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丰香草莓高效再生的机理及遗传转化研究

缩略语表第1-13页
中文摘要第13-16页
第一章 文献综述第16-37页
 1 组织培养研究进展第16-23页
  1.1 茎尖培养第16-18页
   1.1.1 分离无病毒植株第16-17页
   1.1.2 快速繁殖第17-18页
   1.1.3 辐射诱变进行品种改良第18页
  1.2 叶片、叶柄和匍匐茎等器官的培养第18-19页
  1.3 花药培养第19-21页
   1.3.1 单倍体育种第19-20页
   1.3.2 获得脱毒苗第20-21页
  1.4 离体胚培养第21-22页
  1.5 原生质体培养及融合第22-23页
  1.6 细胞悬浮培养第23页
 2 影响外植体器官发生的因子及生理研究第23-25页
  2.1 活性氧与外植体器官发生第23-24页
  2.2 抗氧化酶与外植体器官发生第24-25页
 3 组培环境对组培苗生长的影响第25-28页
  3.1 物理因子第25-26页
   3.1.1 光第25页
   3.1.2 温度第25-26页
   3.1.3 湿度第26页
   3.1.4 气体的影响第26页
  3.2 化学因子第26-28页
   3.2.1 碳源第26-27页
   3.2.2 离子第27页
   3.3.3 培养基的pH值第27页
   3.3.4 支持材料第27-28页
 4 突变体筛选第28-29页
 5 种质资源保存第29-30页
 6 遗传转化第30-37页
  6.1 GUS,NOS和NPT Ⅱ基因的转化第30-32页
  6.2 抗虫基因的转化第32页
  6.3 抗病毒基因的转化第32-33页
  6.4 抗逆基因的转化第33页
  6.5 抗除草剂基因工程第33-34页
  6.6 品质改良的基因工程第34-37页
第二章 草莓叶片高效再生体系的建立第37-46页
 1 材料和方法第37-38页
  1.1 材料第37-38页
  1.2 方法第38页
   1.2.1 培养基第38页
   1.2.2 不同有色膜处理及其光谱辐射能的测定第38页
   1.2.3 暗处理第38页
   1.2.4 培养条件第38页
  1.3 数据统计第38页
 2 结果与分析第38-42页
  2.1 不同激素组合对丰香不定芽分化的影响第38-39页
  2.2 AgNO_3对草莓不定芽分化的影响第39-40页
  2.3 不同有色膜物理特性及对丰香不定芽形成的影响第40-41页
  2.4 暗处理对丰香不定芽形成的影响第41-42页
  2.5 生根和驯化移栽第42页
 3 讨论第42-46页
第三章 不同有色膜下丰香草莓的再生机理第46-51页
 1 材料与方法第46-47页
  1.1 材料第46页
  1.2 培养基及培养条件第46-47页
   1.2.1 培养基第46-47页
  1.2 酶活性和丙二醛(MDA)含量的测定第47页
  1.3 激素含量测定第47页
 2 结果与分析第47-49页
  2.1 外植体在不同有色膜下的生理效应第47-49页
   2.1.1 叶绿素含量的变化第47页
   2.1.2 抗氧化酶活性的变化第47-49页
   2.1.3 MDA含量的变化第49页
   2.1.4 激素含量的变化第49页
 3 讨论第49-51页
第四章 AgNO_3对草莓外植体生长及抗氧化酶活性的影响第51-58页
 1 材料与方法第51-53页
  1.1 材料第51-52页
  1.2 方法第52-53页
   1.2.2.1 酶的提取及测定第52页
   1.2.2.2 叶绿素色素含量第52页
   1.2.2.3 根系的活力第52页
   1.2.2.4 IAA含量第52页
   1.2.2.5 IAA氧化酶活性测定第52页
   1.2.2.6 脯氨酸含量的测定第52页
   1.2.2.7 乙烯释放量的测定第52-53页
 2 结果与分析第53-55页
  2.1 AgNO_3对草莓根生长的影响第53页
  2.2 AgNO_3对再生草莓植株生长的影响第53-54页
  2.3 AgNO_3对草莓叶片抗氧化酶的活性,O_2~(·-)生成速率及MDA含量的影响第54页
  2.4 AgNO_3对草莓叶片脯氨酸含量,乙烯释放量,IAA含量及其氧化酶活性的影响第54-55页
 3 讨论第55-58页
第五章 抗生素对草莓外植体生长的影响第58-66页
 1 材料与方法第58-59页
