| 第二部分 脑得生功效相关高通量筛选模型的建立及全成分的筛选 | 第20-48页 |
| 前言 | 第20页 |
| 第一节 脑得生全组分对兴奋性氨基酸神经毒性作用的影响 | 第20-24页 |
| 1.材料与方法 | 第20-22页 |
| 2.实验结果 | 第22-24页 |
| ·谷氨酸损伤模型建立 | 第22-23页 |
| ·脑得生全组分对谷氨酸损伤的保护作用 | 第23-24页 |
| 第二节 脑得生全组分对过氧化氢致神经细胞损伤的保护作用 | 第24-27页 |
| 1.材料与方法 | 第25页 |
| 2.实验结果 | 第25-27页 |
| ·H_2O_2损伤模型建立 | 第25-26页 |
| ·脑得生所有组分对过氧化氢损伤的保护作用 | 第26-27页 |
| 第三节 脑得生全组分对炎症细胞损伤模型的保护作用 | 第27-29页 |
| 1.材料与方法 | 第27-28页 |
| 2.实验结果 | 第28-29页 |
| ·类小神经胶质细胞的建立 | 第28页 |
| ·脑得生全组分对炎症损伤的影响 | 第28-29页 |
| 第四节 脑得生全组分对线粒体损伤模型的保护作用 | 第29-37页 |
| (一) 脑得生全组分对叠氮钠致PC12细胞损伤模型的保护作用 | 第30-33页 |
| 1.材料与方法 | 第30页 |
| 2.实验结果 | 第30-33页 |
| ·叠氮钠损伤模型建立 | 第30-31页 |
| ·脑得生不同组分对叠氮钠致PC12细胞损伤的保护作用 | 第31-33页 |
| (二) 脑得生全组分对鱼藤酮致PC12细胞损伤模型的保护作用 | 第33-35页 |
| 1.材料与方法 | 第33页 |
| 2.实验结果 | 第33-35页 |
| ·鱼藤酮损伤模型建立 | 第33-34页 |
| ·脑得生全组分对鱼藤酮致PC12细胞损伤的作用 | 第34-35页 |
| (三) 脑得生全组分对体外线粒体损伤的保护作用 | 第35-37页 |
| 1.材料与方法 | 第36-37页 |
| 2.实验结果 | 第37页 |
| 第五节 高通量筛选结果汇总 | 第37-38页 |
| 讨论 | 第38-43页 |
| 小结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 第三部分 脑得生有效成分组制备方法研究 | 第48-54页 |
| 前言 | 第48页 |
| 第一节 脑得生组成及成分研究概况 | 第48-49页 |
| 1.脑得生组方 | 第48页 |
| 2.提取方法 | 第48-49页 |
| 乙醇提取物的大孔树脂分离 | 第48-49页 |
| 第二节 制备方法的筛选与优化 | 第49-52页 |
| 1.HPLC实验条件 | 第49-50页 |
| 2.实验方法 | 第50页 |
| 3.实验结果 | 第50-52页 |
| ·乙醇洗脱物Ⅰ部分与抗脑缺血有效成分的对比 | 第50页 |
| ·乙醇洗脱物Ⅱ部分与抗脑缺血有效成分的对比 | 第50页 |
| ·乙醇洗脱物Ⅲ部分与抗脑缺血有效成分的对比 | 第50页 |
| ·石油醚提取物与抗脑缺血有效成分的对比 | 第50-52页 |
| 讨论 | 第52-53页 |
| 小结 | 第53页 |
| 参考文献 | 第53-54页 |
| 第四部分 NECG体内抗脑缺血作用及其作用机制研究 | 第54-84页 |
| 前言 | 第54-55页 |
| 第一节 NECG对永久性局灶脑缺血损伤的治疗作用 | 第55-61页 |
| 1.实验材料 | 第55页 |
| 2.实验方法 | 第55-57页 |
| 3.实验结果 | 第57-61页 |
| ·NECG治疗性给药对脑缺血大鼠行为学指标的影响 | 第57页 |
| ·NECG治疗性给药对脑缺血大鼠神经功能缺陷评分的影响 | 第57-58页 |
| ·NECG治疗性给药对脑缺血大鼠脑缺血面积的影响 | 第58-59页 |
| ·NECG治疗性给药对脑缺血大鼠脑组织含水量的影响 | 第59页 |
