| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Summary | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-31页 |
| 一 奶牛性别控制技术的研究进展 | 第10-14页 |
| ·流式细胞仪分离精子的原理 | 第10-11页 |
| ·性控精液在畜牧生产中的的应用 | 第11-12页 |
| ·流式细胞仪精子分离技术存在的问题 | 第12-13页 |
| 讨论 | 第13-14页 |
| 二 雄性特异性肌肉肥大转基因小鼠的制备详解 | 第14-17页 |
| ·雄性特异性肌肉肥大转基因小鼠的制备 | 第14-16页 |
| 讨论 | 第16-17页 |
| 三 基因打靶技术在家畜中的研究进展 | 第17-21页 |
| ·基因敲除家畜制备方法的归纳 | 第17-18页 |
| ·基因打靶技术在家畜中的应用 | 第18-19页 |
| 讨论 | 第19-21页 |
| 四 GFP - 精子分型的理想标记 | 第21-24页 |
| ·G FP 的作用 | 第21-22页 |
| ·G FP 作为精子分离标记的论证 | 第22-23页 |
| 讨论 | 第23-24页 |
| 五 牛Y 染色体靶向位点的选取 | 第24-26页 |
| 六 牛Y 染色体基因打靶的技术路线及可行性分析 | 第26-31页 |
| ·牛 Y 染色体基因打靶方案详解 | 第26-28页 |
| ·GFP 作为标记时流式细胞仪分选精子的效果 | 第28-31页 |
| 第二部分 研究部分 | 第31-80页 |
| 第一章 牛胎儿成纤维细胞系的建立与体外培养 | 第31-39页 |
| ·材料 | 第31-34页 |
| ·方法 | 第34-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-39页 |
| 第二章 牛Y 染色体插入型打靶载体的构建 | 第39-55页 |
| 前言 | 第39-41页 |
| ·材料 | 第41-43页 |
| ·方法 | 第43-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-55页 |
| 第三章 pEGFP-loxP-Lox2272 载体的构建及牛胎儿转基因阳性细胞筛选程序的优化 | 第55-66页 |
| 前言 | 第55页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-63页 |
| 讨论 | 第63-66页 |
| 第四章 PPNTdloxp/usp9y 载体对牛胎儿成纤维细胞的转染 | 第66-72页 |
| ·材料 | 第66页 |
| ·方法 | 第66-69页 |
| ·实验结果与分析 | 第69-72页 |
| 第五章 牛Y 染色体基因打靶阳性细胞系的筛选和PCR 鉴定 | 第72-79页 |
| ·材料 | 第72页 |
| ·方法 | 第72-75页 |
| ·结果与讨论 | 第75-78页 |
| 讨论 | 第78-79页 |
| 第六章 小结 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 附录 | 第86-93页 |
| 附录1：牛Y 染色体特异性序列部分信息 | 第86-90页 |
| 附录2：p079 PPNT6 载体相关信息（Addgene） | 第90-91页 |
| 附录3：pEGFP-N3 载体相关信息 | 第91-92页 |
| 附录4：英文缩略表 | 第92-93页 |
| 作者简历 | 第93-94页 |
| 导师简介 | 第94页 |
