| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩写词 | 第10-11页 |
| 目录 | 第11-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-26页 |
| 引言 | 第15-17页 |
| 综述一 动物结核病研究进展 | 第17-21页 |
| 1 动物结核病诊断技术 | 第17-19页 |
| ·病原检测 | 第17-18页 |
| ·迟发型超敏反应 | 第18页 |
| ·血清学检测 | 第18-19页 |
| 2 疫苗和诊断试剂的需求 | 第19-21页 |
| 综述二 鹿结核病研究进展及存在问题 | 第21-26页 |
| 1 世界鹿结核病的流行概况 | 第21-22页 |
| 2 鹿结核病的传播特点 | 第22-23页 |
| 3 鹿结核病的诊断 | 第23-24页 |
| ·病理剖检 | 第23页 |
| ·皮内试验 | 第23页 |
| ·血清学诊断 | 第23-24页 |
| ·PCR检测法 | 第24页 |
| 4 鹿结核病病原分型 | 第24页 |
| 5 鹿结核病防控相关政策 | 第24-25页 |
| 6 鹿结核病预防 | 第25页 |
| 7 总结 | 第25-26页 |
| 第二章 实验内容 | 第26-96页 |
| 实验一 结核分枝杆菌Taq-man PCR检测方法的建立 | 第26-51页 |
| 1 材料与方法 | 第26-31页 |
| ·材料 | 第26-29页 |
| ·方法 | 第29-31页 |
| 2 结果 | 第31-46页 |
| ·阳性质粒的克隆及鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组质粒浓度测定 | 第32页 |
| ·Taqman PCR反应条件优化 | 第32页 |
| ·Taqman PCR引物与探针浓度的优化 | 第32页 |
| ·Taqman PCR方法建立 | 第32-33页 |
| ·标准曲线的建立 | 第33-35页 |
| ·Taqman PCR特异性试验 | 第35-37页 |
| ·Taqman PCR敏感性试验 | 第37-41页 |
| ·Taqman PCR重复性试验 | 第41-43页 |
| ·临床样品检测试验 | 第43-46页 |
| 3 讨论 | 第46-50页 |
| ·标准质粒的构建 | 第46-47页 |
| ·Taqman PCR绝对定量标准曲线的建立 | 第47页 |
| ·阳性结果的判断 | 第47-48页 |
| ·引物与探针的选择 | 第48页 |
| ·本研究建立方法的优点 | 第48-50页 |
| 4 小结 | 第50-51页 |
| 实验二 吉林省鹿结核病血清学检测及病原分离 | 第51-66页 |
| 1 材料与方法 | 第51-56页 |
| ·材料 | 第51-54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| 2 结果 | 第56-62页 |
| ·吉林省鹿结核病血清学检测结果 | 第56-57页 |
| ·不同性别鹿结核病血清学检测结果 | 第57页 |
| ·不同年龄鹿结核病检测结果 | 第57-58页 |
| ·病料Taqman PCR检测结果 | 第58-60页 |
| ·分离菌株形态学检查 | 第60-61页 |
| ·分离菌株Taqman PCR检测 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-65页 |
| ·吉林省鹿结核病流行状况 | 第62-63页 |
| ·影响鹿结核病发病率的因素 | 第63-64页 |
| ·结核分枝杆菌的分离培养 | 第64页 |
| ·ELISA检测、Taqman PCR检测和分离培养之间的比较 | 第64-65页 |
| 4 小结 | 第65-66页 |
| 实验三 吉林省鹿源结核杆菌MLVA分型研究 | 第66-83页 |
| 1 材料与方法 | 第66-71页 |
| ·材料 | 第66-69页 |
| ·试验方法 | 第69-71页 |
| 2 结果 | 第71-80页 |
| ·检测的重复性和准确性 | 第71-72页 |
| ·MLVA位点筛选 | 第72页 |
| ·不同位点多态性分析 | 第72-78页 |
| ·MLVA位点PCR产物测序结果 | 第78-79页 |
| ·MLVA分型 | 第79-80页 |
| ·不同组合位点分辨力比较 | 第80页 |
| 3 讨论 | 第80-82页 |
| ·分型位点的选择 | 第80-81页 |
| ·吉林省鹿源结核杆菌基因型特点 | 第81-82页 |
| 4 小结 | 第82-83页 |
| 实验四 分离菌株耐药相关基因研究 | 第83-96页 |
| 1 材料与方法 | 第83-86页 |
| ·材料 | 第83-85页 |
| ·方法 | 第85-86页 |
| 2 结果 | 第86-93页 |
| ·菌株耐药实验 | 第86-87页 |
| ·PCR方法的特异性和重复性检测 | 第87-88页 |
| ·标准菌株PCR产物测序 | 第88-91页 |
| ·临床分离株PC R扩增结果 | 第91-92页 |
| ·临床分离株测序结果 | 第92-93页 |
| 3 讨论 | 第93-95页 |
| ·耐药结核分枝杆菌的检测 | 第93-94页 |
| ·耐INH相关katG基因检测 | 第94页 |
| ·rpsL基因检测 | 第94-95页 |
| ·吉林省鹿源结核杆菌耐药性分析 | 第95页 |
| 4 小结 | 第95-96页 |
| 结论 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
| 作者简介 | 第123-124页 |