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白桦热激反应的分子生态学研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-7页
1 前言第7-21页
 1.1 白桦的地理分布及国内外白桦分子生态学研究现状第7-8页
 1.2 热激反应中的热激蛋白及热激蛋白基因第8-16页
  1.2.1 热激蛋白及热激蛋白基因的种类第8页
  1.2.2 热激蛋白的特性第8-9页
  1.2.3 植物中热激蛋白及热激蛋白基因的表达第9-12页
  1.2.4 植物小分子量热激蛋白(sHSP)第12-14页
  1.2.5 热激蛋白在生态适应和进化中的作用及研究进展第14-16页
 1.3 真核生物mRNA差异显示技术(Differential Display)的研究进展第16-20页
  1.3.1 mRNA差异显示PCR技术的原理第16-17页
  1.3.2 mRNA差异显示PCR技术的应用第17-18页
  1.3.3 mRNA差异显示PCR技术的改进第18-20页
 1.4 研究目的和意义第20-21页
2 热激处理对白桦温度适应的影响第21-30页
 2.1 实验材料第21页
 2.2 实验设计第21-22页
  2.2.1 不同温度的热激处理第21-22页
  2.2.2 不同温度的热激处理对白桦幼苗耐冷性的影响第22页
  2.2.3 高温预处理对白桦幼苗耐热性的影响第22页
 2.3 研究内容第22-23页
  2.3.1 膜相对透性的测定第22页
  2.3.2 丙二醛含量的测定第22-23页
 2.4 实验结果第23-27页
  2.4.1 不同高温条件下白桦叶片质膜透性的变化第23-24页
  2.4.2 不同温度预处理对白桦幼苗耐冷性的影响第24-26页
  2.4.3 高温预处理对白桦幼苗耐热性的影响第26-27页
 2.5 讨论第27-30页
3 mRNA差异显示技术在白桦热激反应中的应用第30-58页
 3.1 实验材料第30-31页
  3.1.1 白桦组织来源第30页
  3.1.2 仪器与试剂第30-31页
  3.1.3 备用溶液配制第31页
 3.2 实验方法第31-38页
  3.2.1 白桦叶片组织总RNA的提取第31-32页
  3.2.2 白桦叶片组织总RNA的纯化第32-33页
  3.2.3 白桦mRNA差异显示PCR(DD-RT PCR)实验体系的建立第33-35页
  3.2.4 利用5'特异性引物进行的白桦mRNA差异显示PCR第35-36页
  3.2.5 非变性聚丙烯酰胺凝胶分离差异片段第36页
  3.2.6 差异片段的回收第36页
  3.2.7 回收片段的克隆第36-38页
  3.2.8 克隆片段的序列测定分析第38页
  3.2.9 差异片段碱基序列与GenBank序列同源性比较第38页
 3.3 结果和讨论第38-58页
  3.3.1 几种白桦叶片组织总RNA提取方法的比较第38-40页
  3.3.2 白桦mRNA差异显示PCR(DD-RT PCR)实验体系的建立第40-43页
  3.3.3 正常白桦叶片组织与热激白桦叶片组织基因表达差异图谱第43-50页
  3.3.4 利用5'端特异性引物展示正常和热激白桦叶片组织基因表达差异图谱第50-51页
  3.3.5 回收片段的PCR扩增结果第51页
  3.3.6 克隆质粒PCR鉴定结果第51-52页
  3.3.7 克隆片段的序列分析结果第52-57页
  3.3.8 差异片段核苷酸序列与GenBank数据库同源性比较结果第57-58页
4 讨论第58-63页
 4.1 最佳白桦热激反应体系的建立第58-59页
 4.2 高温预处理对白桦耐冷性的影响第59页
 4.3 影响DD-RT PCR技术的几个关键问题第59-61页
  4.3.1 RNA的质和量第60页
  4.3.2 cDNA第一链合成的锚定引物第60页
  4.3.3 假阳性差异第60页
  4.3.4 差异片段回收中存在的问题第60-61页
 4.4 有关聚丙烯酰胺凝胶银染技术在分子生物学中应用的建议第61-63页
5 结论第63-64页
参考文献第64-74页
致谢第74页

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