| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 缩写词英汉对照 | 第7-11页 |
| 1 绪论 | 第11-25页 |
| ·研究背景 | 第11-15页 |
| ·菊花基因工程技术的研究 | 第11-12页 |
| ·植物成花转变的研究 | 第12-15页 |
| ·成花转变过程中组织细胞学变化 | 第13-14页 |
| ·成花转变的分子机理研究 | 第14-15页 |
| ·成花转变的基因研究进展 | 第15-20页 |
| ·成花转变过程中相关基因的功能研究 | 第15-17页 |
| ·LFY及其同源基因在成花转变中的作用 | 第17-20页 |
| ·问题与展望 | 第20-21页 |
| ·本研究的设计思路 | 第21-25页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第21-23页 |
| ·研究内容及研究方案 | 第23-25页 |
| ·研究内容 | 第23-24页 |
| ·研究方案 | 第24-25页 |
| 2 植物表达载体pBI121-CaMV35S-Sense DFL和pBI121-CaMV35S-Antisense DFL的构建 | 第25-39页 |
| ·材料与方法 | 第25-32页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·酶及生物试剂 | 第25页 |
| ·培养基及常用缓冲液 | 第25-26页 |
| ·PCR引物 | 第26页 |
| ·试验方法 | 第26-32页 |
| ·植物表达载体构建策略 | 第26-27页 |
| ·试验体系 | 第27-29页 |
| ·CaCl_2法制备大肠杆菌感受态 | 第29-30页 |
| ·DNA目的片段回收纯化 | 第30页 |
| ·连接、转化及阳性克隆鉴定 | 第30-31页 |
| ·质粒DNA提取及酶切鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的连接、转化及鉴定 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-36页 |
| ·目的基因限制性酶切位点分析 | 第32-33页 |
| ·T-DFL和T-ADFL的获得 | 第33-35页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·讨论与小结 | 第36-39页 |
| ·小结 | 第36页 |
| ·表达载体与目的片段连接转化效率对载体构建的影响 | 第36-39页 |
| 3 菊花离体再生体系的建立 | 第39-49页 |
| ·材料和方法 | 第39-40页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·生物试剂 | 第39页 |
| ·培养基及培养条件 | 第39-40页 |
| ·试验方法 | 第40页 |
| ·菊花品种组培体系的建立 | 第40页 |
| ·不定芽的分化 | 第40页 |
| ·生根 | 第40页 |
| ·移栽 | 第40页 |
| ·数据统计与分析 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-46页 |
| ·菊花品种组培体系的建立 | 第40-42页 |
| ·不定芽的分化 | 第42-44页 |
| ·不定芽的形成 | 第42页 |
| ·不同的激素浓度配比组合对‘小林静'叶片分化的影响 | 第42-44页 |
| ·不同的激素浓度配比组合对‘棕红针'叶片分化的影响 | 第44页 |
| ·不同浓度的NAA对不定芽生根的影响 | 第44-45页 |
| ·移栽 | 第45-46页 |
| ·讨论与小结 | 第46-49页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| ·褐化现象对初代培养的影响 | 第47-49页 |
| 4 DFL基因转化菊花的研究 | 第49-63页 |
| ·材料与方法 | 第49-53页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·植物材料 | 第49页 |
| ·根癌农杆菌菌株和载体 | 第49页 |
| ·培养基及添加成分 | 第49页 |
| ·分子生物学试剂及缓冲液试剂的配制 | 第49页 |
| ·试验方法 | 第49-53页 |
| ·卡那霉素抗性选择压的确定 | 第49页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第49-50页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第50页 |
| ·农杆菌介导的叶盘法转化菊花程序 | 第50-51页 |
| ·农杆菌侵染时间的确定 | 第51页 |
| ·菊花植物基因组DNA少量提取 | 第51-52页 |
| ·转DFL基因菊花的PCR检测 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-60页 |
| ·卡那霉素抗性选择压的确定 | 第53-54页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌的鉴定 | 第54-55页 |
| ·农杆菌介导的叶盘法转化菊花 | 第55-57页 |
| ·农杆菌侵染时间的确定 | 第55-57页 |
| ·‘小林静'遗传转化体系的确立 | 第57-58页 |
| ·菊花卡那霉素抗性苗的获得 | 第58-59页 |
| ·转DFL基因植株的PCR检测 | 第59-60页 |
| ·讨论与小结 | 第60-63页 |
| ·小结 | 第60页 |
| ·抗生素在遗传转化中对菊花的影响 | 第60-61页 |
| ·农杆菌浓度、侵染时间、共培养时间与T-DNA的关系 | 第61-62页 |
| ·菊花遗传转化效率较低的原因 | 第62-63页 |
| 5 总结与讨论 | 第63-67页 |
| ·总结 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-67页 |
| ·下一步工作 | 第64页 |
| ·展望 | 第64-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 附录 | 第73-77页 |
| 个人简介 | 第77-79页 |
| 导师简介 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
