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金属螯合色谱耦合人工伴侣辅助EGFP包含体蛋白质复性

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
第一章 文献综述第9-29页
   ·包含体 (Inclusion Body) 蛋白的形成和提取第9-13页
     ·包含体蛋白的产生及理化性质第9-10页
     ·包含体蛋白的分离纯化第10-12页
     ·包含体蛋白的溶解变性第12-13页
   ·包含体蛋白质的体外复性第13-22页
     ·体外复性难点及策略第13-14页
     ·传统的复性方法第14页
     ·稀释添加复性第14-15页
     ·分子伴侣与人工伴侣辅助复性第15-17页
     ·色谱辅助复性第17-19页
     ·金属螯合色谱辅助复性第19-22页
   ·蛋白质复性研究中的一些检测手段第22-24页
     ·荧光光谱法第22-23页
     ·圆二色光谱法第23-24页
     ·其他方法第24页
   ·增强型绿色荧光蛋白第24-27页
     ·绿色荧光蛋白简介第24-26页
     ·增强型绿色荧光蛋白(EGFP)简介第26页
     ·增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的研究现状第26-27页
   ·本文的主要研究内容和预期第27-29页
第二章 金属螯合色谱耦合人工伴侣辅助复性第29-60页
   ·实验材料和设备第29-31页
     ·实验材料第29-30页
     ·实验设备第30-31页
   ·实验方法第31-39页
     ·包含体蛋白质的表达及纯化第31-32页
     ·SDS-丙稀酰胺凝胶电泳检测表达产物第32-34页
     ·蛋白质含量的测定第34-35页
     ·6×his-EGFP 包含体蛋白质的变性溶解第35页
     ·6×his-EGFP 的定性检测及荧光复性收率的计算第35-37页
     ·EGFP 包含体蛋白质的稀释复性第37页
     ·人工伴侣辅助 EGFP 包含体蛋白质的复性第37页
     ·金属螯合色谱辅助 EGFP 包含体蛋白质的复性第37-38页
     ·耦合辅助 EGFP 包含体蛋白质复性第38-39页
   ·实验结果及讨论第39-58页
     ·EGFP 包含体蛋白质的提取及变性溶解第39-40页
     ·EGFP 活性蛋白的制备及性质鉴定第40-43页
     ·EGFP 蛋白质标准曲线的绘制第43-44页
     ·EGFP 包含体蛋白的稀释复性第44-45页
     ·人工伴侣辅助 EGFP 包含体蛋白复性第45-47页
     ·金属螯合色谱辅助 EGFP 包含体蛋白质复性第47-53页
     ·金属螯合色谱耦合人工伴侣辅助 EGFP 包含体蛋白复性第53-57页
     ·四种不同的复性方法的比较第57-58页
   ·本章小结第58-60页
第三章 耦合辅助复性条件优化第60-78页
   ·实验材料和设备第60-62页
     ·实验材料第60-61页
     ·实验设备第61-62页
   ·实验方法第62-64页
     ·EGFP 包含体蛋白质的变性溶解第62-63页
     ·金属螯合色谱耦合人工伴侣辅助复性第63页
     ·EGFP 蛋白的定性检测及荧光复性收率的计算第63页
     ·圆二色光谱分析第63页
     ·体积排阻色谱分析第63-64页
   ·实验结果及讨论第64-76页
     ·各种影响因素的优化第64-71页
     ·复性产物的结构分析第71-76页
   ·本章小结第76-78页
第四章 结论与展望第78-80页
   ·结论第78-79页
   ·展望第79-80页
附录第80-82页
参考文献第82-87页
致谢第87页

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