| ·NECG治疗性给药对缺血大鼠脑组织SOD的影响 | 第59页 |
| ·NECG治疗性给药对脑缺血大鼠脑组织MDA含量的影响 | 第59-60页 |
| ·NECG治疗性给药对缺血大鼠脑组织ATP酶活性的影响 | 第60-61页 |
| ·NECG治疗性给药对脑缺血大鼠脑组织NO水平的影响 | 第61页 |
| 第二节 NECG对缺血脑组织炎症反应的抑制作用 | 第61-63页 |
| 1.实验材料 | 第61-62页 |
| 2.实验方法 | 第62页 |
| 3.实验结果 | 第62-63页 |
| ·NECG对永久性局灶脑缺血大鼠脑组织IL-6水平的影响 | 第62页 |
| ·NECG对永久性局灶脑缺血大鼠脑组织TNF-α水平的影响 | 第62-63页 |
| 第三节 NECG对缺血脑组织神经细胞凋亡的作用及其机制研究 | 第63-68页 |
| 1.实验材料 | 第64页 |
| 2.实验方法 | 第64-65页 |
| 3.实验结果 | 第65-68页 |
| ·NECG治疗性给药对线粒体功能的影响 | 第65-66页 |
| ·NECG对缺血侧海马CA1区神经元活性的影响 | 第66-67页 |
| ·NECG对缺血区海马神经元Bax以及caspase-3表达的影响 | 第67-68页 |
| 第四节 NECG对永久性局灶脑缺血损伤的预防作用 | 第68-73页 |
| 1.实验材料 | 第68页 |
| 2.实验方法 | 第68页 |
| 3.实验结果 | 第68-73页 |
| ·NECG预防性给药对大鼠行为学指标的改善作用 | 第68-69页 |
| ·NECG预防性给药对脑缺血大鼠神经功能缺陷评分的影响 | 第69-70页 |
| ·NECG预防性给药对脑缺血大鼠脑缺血面积的影响 | 第70-71页 |
| ·NECG预防性给药对脑缺血大鼠脑组织含水量的影响 | 第71页 |
| ·NECG预防性给药对缺血大鼠脑组织SOD活性的影响 | 第71页 |
| ·NECG预防性给药对脑缺血大鼠MDA含量的影响 | 第71-72页 |
| ·NECG预防性给药对缺血大鼠脑组织ATP酶活性的影响 | 第72-73页 |
| ·NECG预防性给药对脑缺血大鼠NO的影响 | 第73页 |
| 第五节 NECG预防性给药对缺血脑组织炎症反应的作用 | 第73-75页 |
| 1.实验材料 | 第73页 |
| 2.实验方法 | 第73页 |
| 3.实验结果 | 第73-75页 |
| ·NECG对永久性局灶脑缺血大鼠脑组织IL-6水平的影响 | 第73-74页 |
| ·NECG对永久性局灶脑缺血大鼠脑组织TNF-α水平的影响 | 第74-75页 |
| 第六节 NECG预防给药对缺血脑组织神经细胞凋亡的作用及其机制研究 | 第75-78页 |
| 1.实验材料 | 第75页 |
| 2.实验方法 | 第75页 |
| 3.实验结果 | 第75-78页 |
| ·NECG预防性给药对线粒体功能的影响 | 第75-76页 |
| ·NECG对脑缺血大鼠海马CA1区神经元活性的影响 | 第76-77页 |
| ·NECG对缺血区海马神经元Bax、caspase-3表达的影响 | 第77-78页 |
| 讨论 | 第78-80页 |
| 小结 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-84页 |
| 第五部分 NECG体外抗脑缺血作用机制的研究 | 第84-106页 |
| 前言 | 第84页 |
| 第一节 NECG对过氧化氢诱导PC12细胞凋亡的影响及其机制 | 第84-91页 |
| 1.材料与方法 | 第84-87页 |
| 2.实验结果 | 第87-91页 |
| ·细胞存活率测定 | 第87-88页 |
| ·细胞形态学分析 | 第88页 |
| ·流式细胞仪分析NECG对H_2O_2诱导PC12细胞凋亡的影响 | 第88-89页 |
