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己烯雌酚单克隆抗体制备与确证及其免疫亲和柱的试制

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 绪论第13-21页
   ·己烯雌酚概述第13-15页
     ·己烯雌酚的主要用途第13-14页
     ·己烯雌酚的毒副作用第14-15页
   ·己烯雌酚常用检测方法第15-17页
     ·高效液相色谱第16页
     ·气相色谱串联质谱第16页
     ·液相色谱串联质谱第16页
     ·免疫学检测第16-17页
   ·畜产品中己烯雌酚残留检测的样品前处理技术第17-19页
     ·传统溶剂萃取第17页
     ·超声辅助萃取第17-18页
     ·固相萃取第18页
     ·免疫亲和层析第18-19页
   ·立题依据与意义第19-20页
   ·论文的主要研究内容第20-21页
第二章 完全抗原的的制备与确证第21-33页
   ·引言第21页
   ·试剂与仪器第21-22页
     ·试剂第21-22页
     ·主要仪器设备第22页
   ·试验方法第22-26页
     ·试剂的预处理第22-23页
     ·DES-HS的制备及鉴定分析第23-25页
     ·DES完全抗原的制备及鉴定分析第25-26页
   ·结果与讨论第26-32页
     ·DES-HS合成条件的优化结果第26-28页
     ·DES-HS的红外光谱分析第28-29页
     ·DES-HS-BSA的紫外光谱分析第29页
     ·DES-HS-BSA的红外光谱分析第29-30页
     ·DES-HS-BSA的SDS-PAGE第30页
     ·DES-HS-BSA的高分辨率质谱检测第30-32页
   ·本章小结第32-33页
第三章 动物免疫及DES间接非竞争ELISA法的建立第33-49页
   ·引言第33页
   ·试剂与仪器第33-34页
     ·主要试剂第33-34页
     ·主要仪器设备第34页
   ·试验动物第34页
   ·试验方法第34-40页
     ·完全抗原溶液的配制第34页
     ·DES-HS-BSA免疫小鼠第34-35页
     ·DES-HS-KLH免疫小鼠第35-36页
     ·间接非竞争ELISA检测方法的建立第36-40页
     ·抗血清的效价测定第40页
   ·结果与分析第40-48页
     ·间接非竞争ELISA检测方法的建立第40-46页
     ·免疫方法和免疫剂量对免疫效价的影响第46页
     ·不同载体蛋白对免疫效价的影响第46-47页
     ·免疫次数对免疫效价的影响第47-48页
   ·本章小结第48-49页
第四章 DES单克隆抗体的制备与鉴定第49-62页
   ·引言第49页
   ·试剂与仪器第49-51页
     ·主要试剂第49-50页
     ·主要仪器设备第50-51页
   ·试验动物第51页
   ·细胞第51页
   ·试验方法第51-57页
     ·试剂的配制第51-52页
     ·细胞融合第52-53页
     ·融合细胞的培养及阳性杂交瘤细胞的筛选与克隆第53-54页
     ·腹水型DES单克隆抗体的制备第54-55页
     ·抗体亚型的鉴定第55页
     ·腹水中抗体的纯化第55页
     ·抗体蛋白含量的测定方法第55页
     ·SDS-PAGE鉴定DES单抗第55页
     ·DES单抗效价的测定和工作浓度的确定第55-56页
     ·DES抑制标准曲线及半数抑制浓度IC_(50)的测定第56-57页
     ·DES单抗亲和性的测定第57页
     ·DES单抗特异性的测定第57页
   ·结果与分析第57-61页
     ·抗体亚型鉴定结果第57-58页
     ·纯化后抗体蛋白浓度第58页
     ·DES单抗的SDS-PAGE鉴定第58页
     ·DES单抗效价和工作浓度第58-59页
     ·DES抑制标准曲线及半数抑制浓度IC_(50)的测定第59-60页
     ·DES单抗的亲和常数第60页
     ·DES单抗特异性第60-61页
   ·本章小结第61-62页
第五章 DES免疫亲和层析柱的试制及其性能研究第62-68页
   ·引言第62页
   ·试剂与仪器第62-63页
     ·主要试剂第62-63页
     ·主要仪器第63页
   ·试验方法第63-65页
     ·DES单抗IAC柱的制备第63-64页
     ·DES单抗IAC柱性能的试验研究第64页
     ·DES的HPLC-MS检测方法的建立第64-65页
   ·结果与分析第65-67页
     ·DES标样的HPLC-MS检测第65-66页
     ·DES的免疫亲和层析第66-67页
   ·本章小结第67-68页
第六章 主要结论与展望第68-70页
   ·主要结论第68页
   ·工作展望第68-70页
参考文献第70-76页
致谢第76-77页
在读学位期间发表的论文第77页

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