| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·选题背景与研究现状 | 第10页 |
| ·蛋壳品质研究的意义 | 第10页 |
| ·蛋壳的结构与形成过程 | 第10-12页 |
| ·蛋壳的结构 | 第10-11页 |
| ·蛋壳的形成过程 | 第11-12页 |
| ·蛋壳品质的研究现状 | 第12-14页 |
| ·蛋壳的质量评价机制 | 第12页 |
| ·有机基质对蛋壳形成的调控作用 | 第12-13页 |
| ·蛋白质对蛋壳形成的调控机制 | 第13-14页 |
| ·wdr72 基因的研究现状 | 第14-15页 |
| ·荧光定量 PCR | 第15-16页 |
| ·荧光定量 PCR 原理 | 第15-16页 |
| ·荧光定量 PCR 的特点 | 第16页 |
| ·荧光定量 PCR 的应用 | 第16页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第16-18页 |
| 第二章 蛋鸡 wdr72 全长编码基因克隆 | 第18-41页 |
| ·材料与方法 | 第18-30页 |
| ·材料与试剂 | 第18-20页 |
| ·实验方法 | 第20-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-37页 |
| ·PCR | 第30-32页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第32-34页 |
| ·家鸡 wdr72 基因的核苷酸突变位点 | 第34-36页 |
| ·wdr72 基因进化分析 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-41页 |
| ·对 GenBank 预测序列的验证 | 第38页 |
| ·酶切条件优化 | 第38-39页 |
| ·感受态细胞效率的提高 | 第39-40页 |
| ·重组子大小异常分析 | 第40页 |
| ·wdr72 进化分析 | 第40-41页 |
| 第三章 鸡 wdr72C 端基因的原核表达纯化与多抗制备 | 第41-53页 |
| ·材料与方法 | 第41-42页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·转化 | 第42页 |
| ·表达条件探索 | 第42页 |
| ·挑菌接种，用 IPTG 诱导 | 第42-43页 |
| ·检测目的蛋白可溶性 | 第43页 |
| ·镍柱纯化目标蛋白 | 第43-44页 |
| ·目的蛋白浓缩与检测 | 第44页 |
| ·实验结果 | 第44-49页 |
| ·蛋白质诱导条件优化 | 第44-46页 |
| ·目的蛋白可溶解性检验 | 第46-47页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| ·抗体制作 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-53页 |
| ·融合蛋白表达条件探索 | 第49-50页 |
| ·目的蛋白纯化方法的探索 | 第50页 |
| ·目的蛋白复性 | 第50页 |
| ·菌株与载体选择 | 第50-51页 |
| ·N 端与 M 段的表达情况 | 第51-53页 |
| 第四章 蛋鸡 wdr72 基因表达特征 | 第53-71页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·实验试剂与耗材 | 第53页 |
| ·实验仪器 | 第53页 |
| ·实验物品处理 | 第53页 |
| ·实验过程 | 第53-56页 |
| ·蛋鸡准备 | 第53-54页 |
| ·RNA 提取 | 第54页 |
| ·反转录 | 第54-55页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-67页 |
| ·组织采集情况 | 第56-58页 |
| ·RNA 提取 | 第58-59页 |
| ·Realtime PCR 结果的准确性 | 第59-61页 |
| ·wdr72 时空表达分析 | 第61-67页 |
| ·讨论 | 第67-71页 |
| ·避免基因组 DNA 污染 | 第67-68页 |
| ·内参基因 | 第68页 |
| ·荧光定量 PCR 与普通 PCR 方法的比较 | 第68页 |
| ·采样准确度 | 第68-69页 |
| ·wdr72 基因对蛋壳品质的影响 | 第69页 |
| ·wdr72 组织表达差异 | 第69页 |
| ·wdr72 的时空表达分析 | 第69页 |
| ·wdr72 功能分析 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 附录 | 第76-77页 |
| 个人简介 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |