| 摘要 | 第1-5页 |
| Summary | 第5-9页 |
| 英文缩略表 | 第9-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-39页 |
| ·前言 | 第13-14页 |
| ·口蹄疫疫苗研究进展 | 第14-27页 |
| ·FMD 减毒活疫苗 | 第14-16页 |
| ·FMD 灭活疫苗 | 第16-18页 |
| ·基因工程亚单位疫苗 | 第18-19页 |
| ·类病毒颗粒 | 第19-20页 |
| ·转基因植物疫苗 | 第20-21页 |
| ·活载体疫苗 | 第21-22页 |
| ·DNA 疫苗 | 第22-23页 |
| ·合成肽苗 | 第23-24页 |
| ·FMDV 多表位疫苗 | 第24-26页 |
| ·多表位重组亚单位疫苗 | 第24-25页 |
| ·类病毒颗粒展示多表位疫苗 | 第25页 |
| ·以自身分子为载体蛋白的表位重组疫苗 | 第25-26页 |
| ·结语 | 第26-27页 |
| ·FMDV 抗原表位疫苗研究的分子基础 | 第27-30页 |
| ·抗口蹄疫病毒感染是 T 细胞依赖性免疫保护反应 | 第28页 |
| ·Th 细胞表位与宿主MHC-Ⅱ多态性限制 | 第28-29页 |
| ·“通用”Th 细胞表位 | 第29页 |
| ·Th1-CTL 细胞表位 | 第29-30页 |
| ·抗原表位疫苗研究策略 | 第30-39页 |
| ·免疫学基础 | 第30-31页 |
| ·抗原表位疫苗的设计原则和特点 | 第31页 |
| ·体液免疫或细胞免疫的设计考虑 | 第31页 |
| ·MHC 分子多态性限制的考虑 | 第31-32页 |
| ·B 细胞表位和T 细胞表位的筛选 | 第32-33页 |
| ·抗原表位疫苗设计与技术 | 第33-36页 |
| ·疫苗配伍设计 | 第36-39页 |
| 第二章 羊FMD 病毒Asia 1 型多表位疫苗的研制 | 第39-63页 |
| ·材料和方法 | 第39-51页 |
| ·毒株和实验动物 | 第39-40页 |
| ·表达载体和菌种 | 第40页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40页 |
| ·引物设计和合成 | 第40-41页 |
| ·多表位基因盒的设计及合成 | 第41-42页 |
| ·OIgGC 和 FMD 病毒 3D 基因的扩增 | 第42-43页 |
| ·OIgGC 和 FMD 病毒 3D 总 mRNA 提取 | 第42页 |
| ·OIgGC 的扩增 | 第42页 |
| ·FMD 病毒3D 基因的扩增 | 第42-43页 |
| ·pGEM-T-OIgGC 和 pGEM-T-3D 重组载体的构建 | 第43页 |
| ·重组表达质粒的构建、表达、鉴定及纯化 | 第43-48页 |
| ·pOIgGC、pRE-OIgGC 和p3D 重组表达质粒的构建 | 第43-46页 |
| ·pGST-RE 重组表达质粒的构建 | 第46页 |
| ·OIgGC、GST-RE、RE-OIgGC 和3D 重组蛋白的表达 | 第46页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第46-47页 |
| ·重组蛋白的Western blotting 分析 | 第47页 |
| ·重组蛋白OIgGC、GST-RE、RE-OIgGC 和3D 的表达形式分析 | 第47页 |
| ·重组蛋白OIgGC、GST-RE、RE-OIgGC 和3D 的大量表达及纯化 | 第47-48页 |
| ·重组抗原的免疫效力试验 | 第48-51页 |
| ·系列化多表位免疫原的制备 | 第48-49页 |
| ·豚鼠免疫效力试验 | 第49页 |
| ·病毒中和实验 | 第49页 |
| ·淋巴细胞增殖试验 | 第49-50页 |
| ·豚鼠攻毒保护试验 | 第50页 |
| ·羊免疫效力试验 | 第50-51页 |
| ·结果 | 第51-56页 |
| ·OIgGC 基因和FMD 病毒3D 基因的PCR 扩增 | 第51页 |
| ·pGEM-OIgGC 和pGEM-3D 的鉴定结果 | 第51-52页 |
| ·重组表达质粒的鉴定结果 | 第52-54页 |
| ·重组蛋白的表达、纯化与鉴定 | 第54-55页 |
| ·重组蛋白对豚鼠的免疫效力试验 | 第55-56页 |
| ·淋巴细胞增殖试验 | 第56页 |
| ·羊免疫效力试验 | 第56页 |
| ·讨论 | 第56-59页 |
| ·结论 | 第59-63页 |
| 第三章 猪口蹄疫病毒O 型多表位疫苗的研制 | 第63-83页 |
| ·材料和方法 | 第63-71页 |
| ·毒株 | 第63页 |
| ·实验动物 | 第63-64页 |
| ·表达载体和菌种 | 第64页 |
| ·主要试剂 | 第64页 |
| ·主要仪器设备 | 第64页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第64-67页 |
| ·引物设计和合成 | 第64-65页 |
| ·多表位基因的设计及合成 | 第65页 |
| ·SIgGC 基因的扩增 | 第65-66页 |
| ·FMD 病毒3D 基因的扩增 | 第66页 |
| ·重复串联多表位基因的扩增 | 第66页 |
| ·RE-SIgGC 基因的融合 | 第66-67页 |
| ·目的基因3F-SIgGC 的克隆及鉴定 | 第67页 |
| ·pRE-SIgGC 和 p3D 重组表达质粒的构建 | 第67-68页 |
| ·重组蛋白的表达及鉴定 | 第68页 |
| ·Western blotting 分析 | 第68页 |
| ·表达产物分析 | 第68-69页 |
| ·重组蛋白大量表达的纯化 | 第69页 |
| ·免疫原的制备 | 第69页 |
| ·候选疫苗的筛选 | 第69-71页 |
| ·候选疫苗免疫效力试验（50% swine protective dose，PD50） | 第70页 |
| ·最小有效免疫剂量的测定 | 第70页 |
| ·三批疫苗的免疫效力试验 | 第70-71页 |
| ·免疫效力持续期试验 | 第71页 |
| ·保存期试验 | 第71页 |
| ·结果 | 第71-80页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第71-72页 |
| ·载体蛋白SIgGC 基因和FMDV 3D 基因的PCR 扩增 | 第71-72页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第72页 |
| ·重组蛋白的纯化与鉴定 | 第72-73页 |
| ·候选疫苗筛选 | 第73-80页 |
| ·候选疫苗的免疫效力试验 | 第75-76页 |
| ·候选疫苗的最小免疫剂量测定 | 第76-77页 |
| ·候选疫苗对猪的PD50 测定 | 第77页 |
| ·三批疫苗免疫持续期免疫效力试验 | 第77-78页 |
| ·疫苗免疫持续期抗体消长动态 | 第78-79页 |
| ·疫苗保存期免疫效力试验 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80-81页 |
| ·总结 | 第81-83页 |
| 研究结 论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 作者简介 | 第100-102页 |
