| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 1. 文献综述 | 第11-27页 |
| ·禽流感概述 | 第11页 |
| ·禽流感的流行情况 | 第11-15页 |
| ·禽流感在国外的流行情况 | 第11-13页 |
| ·禽流感在国内的流行情况 | 第13-14页 |
| ·禽流感公共卫生意义 | 第14-15页 |
| ·禽流感病毒的分类及毒力大小鉴定 | 第15-16页 |
| ·禽流感病毒粒子的结构及生物学功能 | 第16-20页 |
| ·禽流感病毒的诊断、检测技术研究进展 | 第20-24页 |
| ·禽流感药物和疫苗的研制 | 第24页 |
| ·禽流感病毒分子聚合酶结构的研究 | 第24-26页 |
| ·本实验的目的和意义 | 第26-27页 |
| 2. 材料与方法 | 第27-50页 |
| ·材料 | 第27-32页 |
| ·毒株、质粒和菌株 | 第27页 |
| ·酶与试剂 | 第27页 |
| ·实验仪器 | 第27-28页 |
| ·主要试剂及溶液的配制 | 第28-32页 |
| ·方法 | 第32-50页 |
| ·PB1_P 的生物信息学分析 | 第32页 |
| ·RT-PCR | 第32-38页 |
| ·重组质粒pET-28a-PB1_P 的构建及鉴定 | 第38-41页 |
| ·重组工程菌 BL21/PB1_P 的表达和最佳条件筛选 | 第41-45页 |
| ·诱导表达产物的Western blot 检测 | 第45-46页 |
| ·目的蛋白纯化 | 第46-48页 |
| ·PB1_P 晶体生长实验 | 第48-50页 |
| 3. 结果与分析 | 第50-61页 |
| ·PB1_P 的生物信息学分析结果 | 第50页 |
| ·PB1_P 基因RT-PCR 扩增产物及琼脂糖凝胶回收 | 第50-52页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第52-54页 |
| ·PCR 和双酶切鉴定 | 第52-53页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第53-54页 |
| ·重组工程菌BL21/PB1_P 的表达鉴定及条件优化 | 第54-58页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第58-60页 |
| ·Ni-NTA 亲和层析纯化 | 第58页 |
| ·分子筛层析 | 第58-60页 |
| ·目的蛋白含量测定 | 第60页 |
| ·蛋白质结晶 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-64页 |
| ·目的基因的扩增 | 第61页 |
| ·载体的构建 | 第61页 |
| ·蛋白的纯化 | 第61-62页 |
| ·层析技术的应用 | 第62页 |
| ·蛋白晶体生长 | 第62-64页 |
| 5 总结 | 第64-65页 |
| ·结论 | 第64页 |
| ·创新点 | 第64页 |
| ·待解决问题 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
