| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 肠道病毒71型基因组研究 | 第10-52页 |
| ·肠道病毒71型的研进展 | 第10-20页 |
| ·病毒的一般特征 | 第10-12页 |
| ·病毒颗粒结构及理化性质 | 第10-11页 |
| ·基因组结构 | 第11-12页 |
| ·病毒的复制 | 第12页 |
| ·流行病学 | 第12-14页 |
| ·EV71感染的临床症状 | 第14-15页 |
| ·分子流行病学 | 第15-16页 |
| ·确定致病的毒力决定簇 | 第16-18页 |
| ·EV71的控制 | 第18-19页 |
| ·EV71今后的研究重点 | 第19-20页 |
| ·研究目的 | 第20页 |
| ·材料和方法 | 第20-26页 |
| ·实验材料 | 第20-22页 |
| ·菌种、载体、血清 | 第20-21页 |
| ·测序引物的合成 | 第21页 |
| ·vp2引物设计与合成 | 第21页 |
| ·酶与试剂 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·仪器设备 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-26页 |
| ·病毒的分离、培养和特异性抗体鉴定 | 第22页 |
| ·粪便中RNA的提取采用QIAamp Viral RNA Kit方法 | 第22-23页 |
| ·逆转录和PCR | 第23页 |
| ·目的基因片段的回收 | 第23页 |
| ·目的基因片段克隆入pGEM(?)-T载体 | 第23-24页 |
| ·核苷酸序列测定 | 第24页 |
| ·目的基因克隆入酵母表达载体 | 第24页 |
| ·重组质粒的线性化 | 第24页 |
| ·感受态酵母宿主细胞的制备 | 第24页 |
| ·重组表达质粒的转化-电转化法 | 第24页 |
| ·转化株表型的筛选 | 第24页 |
| ·多拷贝整合转化子的筛选 | 第24-25页 |
| ·酵母基因组DNA的提取 | 第25页 |
| ·表达株的PCR检测 | 第25页 |
| ·表达菌株的诱导表达 | 第25页 |
| ·表达产物Western blot分析 | 第25页 |
| ·表达产物的ELISA鉴定 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-48页 |
| ·EV71 SHZH03全基因组的测序 | 第26-42页 |
| ·病毒全基因组cDNA库的够建 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第27页 |
| ·EV71基因组的结构分析 | 第27-28页 |
| ·病毒基因组核苷酸同源性比较 | 第28页 |
| ·病毒编码的氨基酸同源性比较 | 第28页 |
| ·病毒基因的遗传进化分析 | 第28-42页 |
| ·EV71外壳蛋白VP2在酵母中的表达 | 第42-48页 |
| ·重组表达质粒pPIC9K／VP 2的构建 | 第42页 |
| ·pPIC9K／VP2的验证 | 第42-45页 |
| ·pPIC9K／VP2转化酵母菌GS115和转化子的鉴定、筛选 | 第45-46页 |
| ·VP 2基因在毕赤酵母中的诱导表达、初步纯化和Western印记分析 | 第46页 |
| ·ELISA检测重组蛋白VP2的抗原性 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| ·结论 | 第51-52页 |
| 第2章 SARS冠状病毒结构蛋白的鉴定与分析 | 第52-96页 |
| ·SARS冠状病毒的研究进展 | 第52-80页 |
| ·SARS冠状病毒及相关冠状病毒的生生物学特征 | 第52-60页 |
| ·SARS病原学的确立 | 第52-53页 |
| ·SARS冠状病毒形态学 | 第53-54页 |
| ·冠状病毒概述 | 第54-58页 |
| ·SARS冠状病毒的稳定性和抵抗力 | 第58页 |
| ·SARS冠状病毒疫苗研究 | 第58-59页 |
| ·冠状病毒相关疾病潜在的治疗靶点 | 第59-60页 |
| ·SARS的定义、爆发与流行 | 第60-64页 |
| ·SARS的临床特征 | 第60页 |
| ·WHO建议的SARS病例定义 | 第60-61页 |
| ·世界多国的SARS暴发 | 第61页 |
| ·SARS暴发的概况 | 第61页 |
| ·中国内地SARS疫情 | 第61页 |
| ·SARS的流行病学 | 第61-64页 |
| ·SARS冠状病毒病基因组研究 | 第64-67页 |
| ·SARS-CoV突变与SARS系统发生关系分析 | 第67-69页 |
| ·SARS冠状病毒基因组编码蛋白的分析预测 | 第69-73页 |
| ·RNA聚合酶基因区域编码产物 | 第70-71页 |
| ·S蛋白(Spike Protein) | 第71-72页 |
| ·N蛋白(Nucleocapsid Protein) | 第72页 |
| ·M蛋白(Membrane Protein)和E蛋白(Envelope Protein) | 第72-73页 |
| ·SARS冠状病毒入侵宿主细胞的机制 | 第73-75页 |
| ·SARS的诊断、预防与治疗 | 第75-77页 |
| ·SARS冠状病毒今后研究的重点 | 第77-80页 |
| ·研究目的 | 第80页 |
| ·材料和方法 | 第80-82页 |
| ·毒株与细胞 | 第80页 |
| ·接种感染细胞 | 第80页 |
| ·病毒颗粒的纯化 | 第80-81页 |
| ·SDS-PAGE银染法 | 第81页 |
| ·银染胶内酶切 | 第81-82页 |
| ·考染胶内酶切 | 第82页 |
| ·候选蛋白的质谱分析 | 第82页 |
| ·结果与分析 | 第82-93页 |
| ·初步纯化SARS冠状病毒颗粒蛋白SDS-PAGE电泳结果 | 第82-84页 |
| ·质谱检测结果 | 第84-93页 |
| ·N蛋白质谱检测结果 | 第84-89页 |
| ·S蛋白质谱检测结果 | 第89-93页 |
| ·讨论 | 第93-95页 |
| ·结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-106页 |
| 缩略语表 | 第106-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 发表论文 | 第109页 |
