| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-23页 |
| ·抗肿瘤药物研究的现状 | 第14-15页 |
| ·线粒体介导的细胞凋亡 | 第15-19页 |
| ·线粒体的功能 | 第15-16页 |
| ·线粒体外膜通透性与VDAC | 第16-17页 |
| ·VDAC在细胞凋亡中的重要作用 | 第17-19页 |
| ·积雪草酸抗肿瘤作用研究进展 | 第19-20页 |
| ·稀土及其配合物 | 第20-21页 |
| ·稀土配合物的作用 | 第20-21页 |
| ·镧系在肿瘤生物学上的作用 | 第21页 |
| ·研究细胞凋亡机制的模式生物——酵母 | 第21-23页 |
| 第二章 积雪草酸的体外抗肿瘤作用及其机制 | 第23-39页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·主要仪器与设备 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·实验动物 | 第25页 |
| ·细胞株 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-30页 |
| ·细胞培养 | 第26页 |
| ·MTT法测细胞活性 | 第26页 |
| ·MitoTracker染色检测线粒体数目 | 第26页 |
| ·JC-1染色测线粒体膜电位 | 第26-27页 |
| ·ATP检测试剂盒测定胞内ATP水平 | 第27页 |
| ·DCFH-DA探针法检测胞内ROS含量 | 第27-28页 |
| ·酶标仪法测Ca~(2+)诱导的线粒体肿胀度 | 第28页 |
| ·RT-PCR法检测VDAC转录水平 | 第28-29页 |
| ·Western blot法检测VDAC翻译水平 | 第29-30页 |
| ·统计分析 | 第30页 |
| ·实验结果 | 第30-37页 |
| ·AA抑制肿瘤细胞增殖 | 第30-32页 |
| ·AA对HepG2细胞线粒体数量的影响 | 第32-33页 |
| ·AA对HepG2细胞线粒体膜电位的影响 | 第33-34页 |
| ·AA对HepG2细胞线粒体功能的影响 | 第34-35页 |
| ·AA对HepG2细胞线粒体VDAC蛋白表达的影响 | 第35-36页 |
| ·AA直接作用于线粒体 | 第36-37页 |
| ·讨论与小结 | 第37-39页 |
| 第三章 积雪草酸—稀土配合物体外抗肿瘤作用的初步研究 | 第39-58页 |
| ·实验材料 | 第39-41页 |
| ·主要仪器与设备 | 第39-40页 |
| ·细胞株 | 第40页 |
| ·样品与主要试剂 | 第40-41页 |
| ·实验动物 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·体外清除羟自由基(·OH)试验 | 第41-42页 |
| ·细胞培养 | 第42页 |
| ·MTT法测细胞活性 | 第42页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测DNA片断化情况 | 第42页 |
| ·细胞呼吸耗氧率的测定 | 第42页 |
| ·酶标仪法测定Ca~(2+)诱导的线粒体肿胀度 | 第42页 |
| ·统计分析 | 第42-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-57页 |
| ·AA-Eu、AA-Tb体外清除羟自由基(·OH)活性 | 第43页 |
| ·AA、AA-Ce、AA-Tb、AA-Eu抑制肿瘤细胞增殖 | 第43-44页 |
| ·AA、AA-Ce、AA-Tb、AA-Eu抑制肿瘤细胞生长IC_(50)的测定 | 第44-53页 |
| ·AA-Tb对Hela细胞DNA的影响 | 第53-54页 |
| ·AA-Tb和AA-Eu引起细胞呼吸耗氧率的下降 | 第54页 |
| ·AA-Tb和AA-Eu对抗Ca~(2+)诱导的线粒体肿胀 | 第54-57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| 第四章 以酵母为模式生物筛选线粒体介导凋亡的抗肿瘤药物 | 第58-74页 |
| ·实验材料 | 第58-59页 |
| ·仪器 | 第58页 |
| ·酵母菌株 | 第58-59页 |
| ·主要试剂 | 第59页 |
| ·实验方法 | 第59-62页 |
| ·酵母细胞的培养 | 第59页 |
| ·吸光度法和细胞计数法测酵母细胞的增殖能力 | 第59-60页 |
| ·RT-PCR法鉴定VDAC1缺失酵母M22-2 | 第60页 |
| ·原位纳米压痕系统检测酵母细胞表面机械性能 | 第60页 |
| ·密度离心法提取酵母线粒体 | 第60-61页 |
| ·酶标仪法测定酵母线粒体肿胀度 | 第61页 |
| ·原子力显微镜(Atomic Fluorescence Microscope,AFM)样品的制备及成像 | 第61页 |
| ·统计分析 | 第61-62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-73页 |
| ·酵母菌株的鉴定 | 第62页 |
| ·M-3和M22-2生长曲线的测定 | 第62-63页 |
| ·5-Fu对M-3和M22-2增殖的影响 | 第63-65页 |
| ·As_2O_3对M-3和M22-2增殖的影响 | 第65-67页 |
| ·AA对M-3和M22-2增殖的影响 | 第67-68页 |
| ·原位纳米力学测试系统下酵母细胞表面机械性能测定方法的建立 | 第68-71页 |
| ·依靠原子力显微镜分析酵母线粒体外膜表观形貌方法的建立 | 第71-73页 |
| ·本章小结 | 第73页 |
| ·展望 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 在学期间发表的论文及会议论文摘要 | 第83页 |