| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1 鞭毛蛋白的结构特点 | 第12页 |
| 2 鞭毛蛋白对TLR5 的作用 | 第12-13页 |
| 3 鞭毛蛋白的佐剂作用 | 第13-16页 |
| ·对体液免疫的影响 | 第13-14页 |
| ·对细胞免疫的影响 | 第14页 |
| ·对细胞因子的调节作用 | 第14-15页 |
| ·对粘膜免疫的调节作用 | 第15-16页 |
| 4 本论文的主要目的意义和研究内容 | 第16-18页 |
| 第二章 鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白FLIC 的原核表达及纯化 | 第18-34页 |
| 1 材料与方法 | 第18-25页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·质粒和菌株 | 第18页 |
| ·主要药品和试剂 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-25页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第19-20页 |
| ·目的基因flic / flic-m 片段的回收与纯化 | 第20页 |
| ·TA 克隆及测序 | 第20-22页 |
| ·克隆质粒与表达载体的酶切与纯化 | 第22-24页 |
| ·重组融合蛋白的表达、提取和纯化 | 第24-25页 |
| 2 结果分析 | 第25-31页 |
| ·原核重组表达载体的构建和鉴定结果 | 第25-29页 |
| ·重组蛋白FliC 和FliC-m 的原核表达和纯化结果 | 第29-31页 |
| 3 讨论 | 第31-33页 |
| 4 小结 | 第33-34页 |
| 第三章 融合蛋白去内毒素及分析鉴定 | 第34-43页 |
| 1 材料与方法 | 第35-37页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·质粒和菌株 | 第35页 |
| ·主要药品和试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·融合蛋白的蛋白含量测定 | 第36页 |
| ·融合蛋白的内毒素检测 | 第36页 |
| ·融合蛋白的生物活性检测 | 第36-37页 |
| ·融合蛋白的Western blot 免疫原性分析 | 第37页 |
| 2 结果分析 | 第37-40页 |
| ·微量蛋白测定法检测结果 | 第37-38页 |
| ·融合蛋白的内毒素测定 | 第38页 |
| ·鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白FliC/FliC-m 生物学活性鉴定 | 第38-39页 |
| ·融合蛋白FliC 免疫原性鉴定 | 第39-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 4 小结 | 第42-43页 |
| 第四章 鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白对O 型口蹄疫疫苗的佐剂作用研究 | 第43-57页 |
| 1 材料与方法 | 第43-50页 |
| ·材料 | 第43-45页 |
| ·试验动物 | 第43页 |
| ·抗原与佐剂 | 第43-44页 |
| ·试剂和仪器 | 第44-45页 |
| ·方法 | 第45-50页 |
| ·疫苗、佐剂配制 | 第45页 |
| ·试验小鼠分组和免疫 | 第45页 |
| ·MTT 法检测淋巴细胞增殖 | 第45-46页 |
| ·间接ELISA 法检测抗FMDV 抗体及其亚类 | 第46-47页 |
| ·Real-time PCR 法对脾细胞因子中目的基因的表达相对定量 | 第47-50页 |
| ·数据分析 | 第50页 |
| 2 结果与讨论 | 第50-55页 |
| ·鞭毛蛋白对淋巴细胞体外增殖的影响 | 第50-51页 |
| ·FliC 对血清FMDV 特异性IgG 及其亚类的影响 | 第51-52页 |
| ·FliC 对细胞体外培养上清中细胞因子水平的影响 | 第52-55页 |
| 3 讨论 | 第55-56页 |
| 4 小结 | 第56-57页 |
| 结论、创新点和展望 | 第57-58页 |
| 1 结论 | 第57页 |
| 2 创新点 | 第57页 |
| 3 展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录1 英文缩写注释 | 第63-64页 |
| 附录2 常用试剂配方 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
