在“组学”水平上富集锌指蛋白
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-18页 |
| ·蛋白质组学概述 | 第7-12页 |
| ·蛋白质组学发展背景 | 第7-8页 |
| ·蛋白质组学技术 | 第8-11页 |
| ·生物质谱技术 | 第8-9页 |
| ·二维凝胶电泳/基质辅助激光解析电离质谱联用技术 | 第9-10页 |
| ·液相色谱/电喷雾串联质谱联用技术 | 第10-11页 |
| ·蛋白质组学技术分析低丰度蛋白质的局限性 | 第11-12页 |
| ·二维凝胶电泳分析低丰度蛋白质的局限性 | 第11页 |
| ·液相色谱分析低丰度蛋白质的局限性 | 第11-12页 |
| ·锌指蛋白质概述 | 第12-16页 |
| ·锌指蛋白结构的发现 | 第12页 |
| ·锌指结构域分类 | 第12-13页 |
| ·C2H2 型锌指结构域的性质 | 第13-14页 |
| ·锌指蛋白质的功能 | 第14-16页 |
| ·“锌指工程”蛋白的发展及应用 | 第16页 |
| ·本课题的研究意义及研究内容 | 第16-18页 |
| ·本课题的研究意义 | 第16-17页 |
| ·本文的主要研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 锌指蛋白质富集方法 | 第18-27页 |
| ·锌指蛋白的结构特性 | 第18-19页 |
| ·锌指蛋白的三种富集方法 | 第19-27页 |
| ·“线”富集法 | 第19-24页 |
| ·“面”富集法 | 第24-26页 |
| ·“空间”富集法 | 第26-27页 |
| 第三章 “线”富集实验方法 | 第27-31页 |
| ·化学试剂 | 第27页 |
| ·“线”富集法的实验方法 | 第27-31页 |
| ·Sp1-3 模式肽段的合成及处理 | 第27页 |
| ·合成Zn-Sp1-3 锌指肽段的螯合反应 | 第27页 |
| ·基质辅助激光解析/离子化飞行时间质谱检测方法 | 第27-28页 |
| ·碘乙酰胺烷化含自由半胱氨酸肽段的实验方法 | 第28页 |
| ·pH值对合成锌指肽段的影响 | 第28页 |
| ·锌指结构保护半胱氨酸的实验方法 | 第28页 |
| ·胰酶酶切BSA | 第28-29页 |
| ·复杂体系中锌指结构对半胱氨酸的保护能力 | 第29页 |
| ·“线”富集法捕获锌指肽段 | 第29页 |
| ·巯基亲和柱捕获含自由半胱氨酸的肽段 | 第29-31页 |
| 第四章 锌指蛋白富集法实验结果及讨论 | 第31-52页 |
| ·合成 Zn-Sp1-3 锌指肽段 | 第31-33页 |
| ·Sp1-3 模式肽段的处理 | 第31-32页 |
| ·合成Zn-Sp1-3 锌指肽段的螯合反应 | 第32-33页 |
| ·锌指结构稳定性影响因素的条件优化 | 第33-41页 |
| ·缓冲液类型的影响 | 第33-35页 |
| ·pH值对锌指结构的影响 | 第35-39页 |
| ·DTT浓度对合成锌指肽段的影响 | 第39-41页 |
| ·锌指结构对半胱氨酸的保护能力 | 第41-50页 |
| ·锌指结构和非锌指结构对半胱氨酸的保护能力 | 第41-44页 |
| ·复杂体系中锌指结构对半胱氨酸的保护能力 | 第44-50页 |
| ·“线”富集法捕获简单体系中的锌指肽段 | 第50页 |
| ·实验总结 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 附录 | 第54-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
