摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1 前言 | 第9-24页 |
1.1 赭曲霉毒素A概述 | 第9-14页 |
1.1.1 OTA的理化性质 | 第9页 |
1.1.2 OTA的检测方法 | 第9-14页 |
1.2 核酸适配体概述 | 第14-16页 |
1.2.1 适配体概述 | 第14页 |
1.2.2 适配体的优点 | 第14-15页 |
1.2.3 适配体的应用 | 第15-16页 |
1.3 SELEX技术 | 第16-19页 |
1.3.1 SELEX技术原理 | 第16-17页 |
1.3.2 SELEX技术特点 | 第17页 |
1.3.3 SELEX筛选方法 | 第17-19页 |
1.4 纳米材料 | 第19-22页 |
1.4.1 氧化石墨烯 | 第19-20页 |
1.4.2 纳米金粒子 | 第20-22页 |
1.5 课题的研究意义、目的及研究内容 | 第22-24页 |
1.5.1 本文的研究意义 | 第22页 |
1.5.2 主要研究内容 | 第22-24页 |
2 材料与方法 | 第24-34页 |
2.1 实验材料 | 第24-26页 |
2.1.1 主要试剂 | 第24-25页 |
2.1.2 主要的仪器与设备 | 第25-26页 |
2.1.3 培养基及各种溶液的配制 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-34页 |
2.2.1 OTA核酸适配体的筛选 | 第26-30页 |
2.2.2 构建基于核酸适配体与GO的荧光传感器 | 第30-32页 |
2.2.3 构建基于核酸适配体的胶体金分光光度法传感器 | 第32-34页 |
3 结果和讨论 | 第34-58页 |
3.1 OTA核酸适配体的筛选 | 第34-46页 |
3.1.1 GO与预处理文库(ssDNA)吸附比例的确定 | 第34页 |
3.1.2 特殊结合缓冲液的确定 | 第34-35页 |
3.1.3 PCR条件的优化 | 第35-37页 |
3.1.4 次级文库的表征 | 第37页 |
3.1.5 OTA适配体的体外筛选 | 第37-38页 |
3.1.6 克隆结果表征 | 第38-40页 |
3.1.7 候选适配体的表征 | 第40-44页 |
3.1.8 亲和力 | 第44页 |
3.1.9 特异性分析 | 第44-46页 |
3.2 基于核酸适配体与GO的荧光传感器对OTA的检测 | 第46-50页 |
3.2.1 实验可行性分析 | 第46页 |
3.2.2 OTA对GO荧光信号的影响 | 第46-47页 |
3.2.3 实验条件的优化 | 第47-49页 |
3.2.4 标准曲线 | 第49-50页 |
3.2.5 加标回收率及重复性 | 第50页 |
3.3 基于核酸适配体的胶体金分光光度法检测OTA | 第50-58页 |
3.3.0 实验原理 | 第50-51页 |
3.3.1 胶体金的表征 | 第51页 |
3.3.2 氯化钠溶液浓度优化结果 | 第51-52页 |
3.3.3 核酸适配体浓度优化结果 | 第52-53页 |
3.3.4 孵育时间的优化 | 第53-55页 |
3.3.5 标准曲线建立 | 第55页 |
3.3.6 特异性分析 | 第55-56页 |
3.3.7 加标回收率及重复性实验 | 第56-57页 |
3.3.8 方法比较 | 第57-58页 |
4 结论 | 第58-59页 |
4.1 全文总结 | 第58页 |
4.2 论文创新点 | 第58页 |
4.3 论文不足之处 | 第58-59页 |
5 展望 | 第59-60页 |
6 参考文献 | 第60-67页 |
7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第67-68页 |
8 致谢 | 第68页 |