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原壳小球藻番茄红素ε环化酶基因的克隆和分析

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-16页
1. 绪论第16-32页
   ·叶黄素的特性和生物合成途径第16-27页
     ·叶黄素的理化特性第16-18页
     ·叶黄素的生理活性第18-19页
     ·叶黄素的生物合成途径第19-22页
     ·叶黄素生物合成主要相关的酶及其基因第22-26页
     ·叶黄素生物合成的基因工程第26-27页
   ·小球藻的概述和分子生物学研究进展第27-30页
     ·小球藻的概述第27-28页
     ·小球藻分子生物学的研究进展第28-30页
   ·利用小球藻生产叶黄素的研究进展第30-31页
   ·研究的目的和意义第31-32页
2. 原壳小球藻LCYE 基因的克隆第32-62页
   ·材料与试剂第32-35页
     ·培养基与试剂第32-33页
     ·藻种及其培养方法第33-34页
     ·引物设计与合成第34-35页
   ·方法第35-49页
     ·原壳小球藻总RNA 的抽提和检测第35-38页
     ·LCYE 核心片段的克隆第38-42页
     ·3’-RACE 获得目的基因的3’端片段第42-44页
     ·5’-RACE 获得目的基因的5’端片段第44-48页
     ·LCYE 全长cDNA 的生物信息学分析第48-49页
   ·结果与讨论第49-60页
     ·小球藻总RNA 的纯度第49-50页
     ·核心片段和RACE 扩增的结果和分析第50-51页
     ·原壳小球藻的LCYE 基因全长cDNA 的确定及序列特征分析第51-53页
     ·蛋白质序列多重比对和蛋白质功能位点预测第53-56页
     ·蛋白质二级和三级结构的分析第56-58页
     ·LCYE 基因的分子进化分析第58-60页
   ·小结第60-62页
3. 不同培养方式对LCYE 基因表达水平和叶黄素产量的影响第62-84页
   ·高效液相色谱法测定小球藻叶黄素含量第63-71页
     ·藻种样品培养条件第63页
     ·仪器和试剂第63-64页
     ·实验条件第64-65页
     ·结果与分析第65-71页
   ·TAQMAN 荧光定量PCR 测定小球藻LCYE 的表达量第71-78页
     ·Taqman 探针设计第71-72页
     ·仪器和试剂第72页
     ·方法第72-74页
     ·结果和分析第74-78页
   ·讨论第78-81页
   ·小结第81-84页
参考文献第84-94页
附录第94-95页
致谢第95-96页
攻读学位期间的学术论文第96页
已登录 GenBank 的基因第96页

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