  1.1 材料第58页
  1.2 试剂第58-59页
  1.3 试验设计第59页
 2 结果与分析第59-62页
  2.1 Kan对组织培养形态发生的影响第59-60页
  2.2 Cef对组织培养形态发生的影响第60-61页
  2.3 Carb对组织培养形态发生的影响第61-62页
  2.4 Cef和Carb对组织培养形态发生的影响第62页
 3 讨论第62-66页
第六章 抗菌肽D和Insulin基因植物表达载体的构建第66-74页
 1 材料和方法第67-69页
  1.1 菌株和质粒第67页
  1.2 酶及生化药剂第67页
  1.3 培养基第67页
  1.4 质粒DNA的小量提取第67页
  1.5 PCR第67-68页
  1.4 植物重组表达载体pBI12-APD和pBI121-INS的构建第68-69页
   1.4.1 pBI121-APD载体的构建第68页
   1.4.2 pBI121-INS载体的构建步骤第68-69页
  1.5 重组质粒的鉴定第69页
  1.6 目的基因的序列测定第69页
 2 结果与分析第69-72页
  2.1 pBI121-APD和pBI121-INS基因植物表达载体的构建策略第69-70页
  2.2 pBI121-APD和pBI121-INS基因植物表达载体的酶切鉴定第70-72页
   2.2.1 pBI121-APD基因植物表达载体的酶切鉴定第70-71页
   2.2.2 pBI121-INS基因植物表达载体的酶切鉴定第71-72页
  2.3 目的基因的序列测定第72页
 3 讨论第72-74页
第七章 根癌农杆菌介导法转化草莓及转基因植株的鉴定第74-87页
 1 材料和方法第74-79页
  1.1 材料第74-75页
   1.1.1 植物材料第74页
   1.1.2 菌株和质粒第74页
   1.1.3 化学试剂药品第74-75页
   1.1.4 培养基第75页
   1.1.5 引物合成第75页
    1.1.5.1 检测抗菌肽APD基因的引物设计第75页
    1.1.5.2 检测NPTⅡ基因的引物设计第75页
    1.1.5.3 检测胰岛素INS基因的引物设计第75页
  1.2 方法第75-79页
   1.2.1 农杆菌的培养第75页
   1.2.2 受体材料的预培养第75页
   1.2.3 农杆菌侵染第75页
   1.2.4 共培养、筛选培养、继代培样第75-76页
   1.2.5 影响农杆菌转化效果的因素第76页
    1.2.5.1 菌液浓度和侵染时间第76页
    1.2.5.2 选择培养中抑菌抗生素及浓度的确定第76页
    1.2.5.3 预培养时间第76页
    1.2.5.4 共培养时间第76页
    1.2.5.5 选择方式第76页
   1.2.6 生根培养第76-77页
   1.2.7 转基因草莓的分子生物学鉴定第77-79页
    1.2.7.1 草莓基因组DNA的快速提取(改良SDS法)第77页
    1.2.7.2 PCR检测第77页
    1.2.7.3 Southern杂交第77-79页
     1.2.7.3.1 草莓基因组DNA的提取第78页
     1.2.7.3.2 草莓基因组DNA的酶切第78页
     1.2.7.3.3 电泳及转膜第78-79页
     1.2.7.3.4 探针制备及标记第79页
     1.2.7.3.5 杂交第79页
 2 结果第79-84页
  2.1 菌液浓度对转化效率的影响第79-80页
  2.2 侵染时间对转化效率的影响第80页
  2.3 预培养时间对转化率的影响第80-81页
  2.4 共培养时间对转化率的影响第81页
  2.5 抗生素对农杆菌的抑菌效果第81-82页
  2.6 筛选方式对转化率的影响第82页
  2.7 草莓转APD基因植株和转INS基因愈伤组织的获得第82页
  2.8 转基因草莓植株的检测第82-84页
   2.8.1 PCR鉴定第82-84页
    2.8.1.1 草莓APD基因转化株的检测第82-83页
    2.8.1.2 草莓INS基因转化愈伤组织的检测PCR鉴定第83-84页
   2.8.2 转基因草莓的Southern blot分析第84页
 3 讨论第84-87页
参考文献第87-98页
ABSTRACT第98-101页
博士期间发表的论文第101页

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