| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| 缩略词表(Abbreviations) | 第9-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-35页 |
| 1.真核基因的转录调控模式 | 第13-15页 |
| ·基因调控的基本模式 | 第13页 |
| ·基因活化 | 第13-14页 |
| ·核心启动子的结构 | 第14-15页 |
| 2.植物启动子的研究进展 | 第15-23页 |
| ·应用于植物的启动子类型 | 第16-17页 |
| ·诱导型启动子 | 第17-19页 |
| ·特异性启动子 | 第19-23页 |
| 3.果实特异性启动子 | 第23-26页 |
| ·番茄PG启动子 | 第24页 |
| ·番茄2A11启动子 | 第24-25页 |
| ·番茄E4/E8启动子 | 第25页 |
| ·番茄ACO1启动子 | 第25-26页 |
| ·甜瓜cucumisin启动子 | 第26页 |
| 4.特异性相关元件的研究 | 第26-27页 |
| 5 果实特异性启动子的应用 | 第27-29页 |
| ·改善果实品质 | 第27-28页 |
| ·生产目的蛋白 | 第28页 |
| ·改良果实农艺性状 | 第28-29页 |
| 6.植物转录因子 | 第29-31页 |
| 7.果实特异性启动子及其机理研究的意义 | 第31-32页 |
| 8.AGPase的研究进展 | 第32-34页 |
| 9.研究内容及技术路线 | 第34-35页 |
| 第2章 西瓜AGPL1启动子转录起始点的定位 | 第35-43页 |
| 1.材料与方法 | 第35-36页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·TRIZOL一步法提取总RNA | 第35页 |
| ·mRNA的分离 | 第35-36页 |
| ·引物和DNA marker标记 | 第36页 |
| ·引物延伸反应 | 第36页 |
| 2.结果 | 第36-37页 |
| 3.讨论 | 第37-43页 |
| 第3章 GFP/RFP双荧光指示载体的构建与应用 | 第43-51页 |
| 1.材料方法 | 第43-44页 |
| ·质粒载体与菌株 | 第43页 |
| ·试剂与修饰酶 | 第43页 |
| ·pBI221-RFP/GFP双荧光瞬时表达载体的构建 | 第43页 |
| ·含CaMV 35S最小功能启动子RFP/GFP瞬时表达载体的构建 | 第43页 |
| ·瞬时表达载体的功能验证 | 第43-44页 |
| ·荧光显微成像 | 第44页 |
| 2.结果 | 第44-49页 |
| ·构建RFP/GFP双荧光瞬时表达载体 | 第44-46页 |
| ·pBI221-RFP/GFP载体的功能检测 | 第46-47页 |
| ·pTobi-RFP/GFP瞬时表达载体的构建及功能检测 | 第47-49页 |
| 3.讨论 | 第49-51页 |
| 第4章 AGPL1启动子在西瓜果实中的表达调控 | 第51-63页 |
| 1.材料与方法 | 第51-52页 |
| ·植物材料 | 第51页 |
| ·质粒载体与菌株 | 第51页 |
| ·瞬时表达载体的构建 | 第51-52页 |
| ·质粒DNA提取及基因枪介导的瞬时转化 | 第52页 |
| ·GUS活性分析 | 第52页 |
| 2.结果分析 | 第52-61页 |
| ·不同长度AGPL1启动子5`端缺失突变的构建 | 第52-54页 |
| ·AGPL1启动子3`端内含子缺失突变瞬时表达载体的构建 | 第54-56页 |
| ·AGPL1启动子5`端缺失突变对启动子功能影响的分析 | 第56-57页 |
| ·内含子对基因表达增强作用的分析 | 第57页 |
| ·不同区段启动子在转基因番茄中的功能研究 | 第57-61页 |
| 3.讨论 | 第61-63页 |
| 第5章 AGPL1启动子中特异性元件的分离 | 第63-80页 |
| 1.材料与方法 | 第63-65页 |
| ·植物材料 | 第63页 |
| ·质粒载体与菌株 | 第63页 |
| ·瞬时表达载体的构建 | 第63-64页 |
| ·推测功能元件与瞬时表达载体融合 | 第64-65页 |
| ·质粒DNA提取及基因枪介导的瞬时转化 | 第65页 |
| ·荧光显微成像 | 第65页 |
| 2.结果 | 第65-77页 |
| ·AGPL1启动子5`-端和3`-端缺失突变瞬时表达载体的构建 | 第65-66页 |
| ·AGPL1启动子不同缺失突变载体荧光活性分析 | 第66-69页 |
| ·AGPL1启动子内部缺失突变瞬时表达载体的构建 | 第69-71页 |
| ·AGPL1启动子精细突变瞬时表达载体的构建 | 第71页 |
| ·AGPL1启动子内部缺失和精细突变的荧光活性分析 | 第71-74页 |
| ·瞬时表达推测元件的功能分析 | 第74-77页 |
| 3.讨论 | 第77-80页 |
| 第6章 DNA凝胶迁移率变动分析 | 第80-96页 |
| 1.材料与方法 | 第80-83页 |
| ·植物材料 | 第80页 |
| ·试剂 | 第80-82页 |
| ·核蛋白的提取 | 第82页 |
| ·探针标记 | 第82页 |
| ·凝胶迁移率分析(EMSA) | 第82-83页 |
| ·半干式电转膜 | 第83页 |
| ·固相化核酸的检测 | 第83页 |
| 2.结果与分析 | 第83-93页 |
| ·探针标记与显色效率检测 | 第83-84页 |
| ·叶片核蛋白EMSA分析 | 第84-86页 |
| ·PN1探针碱基缺失突变与核蛋白结合EMSA检测 | 第86-88页 |
| ·PN1探针中单碱基突变与核蛋白结合EMSA检测 | 第88-91页 |
| ·PN2探针中TC/TCAAAA元件与核蛋白结合EMSA检测 | 第91-92页 |
| ·PN1探针与PN2、PP1、PP2元件的竞争性结合 | 第92页 |
| ·包含cis元件的PN1与不同植物来源核蛋白的结合 | 第92-93页 |
| 3.讨论 | 第93-96页 |
| 第7章 AGPL1启动子在提高番茄果实中番茄红素含量的应用 | 第96-101页 |
| 1.材料与方法 | 第96-97页 |
| ·材料与菌种 | 第96页 |
| ·实验方法 | 第96-97页 |
| 2.结果 | 第97-99页 |
| ·植物表达载体构建和遗传转化 | 第97页 |
| ·转基因植株的检测 | 第97-99页 |
| ·转化果实中番茄红素的含量测定 | 第99页 |
| 3.讨论 | 第99-101页 |
| 第8章 结论 | 第101-103页 |
| 1.西瓜AGPL1启动子是果实特异性启动子 | 第101页 |
| 2.PN1和PN2是AGPL1启动子特异调控的关键区段 | 第101页 |
| 3.西瓜AGPL1启动子中cis元件TC/TCAAAA | 第101-102页 |
| 4.西瓜AGPL1启动子能实现外源基因在番茄果实中的特异表达 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-114页 |
| Abstracts | 第114-115页 |
