| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一章 植物抗病分子机制研究进展 | 第14-24页 |
| 1 植物抗病因子 | 第14-17页 |
| ·结构因子 | 第14-16页 |
| ·蜡质 | 第14-15页 |
| ·胼胝质(callose) | 第15页 |
| ·木质素(lignin) | 第15-16页 |
| ·生化因子 | 第16-17页 |
| ·植保素(phytoalexins,PA) | 第16页 |
| ·活性氧(active oxygen) | 第16-17页 |
| ·水杨酸(salicylic acid,SA) | 第17页 |
| 2 植物抗病基因 | 第17-19页 |
| ·抗病基因的克隆 | 第17-18页 |
| ·抗病基因的特性 | 第18-19页 |
| 3 植物抗病性的分子机制 | 第19-20页 |
| ·与病原体非亲和因子有关的抗病机制 | 第19-20页 |
| ·与病原体亲和因子有关的植物抗病性机制 | 第20页 |
| 4 信号传导 | 第20-23页 |
| ·信号传导的作用机理 | 第20-22页 |
| ·抗病信号途径 | 第22-23页 |
| ·水杨酸(salicylic acid,SA)介导的抗病信号途径 | 第22页 |
| ·茉莉酸(jasmonic acid,JA)和乙烯(ethylene,ET)介导的抗病信号转导途径 | 第22-23页 |
| 5 展望 | 第23-24页 |
| 第二章 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白研究进展 | 第24-30页 |
| 1 PGIP的特点 | 第24-26页 |
| 2 PGIP的生物学功能及作用机理 | 第26-27页 |
| 3 PGIP基因及其表达 | 第27-29页 |
| ·多数植物PGIP基因表达蛋白特有的保守序列 | 第27-28页 |
| ·PGIP基因多以基因家族的形式存在 | 第28页 |
| ·PGIP基因表达方式多样性 | 第28-29页 |
| 4 PGIP在基因工程中的应用 | 第29页 |
| 5 展望 | 第29-30页 |
| 第三章 葡萄砧木PGIP基因的克隆及生物信息学分析 | 第30-46页 |
| 1 材料与方法 | 第30-34页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-34页 |
| ·基因组DNA的提取和检测 | 第31页 |
| ·PGIP基因引物的设计 | 第31-32页 |
| ·PGIP基因的PCR反应体系及条件 | 第32页 |
| ·PGIP基因PCR产物的回收、纯化、连接、转化与测序 | 第32-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-44页 |
| ·‘5BB’、‘1202’和‘Beta’PGIP基因的克隆与测序 | 第34页 |
| ·‘5BB’、‘1202’和‘Beta’PGIP基因的序列分析 | 第34-38页 |
| ·‘5BB’PGIP基因序列分析 | 第34-35页 |
| ·‘1202’PG/P基因序列分析 | 第35-37页 |
| ·‘Beta’PG/P基因序列分析 | 第37-38页 |
| ·‘5BB’、‘1202’和‘Beta’PGIP基因序列的比较 | 第38-41页 |
| ·‘5BB’、‘1202’和‘Beta’PGIP的疏水性/亲水性和信号肽分析 | 第41-42页 |
| ·‘5BB'、‘1202’和‘Beta’PGIP疏水性和亲水性分析 | 第41-42页 |
| ·‘5BB’、‘1202’和‘Beta’PGIP的信号肽分析 | 第42页 |
| ·‘5BB’、‘1202’和‘Beta’PGIP的三级结构分析 | 第42-43页 |
| ·‘5BB’、‘1202’和‘Beta’PGIP基因的聚类分析 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 农杆菌介导葡萄砧木‘5BB’PGIP基因转化烟草 | 第46-60页 |
| 1 材料和方法 | 第47-54页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·植物材料和试剂 | 第47页 |
| ·菌种和质粒 | 第47页 |
| ·烟草组织培养基 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-54页 |
| ·‘5BB’PGIP基因的PCR扩增 | 第47-48页 |
| ·含有‘5BB’PGIP目的基因的植物表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·构建好的植物表达载体转化农杆菌LBA4404 | 第49页 |
| ·烟草叶盘法遗传转化 | 第49-50页 |
| ·转基因烟草的检测 | 第50-53页 |
| ·SOD和CAT酶活性的测定 | 第53-54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-58页 |
| ·‘5BB’PGIP基因的PCR扩增 | 第54页 |
| ·含有‘5BB’PGIP目的基因的植物表达载体的构建 | 第54-55页 |
| ·Km抗性苗的获得 | 第55页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第55-58页 |
| ·转基因烟草PCR检测 | 第55-56页 |
| ·转基因烟草植株RT-PCR检测 | 第56页 |
| ·转基因烟草植株RT-PCR产物的测序 | 第56-58页 |
| ·转基因对烟草SOD和CAT酶活性的影响 | 第58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 全文结论 | 第60-61页 |
| 创新点 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附录 | 第69-85页 |
| 附录1:本论文中所用缓冲液及溶液的配置 | 第70-72页 |
| 附录2:本论文中所用培养基的配置 | 第72-74页 |
| 附录3:本论文中所用感受态CCM80的制备 | 第74-76页 |
| 附录4:本论文中农杆菌LBA4404感受态的制备及转化 | 第76-77页 |
| 附录5:本论文中登录的序列以及构建的载体序列 | 第77-84页 |
| 附图 | 第84-85页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
