| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 英文缩写符号及中英文对照表 | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-36页 |
| 1．1 小麦纹枯病研究概况 | 第15-19页 |
| 1．1．1 病原学研究 | 第15-16页 |
| 1．1．2 病原菌致病机理的研究 | 第16-18页 |
| 1．1．3 现状与发展 | 第18-19页 |
| 1．2 植物病原微生物产生的降解酶及其作用 | 第19-25页 |
| 1．2．1 作为病原物侵染的致病因子 | 第19-23页 |
| 1．2．2 作为植物抗病反应的诱导因子 | 第23-24页 |
| 1．2．3 问题与展望 | 第24-25页 |
| 1．3 植物病原菌胞外蛋白酶的研究进展 | 第25-35页 |
| 1．3．1 植物细胞壁的化学组成和分子结构 | 第25-27页 |
| 1．3．2 植物中的蛋白酶抑制剂 | 第27-28页 |
| 1．3．3 蛋白酶的分类及其鉴定 | 第28-30页 |
| 1．3．4 植物病原菌胞外蛋白酶的作用 | 第30-33页 |
| 1．3．5 胞外蛋白酶的测定方法 | 第33-34页 |
| 1．3．6 结束语 | 第34-35页 |
| 1．4 本研究的目的意义 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-49页 |
| 2．1 实验材料 | 第36-37页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第36页 |
| 2．1．2 病原菌 | 第36页 |
| 2．1．3 生化试剂 | 第36页 |
| 2．1．4 酶与引物 | 第36-37页 |
| 2．2 实验方法 | 第37-49页 |
| 2．2．1 小麦纹枯病菌（Rhizoctonia cerealis）的分离与鉴定 | 第37页 |
| 2．2．2 小麦纹枯病菌胞外蛋白酶的制备 | 第37-39页 |
| 2．2．3 小麦纹枯病菌胞外蛋白酶的分离纯化 | 第39-42页 |
| 2．2．4 小麦纹枯病菌胞外蛋白酶的性质研究 | 第42-43页 |
| 2．2．5 小麦纹枯病菌胞外蛋白酶致病机理的研究 | 第43-45页 |
| 2．2．6 活体内蛋白酶活性的动态检测 | 第45页 |
| 2．2．7 RT-PCR检测类胰蛋白酶基因在受侵染小麦组织中的表达 | 第45-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-65页 |
| 3．1 小麦纹枯病菌（Rhizoctonia cerealis）的分离与鉴定 | 第49-50页 |
| 3．1．1 小麦纹枯病菌的分离 | 第49页 |
| 3．1．2 菌丝的Giemsa染色及形态观察 | 第49页 |
| 3．1．3 菌株筛选及产酶试验 | 第49-50页 |
| 3．2 小麦纹枯病菌胞外蛋白酶的分离与纯化 | 第50-55页 |
| 3．2．1 培养时间对小麦纹枯病菌胞外蛋白酶产量的影响 | 第50-51页 |
| 3．2．2 SP-Sepharose Fast Flow离子交换层析 | 第51-52页 |
| 3．2．3 Phenyl（high-sub）-Sepharose Fast Flow疏水层析 | 第52页 |
| 3．2．4 SephadexG-75分子筛层析 | 第52-53页 |
| 3．2．5 小麦纹枯病菌胞外蛋白酶的纯化结果 | 第53-54页 |
| 3．2．6 蛋白酶的纯度鉴定及相对分子量的测定 | 第54-55页 |
| 3．2．7 蛋白酶X光片显影 | 第55页 |
| 3．3 小麦纹枯病菌胞外蛋白酶的性质研究 | 第55-60页 |
| 3．3．1 最适温度 | 第55-56页 |
| 3．3．2 最适pH值 | 第56-57页 |
| 3．3．3 热稳定性 | 第57页 |
| 3．3．4 pH稳定性 | 第57-58页 |
| 3．3．5 金属离子对酶活性的影响 | 第58页 |
| 3．3．6 蛋白酶的底物特异性 | 第58-59页 |
| 3．3．7 蛋白酶抑制剂对酶活力的影响 | 第59-60页 |
| 3．4 小麦纹枯病菌胞外蛋白酶致病机理的研究 | 第60-61页 |
| 3．4．1 蛋白酶作用小麦细胞壁后底物蛋白含量的变化 | 第60页 |
| 3．4．2 蛋白酶作用于小麦细胞壁后产物中羟脯氨酸含量的变化 | 第60-61页 |
| 3．4．3 蛋白酶对小麦组织超微结构影响的电镜观察 | 第61页 |
| 3．5 活体内蛋白酶活性的动态检测 | 第61-62页 |
| 3．5．1 小麦组织中总蛋白酶活性的动态检测 | 第61-62页 |
| 3．5．2 小麦组织中类胰蛋白酶活性的动态检测 | 第62页 |
| 3．6 RT-PCR检测类胰蛋白酶基因在受侵染植物中的表达 | 第62-65页 |
| 4 讨论 | 第65-74页 |
| 4．1 关于RCP1的诱导 | 第65页 |
| 4．2 关于RCP1的纯化 | 第65-69页 |
| 4．2．1 离子交换层析（IEC) | 第65-67页 |
| 4．2．2 疏水作用层析（HIC) | 第67页 |
| 4．2．3 凝胶过滤层析（GF) | 第67页 |
| 4．2．4 SDS-PAGE电泳 | 第67-68页 |
| 4．2．5 纯化结果的分析 | 第68-69页 |
| 4．2．6 蛋白酶X光片显影 | 第69页 |
| 4．3 关于RCP1的性质 | 第69-71页 |
| 4．3．1 温度对酶活力的影响 | 第69-70页 |
| 4．3．2 pH对酶活力的影响 | 第70页 |
| 4．3．3 金属离子的影响 | 第70页 |
| 4．3．4 酶的底物特异性 | 第70-71页 |
| 4．3．5 抑制剂的影响 | 第71页 |
| 4．4 关于RCP1致病机理的研究 | 第71-73页 |
| 4．5 关于活体内蛋白酶活性的动态检测 | 第73页 |
| 4．6 关于类胰蛋白酶基因在受侵染小麦组织中的表达 | 第73-74页 |
| 5 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-91页 |
| 附录 | 第91-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第100页 |
