| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 主要英文缩略词对照表 | 第9-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-48页 |
| 1.1 真核细胞中基因表达的人工调控系统 | 第10-21页 |
| 1.1.1 转录水平调控技术 | 第10-15页 |
| 1.1.2 转录后水平调控技术 | 第15-20页 |
| 1.1.3 翻译后水平调控技术 | 第20-21页 |
| 1.2 真核细胞的翻译起始过程及调控机制 | 第21-30页 |
| 1.2.1 真核细胞的翻译起始过程 | 第21-28页 |
| 1.2.2 真核细胞翻译起始过程的调控机制 | 第28-30页 |
| 1.3 长非编码RNA | 第30-35页 |
| 1.3.1 长非编码RNA的结构 | 第31-33页 |
| 1.3.2 长非编码RNA的功能机制 | 第33-35页 |
| 1.4 SINE家族 | 第35-43页 |
| 1.4.1 SINE家族的结构、起源及进化 | 第36-38页 |
| 1.4.2 SINE家族的转录、转录后修饰及扩增 | 第38-40页 |
| 1.4.3 SINE家族的作用 | 第40-43页 |
| 1.4.4 SINEB2的研究进展 | 第43页 |
| 1.5 课题的背景、意义及研究进展 | 第43-46页 |
| 1.6 论文研究方法 | 第46-47页 |
| 1.7 论文结构 | 第47-48页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第48-72页 |
| 2.1 实验材料 | 第48-49页 |
| 2.2.1 细胞培养试剂 | 第48页 |
| 2.2.2 分子生化实验试剂 | 第48-49页 |
| 2.2 实验仪器 | 第49-50页 |
| 2.3 实验方法 | 第50-72页 |
| 2.3.1 质粒构建及提取 | 第50-63页 |
| 2.3.2 原代细胞的分离方法 | 第63页 |
| 2.3.3 细胞培养 | 第63-64页 |
| 2.3.4 细胞转染 | 第64-65页 |
| 2.3.5 流式细胞检测(FCM) | 第65页 |
| 2.3.6 反转录及实时定量PCR检测(qRT-PCR) | 第65页 |
| 2.3.7 免疫印记实(Westernblot) | 第65-67页 |
| 2.3.8 质谱 | 第67-68页 |
| 2.3.9 阿利新蓝染色 | 第68页 |
| 2.3.10 cDNA3’端快速扩增实验(3’RACE) | 第68页 |
| 2.3.11 荧光素酶检测 | 第68页 |
| 2.3.12 酶联免疫吸附实验(Elisa) | 第68-69页 |
| 2.3.13 体外转录 | 第69页 |
| 2.3.14 琼脂糖电泳 | 第69-70页 |
| 2.3.15 非变性PAGE电泳(nativePAGE) | 第70页 |
| 2.3.16 变性PAGE电泳 | 第70页 |
| 2.3.17 体外RNApull-down实验 | 第70页 |
| 2.3.18 RNA结合蛋白沉淀实验(RIP) | 第70-71页 |
| 2.3.19 钴柱蛋白纯化实验 | 第71页 |
| 2.3.20 凝胶电泳迁移实验(EMSA) | 第71页 |
| 2.3.21 统计学分析 | 第71-72页 |
| 第3章 RNAe技术的开发 | 第72-85页 |
| 3.1 RNAe的功能 | 第72-74页 |
| 3.2 RNAe的靶向特异性 | 第74-76页 |
| 3.3 RNAe的适用广泛性 | 第76-79页 |
| 3.3.1 RNAe适用的细胞类型 | 第76-77页 |
| 3.3.2 RNAe适用的蛋白类型 | 第77-79页 |
| 3.4 RNAe的形式多样性 | 第79-80页 |
| 3.4.1 带有5’帽子结构的RNAe | 第79-80页 |
| 3.4.2 不带5’帽子结构的RNAe | 第80页 |
| 3.5 RNAe的优化使用 | 第80-83页 |
| 3.5.1 配对区的优化 | 第80-82页 |
| 3.5.2 整体骨架的优化 | 第82-83页 |
| 3.6 讨论 | 第83-84页 |
| 3.7 小结 | 第84-85页 |
| 第4章 新RNAe序列的筛选 | 第85-91页 |
| 4.1 基于RNAe的元件特点进行筛选(bottom-up方法) | 第85-87页 |
| 4.2 基于RNAe的功能特性进行筛选(top-down方法) | 第87-89页 |
| 4.3 讨论 | 第89-90页 |
| 4.4 小结 | 第90-91页 |
| 第5章 RNAe作用机制的研究 | 第91-111页 |
| 5.1 RNAe参与的生物过程 | 第91-94页 |
| 5.1.1 RNAe对靶标mRNA的影响 | 第91-92页 |
| 5.1.2 RNAe对靶标mRNA翻译过程的影响 | 第92-93页 |
| 5.1.3 RNAe对靶标mRNA结合的核糖体数量的影响 | 第93-94页 |
| 5.2 对RNAe的结构研究 | 第94-98页 |
| 5.2.1 RNAe的一级结构研究 | 第94-95页 |
| 5.2.2 RNAe的二级结构研究 | 第95-97页 |
| 5.2.3 RNAe的三级结构研究 | 第97-98页 |
| 5.3 RNAe的结合蛋白 | 第98-108页 |
| 5.3.1 RNAe结合蛋白的筛选 | 第98-102页 |
| 5.3.2 RNAe结合蛋白的确定 | 第102-105页 |
| 5.3.3 RNAe结合蛋白的功能 | 第105-108页 |
| 5.4 讨论 | 第108-110页 |
| 5.5 小结 | 第110-111页 |
| 第6章 RNAe应用的探索 | 第111-120页 |
| 6.1 RNAe在抗体生产中的应用初探 | 第111-115页 |
| 6.1.1 质粒表达的RNAe对抗体表达的影响 | 第111-112页 |
| 6.1.2 RNAe细胞系对抗体10E8表达的影响 | 第112-113页 |
| 6.1.3 RNAe对同质粒上抗体的表达的影响 | 第113-115页 |
| 6.2 RNAe在高通量基因筛选中的应用初探 | 第115-118页 |
| 6.2.1 RNAe对增殖相关基因的筛选 | 第115-116页 |
| 6.2.2 RNAe输入细胞的形式多样 | 第116-117页 |
| 6.2.3 RNAe与RNAi在筛选增殖相关基因中的效果比较 | 第117-118页 |
| 6.3 讨论 | 第118-119页 |
| 6.4 小结 | 第119-120页 |
| 第7章 总结与展望 | 第120-126页 |
| 7.1 论文总结 | 第120-122页 |
| 7.2 论文展望 | 第122-126页 |
| 7.2.1 对于RNAe类RNA的生理功能的探讨 | 第122-123页 |
| 7.2.2 对RNAe机制及机制研究方法的讨论 | 第123-124页 |
| 7.2.3 对于RNAe在先天基因表达不足类疾病治疗中应用的探讨 | 第124-125页 |
| 7.2.4 对于RNAe在基因治疗方面应用的探讨 | 第125-126页 |
| 参考文献 | 第126-146页 |
| 致谢 | 第146-149页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第149页 |