| ·NECG对H_2O_2诱导PC12细胞Caspase-3活性的影响 | 第89-90页 |
| ·NECG对H_2O_2诱导PC12细胞Bcl-2、Bax、P53蛋白表达的影响 | 第90-91页 |
| ·NECG对H_2O_2诱导PC12细胞Cytochrome C释放的影响 | 第91页 |
| 第二节 NECG对叠氮钠诱导PC12细胞凋亡的影响 | 第91-95页 |
| 1.材料与方法 | 第91-92页 |
| 2.实验结果 | 第92-95页 |
| ·细胞存活率测定 | 第92-93页 |
| ·NECG对H_2O_2诱导的PC12细胞Caspase-3活性的影响 | 第93页 |
| ·NECG对叠氮钠诱导的PC12细胞内ROS含量的影响 | 第93-94页 |
| ·NECG对Bcl-2,Bax蛋白表达以及细胞色素C释放的影响 | 第94-95页 |
| 第三节 NECG对线粒体功能的改善作用 | 第95-99页 |
| 1.材料与方法 | 第95-96页 |
| 2.实验结果 | 第96-99页 |
| ·NECG对线粒体膜肿胀度的影响 | 第96-97页 |
| ·线粒体膜电位(△ψ)的测定 | 第97页 |
| ·脂质过氧化产物MDA测定 | 第97页 |
| ·还原型谷胱甘肽GSH的测定 | 第97-98页 |
| ·H~+-ATP酶活性测定 | 第98-99页 |
| 讨论 | 第99-102页 |
| 小结 | 第102页 |
| 参考文献 | 第102-106页 |
| 第六部分 复方中部分已知成分的作用研究 | 第106-121页 |
| 前言 | 第106页 |
| 第一节 已知化合物对线粒体氧化损伤的保护作用 | 第106-108页 |
| 1.材料与方法 | 第106页 |
| 2.实验结果 | 第106-108页 |
| ·已知化合物对线粒体肿胀度的影响 | 第106-107页 |
| ·已知化合物对线粒体膜电势的影响 | 第107页 |
| ·已知化合物对线粒体MDA含量的影响 | 第107-108页 |
| ·已知化合物对线粒体GSH含量的影响 | 第108页 |
| 第二节 复方中部分已知化合物对过氧化氢致PC12损伤的保护作用 | 第108-113页 |
| 1.材料与方法 | 第108页 |
| 2.实验结果 | 第108-113页 |
| ·已知化合物对细胞存活率的影响 | 第108-109页 |
| ·TMP对细胞存活率的影响 | 第109-110页 |
| ·TMP对细胞形态的影响 | 第110页 |
| ·TMP对细胞凋亡率的影响 | 第110-111页 |
| ·TMP对Caspase-3活性的影响 | 第111页 |
| ·TMP对细胞色素C的影响 | 第111-112页 |
| ·TMP对凋亡相关蛋白表达的影响 | 第112-113页 |
| 第三节 已知化合物对叠氮钠致PC12细胞损伤的作用 | 第113-118页 |
| 1.材料与方法 | 第113页 |
| 2.实验结果 | 第113-118页 |
| ·已知化合物对细胞存活率的影响 | 第113页 |
| ·Hyp对细胞存活率的影响 | 第113-114页 |
| ·Hyp对细胞凋亡形态的影响 | 第114-115页 |
| ·Hyp对细胞凋亡率的影响 | 第115-116页 |
| ·Hyp对细胞caspase-3活性的影响 | 第116-117页 |
| ·Hyp对细胞内ROS含量的影响 | 第117页 |
| ·Hyp对Bcl-2、Bax蛋白表达的影响 | 第117-118页 |
| 讨论 | 第118-119页 |
| 小结 | 第119-121页 |
| 第七部分 综合讨论 | 第121-127页 |
| 综述:线粒体疾病研究新进展 | 第127-135页 |
| 缩略词表(ABBREVIATIONS) | 第135-137页 |
| 相关工作 | 第137-146页 |
| 致谢 | 第146-147页 |
| 附录 | 第147-151页 |
