摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-29页 |
·包含体 (Inclusion Body) 蛋白的形成和提取 | 第9-13页 |
·包含体蛋白的产生及理化性质 | 第9-10页 |
·包含体蛋白的分离纯化 | 第10-12页 |
·包含体蛋白的溶解变性 | 第12-13页 |
·包含体蛋白质的体外复性 | 第13-22页 |
·体外复性难点及策略 | 第13-14页 |
·传统的复性方法 | 第14页 |
·稀释添加复性 | 第14-15页 |
·分子伴侣与人工伴侣辅助复性 | 第15-17页 |
·色谱辅助复性 | 第17-19页 |
·金属螯合色谱辅助复性 | 第19-22页 |
·蛋白质复性研究中的一些检测手段 | 第22-24页 |
·荧光光谱法 | 第22-23页 |
·圆二色光谱法 | 第23-24页 |
·其他方法 | 第24页 |
·增强型绿色荧光蛋白 | 第24-27页 |
·绿色荧光蛋白简介 | 第24-26页 |
·增强型绿色荧光蛋白(EGFP)简介 | 第26页 |
·增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的研究现状 | 第26-27页 |
·本文的主要研究内容和预期 | 第27-29页 |
第二章 金属螯合色谱耦合人工伴侣辅助复性 | 第29-60页 |
·实验材料和设备 | 第29-31页 |
·实验材料 | 第29-30页 |
·实验设备 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-39页 |
·包含体蛋白质的表达及纯化 | 第31-32页 |
·SDS-丙稀酰胺凝胶电泳检测表达产物 | 第32-34页 |
·蛋白质含量的测定 | 第34-35页 |
·6×his-EGFP 包含体蛋白质的变性溶解 | 第35页 |
·6×his-EGFP 的定性检测及荧光复性收率的计算 | 第35-37页 |
·EGFP 包含体蛋白质的稀释复性 | 第37页 |
·人工伴侣辅助 EGFP 包含体蛋白质的复性 | 第37页 |
·金属螯合色谱辅助 EGFP 包含体蛋白质的复性 | 第37-38页 |
·耦合辅助 EGFP 包含体蛋白质复性 | 第38-39页 |
·实验结果及讨论 | 第39-58页 |
·EGFP 包含体蛋白质的提取及变性溶解 | 第39-40页 |
·EGFP 活性蛋白的制备及性质鉴定 | 第40-43页 |
·EGFP 蛋白质标准曲线的绘制 | 第43-44页 |
·EGFP 包含体蛋白的稀释复性 | 第44-45页 |
·人工伴侣辅助 EGFP 包含体蛋白复性 | 第45-47页 |
·金属螯合色谱辅助 EGFP 包含体蛋白质复性 | 第47-53页 |
·金属螯合色谱耦合人工伴侣辅助 EGFP 包含体蛋白复性 | 第53-57页 |
·四种不同的复性方法的比较 | 第57-58页 |
·本章小结 | 第58-60页 |
第三章 耦合辅助复性条件优化 | 第60-78页 |
·实验材料和设备 | 第60-62页 |
·实验材料 | 第60-61页 |
·实验设备 | 第61-62页 |
·实验方法 | 第62-64页 |
·EGFP 包含体蛋白质的变性溶解 | 第62-63页 |
·金属螯合色谱耦合人工伴侣辅助复性 | 第63页 |
·EGFP 蛋白的定性检测及荧光复性收率的计算 | 第63页 |
·圆二色光谱分析 | 第63页 |
·体积排阻色谱分析 | 第63-64页 |
·实验结果及讨论 | 第64-76页 |
·各种影响因素的优化 | 第64-71页 |
·复性产物的结构分析 | 第71-76页 |
·本章小结 | 第76-78页 |
第四章 结论与展望 | 第78-80页 |
·结论 | 第78-79页 |
·展望 | 第79-80页 |
附录 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-87页 |
致谢 | 第87页 |