| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| ·THAP 家族蛋白质研究进展 | 第11-15页 |
| ·THAP 结构域特征 | 第11-12页 |
| ·果蝇和线虫THAP 家族蛋白质功能研究 | 第12-13页 |
| ·人THAP 家族蛋白质功能研究进展 | 第13-15页 |
| ·PCBP1 研究进展 | 第15-18页 |
| ·PCBP1 结构特征 | 第15页 |
| ·PCBP1 生物学功能 | 第15-18页 |
| ·在转录水平上参与基因表达调控 | 第15-16页 |
| ·参与mRNA 加工 | 第16页 |
| ·稳定mRNA | 第16-17页 |
| ·在翻译水平上参与基因表达调控 | 第17-18页 |
| ·对本论文的研究启示 | 第18-19页 |
| 第二章 THAP11与PCBP1相互作用区域的确定 | 第19-30页 |
| ·材料与方法 | 第19-25页 |
| ·材料 | 第19-22页 |
| ·菌株和细胞株 | 第19页 |
| ·质粒载体 | 第19页 |
| ·引物 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·细菌培养基配制 | 第20页 |
| ·细胞培养相关溶液配制 | 第20页 |
| ·Western-blot 相关试剂 | 第20-21页 |
| ·细胞总蛋白提取相关溶液 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·研究方法 | 第22-25页 |
| ·THAP11 与PCBP1 缺失体的构建 | 第22页 |
| ·回收、酶切 | 第22页 |
| ·连接 | 第22页 |
| ·转化 | 第22页 |
| ·菌落PCR | 第22-23页 |
| ·质粒提取 | 第23页 |
| ·细胞转染(Vigorous 公司) | 第23-24页 |
| ·细胞总蛋白提取 | 第24页 |
| ·免疫共沉淀(co-immuno precipitatition ,Co-IP) | 第24-25页 |
| ·Western Blot | 第25页 |
| ·实验结果 | 第25-27页 |
| ·THAP11 及PCBP1 缺失体构建 | 第25-26页 |
| ·THAP11/PCBP1 相互作用结构区域的确定 | 第26-27页 |
| ·讨论 | 第27-30页 |
| 第三章 THAP11/PCBP1相互作用抑制CD44mRNA可变剪接 | 第30-55页 |
| ·实验材料与方法 | 第31-35页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·细胞和质粒 | 第31页 |
| ·实验仪器 | 第31页 |
| ·其他材料 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-35页 |
| ·荧光素酶报道基因检测 | 第31-32页 |
| ·RNA 的提取 | 第32页 |
| ·RT-PCR | 第32-33页 |
| ·荧光定量PCR 技术 | 第33页 |
| ·细胞侵袭实验 | 第33-34页 |
| ·RNAi 技术 | 第34-35页 |
| ·实验结果 | 第35-50页 |
| ·THAP11/PCBP1 可以抑制细胞内源CD44v 的剪接水平 | 第35-38页 |
| ·THAP11/PCBP1 下调CD44 v5 inclusion | 第38-41页 |
| ·THAP11 的外显子剪接特异性依赖于PCBP1 | 第41-43页 |
| ·THAP11/PCBP1 下调Ras 对CD44 v5 inclusion 的激活 | 第43-45页 |
| ·THAP11 可以抑制肿瘤细胞侵袭 | 第45-48页 |
| ·THAP11 与CD44v6 表达相关性 | 第48-50页 |
| ·讨论与分析 | 第50-55页 |
| 第四章 THAP11/PCBP1可以抑制NF-κB的转录活性 | 第55-64页 |
| ·实验材料与方法 | 第55-58页 |
| ·实验材料 | 第55页 |
| ·EMSA(Electrophoretic Mobility Shift Assay 凝胶迁移实验) | 第55-58页 |
| ·核蛋白的提取 | 第55-56页 |
| ·EMSA 胶的配制 | 第56页 |
| ·探针标记 | 第56页 |
| ·探针与核蛋白结合 | 第56-57页 |
| ·电泳分析 | 第57-58页 |
| ·实验结果 | 第58-61页 |
| ·THAP11/PCBP1 抑制NF-κB 的转录活性 | 第58-59页 |
| ·THAP11/PCBP1 选择性抑制NF-κB 下游基因IL-6 启动子的活性 | 第59页 |
| ·THAP11/PCBP1 对NF-κB 的DNA 结合活性无影响 | 第59-60页 |
| ·THAP11/PCBP1 可能通过不同的途径来抑制NF-κB 的转录活性 | 第60-61页 |
| ·分析与讨论 | 第61-64页 |
| 第五章 研究总结与展望 | 第64-65页 |
| ·研究结论 | 第64页 |
| ·研究展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 参加科研情况说明 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 附录一 引物序列、名称 | 第74-75页 |
| 附录二 英文缩略语 | 第75页 |